Будьте всегда 120 на 70!

Содержание

Лечение стафилококка у грудных детей, как лечить стафилококк у ребенка

Лечение стафилококка у детей

Стафилококковая инфекция представляет собой бактериальное заболевание, которое характеризуется распространением гнойного процесса в тканях и органах, поражаемых микроорганизмами. Среди прочих инфекций такая патология встречается наиболее часто. Объясняется это тем, что бактерии стафилококки чрезвычайно распространены в природе и способны вызывать десятки различных заболеваний, которые могут представлять серьезную опасность для новорожденного или грудного ребенка.

Опасные виды стафилококков

Стафилококки — это целый род микробов. На сегодняшний день насчитывают 27 видов, но только 3 из них представляют опасность для человека и могут спровоцировать ту или иную болезнь. Среди них: сапрофитный, эпидермальный и золотистый стафилококки. Серьезную опасность для новорожденных представляет последний вид микроба, который в процессе своей жизнедеятельности выделяет сильнейший токсин эксфолиатин.

Причины стафилококковой инфекции

Источником инфекции может стать больной человек или бактерионоситель. Для ребенка она опасна при условии пониженного иммунитета, т.к. в норме существуют бактерии, которые способны сдерживать стафилококк, не давая ему развиваться. Как только такой баланс нарушается, бактерия начинает размножаться, приводя к серьезным проблемам со здоровьем. Инфицирование может произойти контактным путем (простые прикосновения, кормление грудью), пищевым (через еду или нестерильную посуду) или воздушно-капельным (например, в больнице или роддоме).

Заболевания, вызываемые стафилококком

Стафилококк у грудных детей может вызывать как легкие, так и тяжелые формы различных заболеваний. Среди самых серьезных последствий – пневмония и сепсис. Кроме этого бактерия способна спровоцировать развитие следующих болезней:

  • органы дыхания: ринит, тонзиллит, фарингит, бронхит, трахеит, плеврит;
  • кости и суставы: артрит, остеомиелит;
  • ЦНС: абсцесс мозга, менингит;
  • мочевыводящие пути: очаговый нефрит, пиелонефрит, пиелит, цистит;
  • сердечно-сосудистая система: флебит, перикардит, эндокардит;
  • кожа: пиодермия, карбункулы, фурункулы, фолликулиты;
  • ЖКТ: дисбактериоз и др.

Симптомы инфекции

Проявления стафилококковой инфекции разнообразны и зависят от заболевания, вызванного микробом. Среди общих симптомов можно выделить субфебрильную или высокую температуру, понос, рвоту, появление воспалений на коже, напоминающих ожоги. При наличии подобных признаков стоит немедленно обратиться в больницу для проведения тестов на наличие стафилококков в организме.

Лечение стафилококковой инфекции

Лечение стафилококка у детей – достаточно трудная задача, к которой нужно подходить комплексно. Среди основных методов выделяют следующие.

Прием лекарственных препаратов. Такое лечение стафилококка у грудных детей заключается в использовании антибиотиков и других противомикробных препаратов (например, препараты бактериофагов, активные в отношении бактерий рода стафилококк: Бактериофаг стафилококковый, Пиобакетриофаг поливалентный очищенный, Секстафаг®, Интести-бактериофаг, Пиобактериофаг комплексный). Препараты бактериофагов назначаются врачом после предварительного определения фагочувствительности.

Прием витаминов и растительных препаратов. Такое лечение назначается с целью укрепления иммунитета, что помогает в борьбе с инфекцией, а также снижает риск возникновения рецидивов.

Хирургические методы. К такому виду лечения прибегают в случае серьезных гнойных форм инфекции для удаления абсцессов и фурункулов.

Переливание крови. Лечить стафилококк можно и таким методом. Во время процедуры забранная из вены ребенка кровь вводится обратно внутримышечно, что помогает стимулировать иммунитет.

Не пытайтесь самостоятельно вылечить стафилококк. Обязательно обратитесь к врачу!

Уточнить все возникшие вопросы о бактериофагах Вы можете, задав вопрос нашему специалисту на сайте.

«Страшный зверь» стафилококк / «Мой кроха и я»

Сентябрь 2010

Наталия Рубина; консультанты: Ирина Перрэн, заведующая педиатрическим отделением Европейского Медицинского Центра; Наталья Таран, неонатолог, к. м. н., научный I сотрудник научно-консультативного отделения 1 НИИ Питания РАМН

Сразу после рождения малыш сталкивается с очень опасным врагом — золотистым стафилококком. Как распознать стафилококковую инфекцию и, по возможности, избежать её?

История одной мамы

На 12-й день после выписки из роддома Олеся обнаружила, что у её маленькой дочки опухли и стали гноиться глазки, а на попке появились покраснения. При этом малышка не переставая плакала. Участковый врач осмотрела девочку и предположила, что покраснения на её коже — результат погрешностей в питании мамы. Олеся села на жесточайшую диету. Однако ещё через две недели вокруг рта у ребёнка появились какие-то высыпания, кожа начала отчаянно шелушиться, а у самой Олеси появились трещины на сосках, грудь стала твёрдой и очень болезненной, подскочила температура.

В детской поликлинике ей предложили сдать грудное молоко на анализ. Через пару дней стали известны его результаты — в молоке обнаружен эпидермальный и золотистый стафилококк. Участковый врач настаивала на прекращении грудного вскармливания и назначила смесь. В течение месяца Олеся и её дочь принимали антибиотики. При этом она продолжала сцеживать молоко, не давая его ребёнку. За этот месяц малышке стало заметно лучше, и отпала необходимость давать ей лекарства. Второй анализ молока показал наличие в нём только эпидермального стафилококка, но врач всё равно настаивала на отмене грудного вскармливания. Тогда Олеся решила обратиться за консультацией к другому доктору, и тот заверил её, что наличие в молоке любой разновидности стафилококка не опасно для ребёнка. Когда Олесиной дочке исполнилось 2 месяца, она уже снова питалась исключительно маминым молоком.

Прокомментировать эту ситуацию мы попросили неонатолога Наталью Таран: «Скорее всего, девочка заразилась стафилококковой инфекцией ещё в роддоме, и после выписки болезнь перешла в активную форму. А уже от ребёнка через трещины на сосках заразилась и мама. Те высыпания на коже, которые участковый врач приняла за результат неправильного питания мамы, скорее всего, были также вызваны стафилококковой инфекцией. При этом странно, что врач не уделила никакого внимания симптомам конъюнктивита. Ведь он тоже может быть вызван стафилококком. Гнойное отделяемое из глаз нужно было сдать на анализ, чтобы выявить возбудителя. Зато врач явно переусердствовала, отменив грудное вскармливание. Если мама получает антибиотики против стафилококковой инфекции, то с молоком лечение против болезни получает и ребёнок. Грудное вскармливание отменяется в единственном случае — если у мамы гнойный мастит. Но молоко с гнойным отделяемым ребёнок не станет пить и сам. Хорошо, что мама не растерялась и, почувствовав сомнение, обратилась за дополнительной консультацией к другому специалисту».

Стафилококки — это целый род бактерий. На сегодня известно множество видов стафилококка, многие из которых живут на коже и слизистых оболочках человека, а также в кишечнике. Большинство стафилококков абсолютно безвредны, вызывать болезни могут только три представителя этого семейства — эпидермальный, сапрофитный и золотистый стафилококки. Причём последний — самый опасный. Организм здорового человека с лёгкостью справляется со стафилококком. Однако если по каким-то причинам снижается иммунитет, стафилококк идёт в атаку, вызывая различные заболевания. Этот микроб также может проникнуть в организм там, где нарушена целостность кожи (у роженицы, к примеру, через трещины на сосках, а у новорождённого — через пупочную ранку).

Знакомство со стафилококком возможно сразу же после рождения — младенец может получить эту бактерию, проходя через родовые пути или же с кожи мамы, как только она впервые приложит его к груди. Большинство детей легко справляется с микробом, но у недоношенных малышей и тех, кто родился со сниженным иммунитетом вследствие осложнений во время беременности, стафилококк может вызвать различные заболевания.




Симптомы

И у детей, и у взрослых различают раннюю и позднюю форму стафилококковой инфекции. Ранняя проявляется в течение нескольких часов после попадания бактерии в организм, болезнь при этом начинается остро и тяжело — резко повышается температура, могут начаться понос, рвота, ребёнок становится вялым, теряет аппетит. Что характерно, у младенцев с таких симптомов начинаются все инфекции. Поэтому даже не пытайтесь ставить диагноз самостоятельно, а при появлении первых признаков заболевания обращайтесь к врачу. Поздняя форма стафилококковой инфекции проявляется через 3-5 дней. Как правило, инфекция в первую очередь поражает кожу и, если вовремя не начать лечение, может пойти глубже, поражая внутренние органы, и даже вызвать сепсис.

Однако в некоторых случаях болезнь протекает и бессимптомно или с незначительными гнойничковыми поражениями кожи. Так что, если вы заметили на коже ребёнка какие-либо высыпания, не спешите списывать их на погрешности в вашем питании или потницу, — покажите их врачу. Если доктор заподозрит, что они имеют инфекционный характер, он назначит необходимые анализы, чтобы выявить возбудителя. Как правило, в таких случаях делаются соскобы с кожи и общий анализ крови, который покажет, болен ли ребёнок.

Бессимптомное носительство у взрослого крайне опасно для окружающих — ведь человек не знает, что он болен, и не предпринимает никаких мер, являясь при этом источником инфекции. В то же время в организме заболевшего человека количество стафилококка резко возрастает, а его патогенные свойства усиливаются. Поскольку стафилококковая инфекция передаётся контактным путём, то заразиться ей можно, просто прикоснувшись к больному.

«В организме ребёнка, иммунитет которого ослаблен в силу определённых причин, нарушается баланс полезных и вредных бактерий, и золотистый стафилококк может начать активно размножаться, — говорит педиатр Европейского Медицинского Центра Ирина Перрэн. — Но хочу особо отметить: даже если в анализах обнаружен стафилококк, но клинической картины заболевания нет (ребёнок хорошо себя чувствует, прибавляет в весе), то никакого медикаментозного лечения не требуется. Лечат пациента, а не анализы.

Бить тревогу нужно, если у ребёнка есть признаки бактериальной инфекции: повышенная температура, потеря аппетита, снижение прибавки веса, появление гнойничков на коже, воспаление околопупочного кольца, понос и т. д. В таком случае следует незамедлительно обратиться к врачу, который назначит необходимое лечение».

КАК ПРОЯВЛЯЕТСЯ СТАФИЛОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ?

Стафилококковая инфекция вызывает у новорождённых множество самых различных заболеваний. Все они крайне опасны, поэтому при обнаружении первых симптомов обратитесь к врачу.

ЭНТЕРИТ (ЭНТЕРОКОЛИТ)

Признаки болезни


Частый (до 15 раз в сутки) кашицеобразный, слизистый, водянистый ступ, ребёнок плачет, часто срыгивает, его животик вздут. Может подняться высокая температура и начаться рвота. Последнее особенно опасно для младенцев, поскольку приводит к быстрому обезвоживанию организма.

Лечение


Необходима госпитализация. Как только вы заметили первые симптомы, как можно скорее вызывайте врача. А пока доктор едет, восполняйте дефицит жидкости в организме ребёнка — каждые 10 минут давайте ему столовую ложку воды.

Народные средства — их можно использовать только параллельно с лечением в больнице или после выписки.

  • Настой цветов календулы: 1 ч. л. цветов на стакан воды. Давать малышу понемногу в промежутках между кормлениями.

  • Настой цветов ромашки аптечной: 1 ст. л. сухих цветов залить стаканом кипятка, кипятить 5 минут, настаивать 4 часа, процедить. Давать по 1 ч. л. после кормления.

Отвар из корок плодов граната: взять 20 г сухих корок или 50 г зёрен граната, залить стаканом воды, кипятить на медленном огне 30 минут, процедить. Давать пить по 1 ч. л. 2 раза в день.




ИНФЕКЦИОННЫЙ КОНЬЮНКТИВИТ

Признаки болезни


Ребёнок плачет, его глаза покраснели, опухли и слезятся, из них выделяется гной, образуются жёлто-зелёные корки. После сна ресницы склеены гноем так, что малыш с трудом открывает глазки.

Лечение


Назначает врач. Необходимо сдать выделения из глаз в лабораторию на анализ, чтобы выявить возбудителя заболевания и правильно подобрать антибиотик.

Народные средства

  • Протирать веки младенца грудным молоком. Однако это средство не подходит, если и у мамы в анализе молока обнаружен стафилококк.

  • Протирать глаза ребёнка ватными тампонами, смоченными в чайной заварке (крепкий раствор чёрного чая).

  • Прокипятите одну чайную ложку мёда в стакане воды в течение 2 минут. Когда медовая вода остынет, из неё делают примочки на глаза 2 раза в день по 20 минут. Эту же воду капают в глаза по 2-3 капли 2 раза вдень.

  • Одну чайную ложку цветков календулы залить стаканом кипятка, настаивать 30-40 минут, затем тщательно процедить. Полученным раствором несколько раз в день промывать глазки ребёнка.

«ПУЗЫРЧАТКА» (ПЕМФИГУС) НОВОРОЖДЁННЫХ (ПОВЕРХНОСТНОЕ ГНОЙНОЕ ВОСПАЛЕНИЕ КОЖИ)

Признаки болезни


На коже (в нижней части живота, в складках шеи, на спине) образуется множество пузырьков с мутным содержимым. Кожа в этих местах отёчная, покрасневшая. Ребёнок вялый, отказывается от еды.

Лечение


Лекарства назначает только врач. Как правило, это курс антибиотиков.

Народные средства

  • Протирать пузыри ваткой, смоченной в камфорном масле (до 4-5 раз в день).

МНОЖЕСТВЕННЫЕ АБСЦЕССЫ

Признаки болезни


На коже появляются багрово-красные гнойнички, которые вскрываются с выделением жёлто-зелёного гноя. У ребёнка поднимается температура, он вялый или, наоборот, капризный.

Лечение


При первых признаках заболевания обратитесь к врачу.




СЕПСИС

По течению болезни различают септицемию и септикопиемию. Септицемия начинается бурно с развития желтухи, быстрой потери массы тела, тахикардии. Ребёнок беспокойный, у него могут начаться судороги. Септикопиемия начинается с появления гнойничков на коже, иногда развиваются абсцессы. При пупочном сепсисе пупочная ранка воспаляется, кожа вокруг отёчная, красная.

Лечение


Лечение назначает врач. Как правило, это антибиотики широкого спектра, стимулирующая терапия — переливание крови, введение плазмы, витамины.



Нона Овсепян, врач-консультант Независимой лаборатории «ИНВИТРО

Для того чтобы определить наличие стафилококка, а также других вредных бактерий в грудном молоке, необходимо сделать посев молока на микрофлору и золотистый стафилококк с определением чувствительности к антибиотикам. Для анализа грудное молоко сцеживают в стерильную пробирку или баночку (вы можете приобрести их в аптеке или лаборатории). Перед сцеживанием руки и молочные железы необходимо обработать мылом, ареолы сосков вытереть 70%-ным спиртом (каждая грудь обрабатывается отдельным тампоном).

Первая порция (5-10 мл) анализа не используется, сцеживается в отдельную посуду, а вторая (10 мл) — в стерильную посуду для анализа. Молоко из левой и правой груди смешивать нельзя, надо собирать в отдельные контейнеры. Для точного результата анализа между сцеживанием молока и доставкой его лабораторию должно пройти не более 3-х часов.

Параллельно с определением количества и качества бактерий в молоке исследуется их устойчивость к антибиотикам и бактериофагам, это необходимо для правильного подбора препарата для лечения стафилококковой инфекции.

При подозрении на стафилококковую инфекцию у новорождённого необходимо исследование кала на патогенную и условно-патогенную микрофлору. Материалом для этого анализа служит кал после естественной дефекации, который нужно собрать в одноразовый контейнер и как можно быстрее (в течение 3-х часов) доставить в лабораторию. Для того, чтобы результаты были достовернее, рекомендуется провести 2-3 кратное исследование с интервалов 1-2 дня.

Золотистый стафилококк может быть причиной развития бронхитов, пневмонии и ряда других воспалительных заболеваний дыхательной системы. В такой ситуации берётся посев с зева и носа с целью выявления золотистого стафилококка. Сдают этот анализ все пациенты, в том числе самые маленькие, строго натощак, а взрослые перед этим анализом не должны чистить зубы (поскольку может искажаться истинная картина).

Посев берётся с помощью специального зонда, который затем помещается в специальную среду для роста бактерий.

При конъюнктивите материал для анализа желательно брать утром до умывания. При наличии обильного гнойного отделяемого используют стерильный тампон. Гной собирают с внутренней поверхности нижнего века движением от наружного к внутреннему углу глазной щели. При этом веки нужно придерживать руками, чтобы при моргании ресницы не касались тампона. Если гной в небольшом количестве, то предварительно тампон смачивают дистиллированной водой.

При кожных заболеваниях, вызванных стафилококком, необходимо брать кожный соскоб или исследовать отделяемое из раны на наличие золотистого стафилококка. Для этого следует обработать кожу вокруг раны антисептиком или ватным тампоном, смоченным 70%-ным этиловым спиртом. Стерильной марлевой салфеткой удаляют некротические (омертвевшие) массы и гной, затем с помощью специального ватного тампона берут отделяемое из раны.




«Больничная» инфекция

Стафилококковую инфекцию называют больничной или роддомовской. У пациентов этих заведений иммунитет, как правило, ослаблен, и стафилококк на этом фоне идёт в атаку. Однако, чтобы инфекция приобрела массовый характер, у неё должен быть очаг — больной человек. Им может быть кто-то из персонала, одна из рожениц или заболевший ребёнок. Механизм передачи инфекции прост — через руки. К примеру, носитель инфекции — медсестра в роддоме. У неё есть небольшие гнойнички на коже, которым она не придала должного значения. Перепеленав или обработав новорождённого без одноразовых перчаток, эта медсестра тут же заражает его. Или же если болен ребёнок, а медсестра взяла его на руки, то заражается уже она. И может передать инфекцию следующему младенцу, с которым будет контактировать.

Для предотвращения вспышек инфекции с рук медперсонала, с мебели и оборудования регулярно делаются смывы — эпидемиологическая служба обрабатывает их специальным раствором, а потом исследует его на наличие различных бактерий, попутно выясняя степень их патогенности. С той же целью роддома два раза в год закрываются на мойку (и, естественно, это делается внепланово сразу же, как только обнаружена инфекция). При этом все поверхности, включая потолок, обрабатываются дезинфицирующими растворами, которые уничтожают бактерии стафилококка. Поэтому выбирая роддом, поинтересуйтесь, когда в последний раз он закрывался на мойку. Если это было несколько месяцев назад, может быть, имеет смысл обратиться в другой роддом.

Молоко безвредно?

Главные «ворота» для стафилококковой инфекции у женщины — трещины на сосках. Поэтому как только они появились, их нужно сразу обработать анилиновыми растворами, к которым стафилококк очень чувствителен, — зелёнка, фукорцин или метиленовый синий. Кормить ребёнка грудью при этом надо, используя специальные накладки на соски (в том числе для облегчения болезненных ощущений). Не стоит мыть молочные железы с мылом перед каждым кормлением, вполне достаточно принимать душ два раза в день. Частое мытье сушит кожу, а это в свою очередь способствует появлению новых трещин на сосках, куда может проникнуть инфекция.

Если трещина резко болезненная, воспалённая, вокруг неё появилось уплотнение, а из груди выделяется гной, то, возможно, мы имеем дело со стафилококковой инфекцией. В этом случае врач может порекомендовать сдать грудное молоко на анализ. Однако если у вас просто появились трещины — это ещё не повод бежать с молоком на анализ. Для этого должны быть симптомы воспаления (резкая пульсирующая боль в груди и гнойное отделяемое). В любом случае, стоит прийти на осмотр к врачу, который определит, что с вами, и поможет быстрее справиться с трещинами.

Если в анализе молока обнаружен эпидермальный стафилококк, скорее всего, анализ был сдан неправильно, и микроб попал туда с кожи. Если же в молоке обнаружен золотистый стафилококк, то с большой вероятностью можно утверждать, что он есть и в крови у женщины. А это уже серьезная ситуация, которая бессимптомно протекать не может, — налицо должны быть проявления бактериальной инфекции (высокая температура, слабость).

Но важно помнить, что наличие любой разновидности стафилококка в молоке (если при этом у женщины нет гнойного мастита) — не повод прекращать грудное вскармливание. Женщине в таком случае нужно будет пройти курс лечения антибиотиками, разрешёнными во время лактации, которые, попадая с грудным молоком к ребёнку, одновременно защищают его от инфекции.

Лечение

Ставить диагноз, а тем более назначать лечение при стафилококковой инфекции должен только врач. Как правило, назначаются антибиотики пенициллинового ряда и бактериофаги (микроорганизмы, избирательно поражающие бактериальные клетки).

Самая распространённая ошибка мам — это самолечение. Как только у вас или ребёнка появились гнойничковые высыпания на коже, высокая температура, понос или рвота, потеря аппетита — сразу же обращайтесь к врачу.

Самая же большая ошибка врачей — это переоценка тяжести ситуации. Если вы считаете, что ваш доктор перестраховывается, например, отменяя грудное вскармливание, не поленитесь обратиться за дополнительной консультацией к другому специалисту.

ВОПРОС ОТ ПОСЕТИТЕЛЬНИЦЫ САЙТА WWW.KROKHA.RU

У ребёнка обнаружен в кале золотистый стафилококк, при этом есть симптомы обычного дисбактериоза (небольшое нарушение стула, срыгивание, лёгкое беспокойство). Надо ли лечить стафилококк? И что в таком случае делать вообще?

НАТАЛЬЯ ТАРАН: Стафилококк не вызывает дисбактериоза. Причина появления стафилококка в анализе, скорее всего, в том, что он (анализ) был неправильно собран, и микроб попал туда с кожи. Так что в первую очередь такой анализ надо пересдать (см. выше). А затем искать и устранять причину дисбактериоза.

ПРОФИЛАКТИКА СТАФИЛОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ У НОВОРОЖДЁННЫХ

Как можно быстрее выписывайтесь из родильного дома с ребёнком домой, естественно, если врачи не возражают. Во время пребывания в роддоме, если есть такая возможность, находитесь в одноместной палате и совместно с ребёнком.

Обязательно мойте руки перед кормлением и процедурами по уходу за малышом. Если у вас на руках есть порезы, царапины, то обработайте их фукорцином или зелёнкой. Ну а если на вашей коже появились гнойнички, воспалённые места, то обязательно покажите их доктору. Пока не будет выяснена их причина, за ребёнком лучше ухаживать папе или бабушке.

Внимательно наблюдайте за своим ребёнком. Подъём температуры, вялость, отказ от еды, «беспричинный» плач, высыпания на коже, понос — все это должно насторожить вас и побудить вызвать врача.

Обязательно просите всех родственников, врачей из поликлиники, которые хотят подойти и взять на руки новорождённого, тщательно вымыть руки с мылом. Выделите для них отдельное полотенце. Не стесняйтесь отказать людям, чьё здоровье внушает вам опасение.

Закаливайте малыша с первых дней жизни (см. статью в № 5 журнала «Мой кроха и Я» за 2010 г. ), чтобы у него был хороший иммунитет.

Стафилококк – симптомы, виды, причины возникновения и лечение заболевания


Возбудитель стафилококка — Staphylococcus aureus — это грамположительные неподвижные и не образующие спор анаэробные бактерии, которые имеют округлую форму (форму кокка) и растут гроздьями, поэтому фактически название микроорганизма означает “золотая гроздь винограда”.


О заболевании


При выращивании в чашке Петри с кровяным агаром колонии золотистого стафилококка имеют характерный золотисто-желтый цвет, отсюда и соответствующее название. Этот микроорганизм чрезвычайно распространен, им колонизировано около четверти населения планеты.


Обычно он распространяется в носовой полости, паховой области, подмышках и других частях кожи, но в большинстве случаев является нормальной частью кожной флоры человека и не вызывает никаких проблем.


Однако при увеличении количества бактерий на коже, они начинают проникать в глубокие слои кожи через микротрещины и могут привести к кожным инфекциям и абсцессам.


Патологические процессы могут затрагивать не только различные внутренние органы, такие как печень, почки, селезенка, головной мозг, но и мышцы, кости и суставы, что ведет к крайне плачевным последствиям, поэтому при подозрении на наличие инфекции, следует немедленно обратиться к доктору.

Виды стафилококковых инфекций


Выделяют несколько наиболее распространенных видов стафилококков:


●     Гемолитический стафилококк.


Чаще всего эта инфекция поражает верхние дыхательные пути, вызывая гнойную ангину, фарингит, тонзиллит, бронхит и другие воспалительные заболевания. Данные бактерии очень устойчивы и трудно поддаются терапии.


●     Золотистый.


Данный микроорганизм чрезвычайно устойчив почти ко всем видам антибиотиков пенициллинового ряда, антисептикам, высоким температурам, активным прямым солнечным лучам. Он вызывает различные поражения кожи, такие как экзема, абсцесс, фурункулы, поражения желудочно-кишечного тракта, верхних дыхательных путей, слизистых оболочек, в худшем случае приводит к токсическому шоку.


●     Эпидермальный.


Этот микроорганизм обитает на поверхности кожи и слизистых любого здорового человека и не несет никакого вреда. Но, если эта бактерия попадает в кровь человека с ослабленным иммунитетом, что чаще всего происходит при хирургических операциях, использовании неправильно обработанных инструментов, катетеров, происходит заражение крови, что ведет к воспалению внутренней оболочки сердца.


●     Сапрофитный.


Несмотря на то, что этот вид наименее опасный, при заражении он приводит к общей интоксикации организма, вследствие выделения опасных токсинов и ферментов в процессе своей жизнедеятельности. Данные микроорганизмы часто становятся возбудителями воспаления уретры и мочевого пузыря. Преимущественно это характерно для женщин в силу анатомических особенностей строения их мочеполовой системы. При отсутствии лечения цистит влечет за собой воспаление почек и проблемы с зачатием ребенка.

Симптомы и формы стафилококка у взрослых и детей


Симптомы, которые ощущает больной, сильно разнятся в зависимости от способа и места инфицирования и состояния иммунитета. Но можно выделить ряд наиболее характерных признаков:


●     повышенная температура;


●     нагноение порезов, отечность, гнойные высыпания на коже и слизистых, зуд и покраснение глаз;


●     отсутствие обоняния и носового дыхания;


●     першение в горле, болезненность при глотании, сухой кашель;


●     тошнота, рвота, общее ослабленное состояние;


●     сильные головные боли, приступы эпилепсии, сильная одышка;


●     болезненные ощущения в суставах.


Одной из самых распространенных форм стафилококков у взрослых людей является его бессимптомное носительство. Здоровый человек не ощущает каких-либо признаков заболевания до тех пор, пока не появится провоцирующий фактор, который даст толчок развитию болезни.


Для женщин наиболее опасен сапрофитная форма, способная привести к возникновению цистита. Это связано с тем, что уретра женщин располагается очень близко к влагалищу, из-за чего велика вероятность попадания патогенной микрофлоры, в том числе и палочки стафилококка, в уретральный канал, а затем и в мочевой пузырь, вызывая его воспаление.


Так как маленькие дети не обладают окрепшей иммунной системой, риск развития инфекции у ребенка достаточно велик. Причем привести к серьезным осложнениям у детей могут даже те виды стафилококка, которые во взрослом возрасте практически не вызывают проблем. Особенную опасность представляет стафилококк у детей в возрасте до года, так как он с легкостью, в кратчайшие сроки способен распространиться по организму и привести к серьезным последствиям вплоть до летального исхода.

Причины возникновения


Наиболее часто бактерия попадает в организм человека через ранки и микротрещины на коже. Инфекция, проникнув через рану, начинает размножаться в крови, распространяясь по организму и поражая легкие, сердце, мозг, печень, почки, суставы.


При стафилококке заболевания могут быть самые различные такие, как пневмония, менингит, остеомиелит, эндокардит, сепсис и многие другие.


Заражение инфекцией стафилококк может произойти следующими способами:


●     Контактно-бытовым путем при использовании личных предметов больного;


●     Воздушно-капельным при близком общении с зараженным;


●     Фекально-оральным на грязных фруктах, овощах и других продуктах питания, грязных посуде и руках;


●     Вертикальным при прохождении ребенка через родовые пути зараженной матери при родах.


●     Нередко инфицирование происходит во время хирургического вмешательства через медицинский инструментарий и во время проведения различных манипуляций.

Диагностика


Диагностировать наличие инфекции может только врач по результатам проведенного анализа на стафилококк.


Стоит помнить, что проведение анализа рекомендуется только, если присутствуют симптомы болезни. Наличие бактерии в биологическом материале может означать то, что человек является ее носителем, что само по себе является нормой.


Для анализа осуществляется забор материала из области, где предположительно развивается инфекция. Чтобы обнаружить патологический процесс проводятся несколько тестов, чтобы отследить динамику размножения бактерий. Если их число стремительно увеличивается, можно диагностировать наличие стафилококковой инфекции. Также дополнительный анализ позволит определить конкретный вид инфекции, чтобы доктор смог подобрать персональную схему лечения.

Лечение


Лечение стафилококка может проводиться хирургическим способом при наличии гнойного поражения в области заражения. Также может потребоваться удалить инфицированный имплант, катетер и пр.


В качестве консервативного лечения стафилококка применяют антибиотики, антибактериальные средства в сочетании с иммуномодулирующей терапией. Препараты подбираются с учетом устойчивости стафилококка к большому ряду медикаментов. Большую эффективность показало применение бриллиантового зеленого раствора для обработки зараженных ран.

Какие анализы необходимо сдать


В первую очередь, для определения наличия инфекции сдается анализ на стафилококк.


При заболеваниях дыхательных путей сдают мазок из носо- и-ротоглотки, при цистите — мочу, при расстройстве ЖКТ — кал, при кожных поражениях — соскоб с кожи, а, если есть подозрения на обширное заражение, сдают кровь.


Также перед тем как начать лечение с применением антибиотиков, требуется сдать анализ на резистентность к этим медикаментам.


К какому врачу обращаться


Запущенными случаями заболевания занимается инфекционисту.


Но если у вас только появились подозрения и вы хотите получить точный диагноз, для начала вам следует обратиться к терапевту, с детьми – к педиатру. Доктор проведет диагностику и на основании полученных результатов выпишет вам направление к необходимому врачу.

Профилактика стафилококка


Главной мерой профилактики заражения стафилококком является постоянное соблюдение правил гигиены. После пребывания в общественных местах или контакта с предметами общественного пользования необходимо тщательно мыть руки с мылом. Также важно не контактировать с главным источником заражения стафилококком — больными людьми.

Как предотвратить заболевание


Чтобы предотвратить распространение стафилококка в организме и последующее развитие болезни, необходимо укреплять иммунитет. Для этого рекомендуется вести здоровый образ жизни, заниматься физической активностью, правильно питаться, соблюдая баланс витаминов и всех необходимых микроэлементов, потреблять достаточное количество воды.


Крепкий иммунитет сдержит активность патогенного микроорганизма в пределах безопасной нормы.


Будьте здоровы, дорогие пациенты!

Записаться на прием

Введите пожалуйста свои данные

Стафилококк в кале у ребенка, симптомы, причины, лечение

Стафилококки — это бактерии, провоцирующие развитие инфекции у детей самых разных возрастов. Не смотря на достаточно широкое распространение заболевания, оно пугает многих родителей и в наше время. Причина этого страха довольно проста: люди мало проинформированы о том, что по-настоящему представляет собой это инфекционное заболевание.

Стафилококк представляет собой серьезную опасность только в отдельных случаях. Все напрямую зависит от того, каким видом бактерий заражается малыш, а также от того, насколько эффективна иммунная система ребенка. Какие симптомы возникновения стафилококка в кале у ребенка?

Причины детского заболевания стафилококком

Стафилококковая инфекция — опасна для жизни ребенка

Стафилококковая инфекция — заболевание, вызываемое одноименными бактериями. Как и с многими другими инфекционными болезнями, есть несколько причин для того, чтобы ребенок заразился. Стафилококк бывает различных видов, среди которых принято различать:

  • сапрофитный стафилококк. Наименее распространенный среди детей вид инфекции. Поражает мочеполовую систему. Для человека представляет низкую опасность и при правильном лечении лечится в течение нескольких дней
  • эпидермальный стафилококк. Этот вид часто поражает малышей, которые перенесли хирургическое вмешательство, либо имеют ослабленный иммунитет. Для здоровых детей он не опасен, а при поражении кожи чаще всего назначается местная терапия.
  • золотистый стафилококк. Наиболее опасный вид бактерий. Такое название получил из-за характерного цвета колоний, которые формируют микроорганизмы. Поражает ЖКТ, нередко наблюдается в слизистой оболочке, на поверхности кожи.

Одной из основных причин заражения детей стафилококком принято считать ослабление иммунитета. Хорошая, эффективная работа защитной системы организма ребенка замечательно противостоит различным патогенным микроорганизмам, опасность заражения которыми встречается буквально на каждом шагу. В некоторых случаях, в анализах заметно присутствие бактерий в организма, но инфекции не наблюдается: это объясняется успешной защитной функцией здорового малыша.

А вот ребенок, иммунитет которого ослаблен, слабо защищен от негативного воздействия бактерий и поэтому может заболеть. Тем не менее, современный уровень медицины позволяет избежать негативных последствий стафилококковой инфекции, если вовремя начать терапию.

Стафилококк в кале у ребенка — повод для беспокойства

Второй по распространенности причиной заражения ребенка стафилококком считается банальное несоблюдение правил гигиены. Патогенные микроорганизмы обитают там, где грязно, а поскольку маленькие дети зачастую не приучены к мытью рук перед приемом пищи и любят класть в рот все, что попадается им под руки, увеличивают риск заражения стафилококком.

Еще одним из вариантов распространения стафилококковой инфекции является прямое заражение ребенка от уже инфицированного человека. Заражение может произойти через поврежденные кожные покровы, либо через слизистую оболочку. Когда носителями заболевания являются работники пищеблока, либо сотрудники больницы, малыш может заразиться через пищу в детском саду, либо школе или же после того, как пролежит в больнице, где ему проводили определенные процедуры.

Заболевание может разноситься насекомыми, поэтому места их укуса нужно всегда обрабатывать.

Стафилококк — инфекционное заболевание, вызываемое бактериями стафилококка. Имеет несколько видов, которые поражают различные системы организма, имеют различный уровень опасности и также по-разному поддаются лечению. Основной причиной развития стафилококковой инфекции у ребенка является низкий уровень иммунитета у него.

Симптомы инфекции у детей

Стафилококк: под микроскопом

Это заболевание у разных детей проявляется по-разному. Симптомы и признаки инфекции напрямую зависят от таких факторов:

  • возраст малыша
  • среда, где обитают патогенные микроорганизмы
  • состояние здоровья ребенка и эффективность его иммунной системы
  • тип стафилококка

Верно диагностировать заболевание может только квалифицированный врач. Родители же должны ответственно следить за общим состоянием малыша и сообщать о нем специалисту. Стафилококковая инфекция может иметь две формы: раннюю и позднюю.

Ранняя форма характерна более быстрым проявлением развития инфекции в организме: первые признаки заметны спустя несколько часов с момента заражения ребенка. Признаки поздней формы проявляются через три-пять дней. Стафилококковая инфекция характеризуется следующими возможными симптомами:

  • разнообразные высыпания на кожных покровах: фурункулы, сыпь, гнойнички, стоматит. Если на коже малыша появляются необычные пятна, следует обратиться к врачу.
  • конъюнктивит
  • общее ухудшение состояния малыша (высокая температура, вялость)
  • нарушение пищеварительных процессов (диарея, плохой аппетит, рвота)

Стафилококковая инфекция имеет различные симптомы. Правильно диагностировать заболевание может только врач, поэтому, при появлении определенных признаков заболевания у малыша следует показать его специалисту.

Диагностика и лечение стафилококка у детей

Самым опасным является золотистый стафилококк

Для того, чтобы правильно установить вид бактерии, провоцирующей инфекцию, врач назначает специальные анализы. Так, характерные изменения в стуле малыша, являются поводом сдать посев кала на золотистый стафилококк.

Свежие каловые массы малыша помещают в специальный контейнер и доставляют на проверку в лабораторию. Если в нем будут выявлены бактерии, дополнительно проводится проверка их чувствительности к различным антибиотикам, необходимая для дальнейшей эффективной терапии заболевания.

Еще одним вариантом диагностики заболевания является проверка материнского молока на наличие стафилококка в нем. При положительном анализе молока также определяется чувствительность бактерий к различным препаратам. Наличие стафилококка в материнском молоке не повод для прекращения грудного вскармливания ребенка. Врач назначит специальную терапию для матери, а вместе с молоком будет лечиться и ребенок.

При конъюнктивите у ребенка, когда его глаза слезятся и наблюдается гнойное отделение, специальным стерильным тампоном берут анализ с нижнего века малыша. При различных высыпаниях кожных покровов в качестве материала для анализа выступает соскоб поверхности ран. Для этого рана изначально обрабатывается антисептиком, а после очищается от омертвевших тканей.

Различные заболевания дыхательной системы: ангины, бронхиты и т.д., также могут быть вызваны инфекцией. Для ее выявления берется посев из носа и зева ребенка прямо в лаборатории.

Кожные высыпания как симптом заражения стафилокком

Терапию стафилококковой инфекции любого вида может назначить только врач, после проведения специальных анализов и определения наиболее эффективной формы лечения. Крайне не рекомендуется проводить самостоятельное лечение ребенка, особенно когда речь идет о младенцах и новорожденных.

Поэтому, при появлении симптомов инфекции, следует незамедлительно обращаться к врачу. Для профилактики золотистого стафилококка у новорожденных следует придерживаться следующих правил:

  1. как можно сильнее ограничить контакты с другими пациентами роддомов. По возможности — обеспечить отдельную палату, где смогут совместно находится только ребенок и его мама. Скорая выписка из роддома также является хорошим способом защититься от стафилококка.
  2. тщательно соблюдать правила гигиены при обращении с малышом. Тщательно мыть руки перед кормлениями,
  3. ухаживать за ребенком, вовремя обрабатывать различные царапины и ссадины.
  4. когда с ребенком контактируют другие люди — следить за тем, чтобы они мыли руки перед тем, как обращаться с малышом
  5. следить за состоянием здоровья ребенка. В случае каких-либо изменений в стуле, общем состоянии здоровья, появлении высыпаний на коже — обязательно обращаться за помощью к врачу.

Для правильной диагностики стафилококковой инфекции проводятся различные анализы. При выявлении бактерий во время анализа также проверяется восприимчивость микроорганизмов к антибиотикам. На основе эти данных врач и назначает последующую терапию.

Стафилококк — род бактерий, которые в определенных случаях могут спровоцировать развитие инфекции. При наблюдении характерных симптомов заболевания у ребенка, следует отвести его к врачу, который после проведения определенных анализов назначит рациональное лечение.

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

Расскажите друзьям! Расскажите об этой статье своим друзьям в любимой социальной сети с помощью социальных кнопок. Спасибо!

Поделиться

Поделиться

Твит

Телеграм

Класс

Вотсап

О стафилококке и стафилококковой инфекции — Министерство здравоохранения ПМР

Стафилококки — это целый род микроорганизмов, на сегодня известно уже 27 видов, при этом 14 видов обнаружены на коже и слизистых оболочках человека. Большинство стафилококков абсолютно безвредны. Из упомянутых 14 видов, чаще всего три способны вызывать болезни: золотистый стафилококк (самый распространенный и вредоносный), эпидермальный стафилококк (также патогенный, но гораздо менее опасный, чем золотистый) и сапрофитный стафилококк – практически безвредный, тем не менее, также способный вызывать заболевания.          

Практически все связанные со стафилококком медицинские проблемы подразумевают присутствие именно золотистого стафилококка,  обладающего удивительной живучестью: не теряет активности при высушивании, 12 часов живет под воздействием прямых солнечных лучей, в течение 30 минут выдерживает температуру в 800 С, не погибает в чистом этиловом спирте, не боится перекиси водорода.

Стафилококки распространены повсеместно, их можно обнаружить практически на любом участке человеческого тела и окружающих предметах. В течение первой недели жизни у 90% новорожденных в полости носа выявляется золотистый стафилококк. В первые два года жизни у 20% детей обнаруживаются золотистые стафилококки в полости носа, а к 4-6 годам они обнаруживаются у 30-50%, у взрослых носительство колеблется в пределах 12-50%.

Важно всегда разграничивать такие понятия, как стафилококк и стафилококковая инфекция. Золотистый стафилококк является условно-патогенным микроорганизмом, представителем нормальной человеческой микрофлоры. Термин «условно-патогенный» означает, что стафилококк вызывает заболевание лишь при определенных обстоятельствах. Он может находиться в организме долгое время (хоть всю жизнь), не причиняя человеку вреда и должны создаться определенные условия, чтобы он вызвал болезнь. А именно – ослабление иммунитета. Если иммунная защита человека работает нормально, стафилококк существует в организме, не причиняя «хозяину» никакого беспокойства. Если иммунитет дает сбой, стафилококк может атаковать организм человека, что ведет к появлению самых различных болезней (более ста наименований): от относительно легких кожных гнойничковых инфекций до таких  тяжелых процессов как пневмония (воспаление легких),  менингит (воспаление оболочек мозга), остеомиелит (поражение костей), сепсис (воспалительный процесс во всех органах человека или «заражение крови»), токсический шок и другие.Самая распространенная токсическая стафилококковая болезнь – пищевая  токсикоинфекция.

Безусловно, стафилококковые инфекции подлежат лечению. Этим занимаются врачи различных специальностей. Лечение стафилококковых болезней — удивительно сложная задача, ибо нет микроба, способного сравниться со стафилококком по способности вырабатывать устойчивость к антибиотикам и другим антибактериальным средствам.  Поэтому  лечение необходимо назначать только после определения чувствительности к антибактериальным средствам. С этим согласны все специалисты.

Сложнее обстоят дела при здоровом носительстве, когда микроб присутствует в организме человека (например, на слизистой носоглотки), но заболевание не развивается вследствие равновесия факторов агрессии микроба и защитных сил иммунной системы человека. Вместе с тем, носитель может представлять серьезную опасность для окружающих. Особенно опасен такой человек, если он работает в пищевой отрасли (повар, раздатчик готовых блюд), в медицине (медицинская сестра детского отделения, врач хирург или акушер-гинеколог и др.).

Вопросы лечения  носительства золотистого стафилококка будоражат медицинскую общественность не одно десятилетие. Когда с этой условно-патогенной бактерией нужно бороться, а когда — нет?  Что делать с устойчивым штаммом? Чем его лечить?

Носительство без симптомов лечить не нужно! Ничем и никогда. Живите спокойно и забудьте об этом анализе.  Если у совершенно здорового ребенка или взрослого вдруг в посеве кала (грудного молока, мазка из носоглотки, зева, влагалища и так далее) высевается золотистый стафилококк, лечить его не имеет никакого смысла.

При носительстве с симптомами нужно быть полностью уверенным, что они имеют отношение к золотистому стафилококку. Только в таком случае, после консультации врача, можно брать рецепт и идти в аптеку.

Обязательному лечению подлежат люди, которые, будучи носителями стафилококка, при исполнении своих  профессиональных обязанностей могут вызвать возникновение стафилококковой инфекции у других людей. Список профессий, представители которых подлежат лечению в связи с носительством стафилококка, оговорен специальным директивным документом. Помимо медицинских работников в него входят, например, работники сферы общественного питания. Опасность стафилококконосительства в этой категории состоит еще и в том, что стафилококки могут попасть в приготавливаемую пищу и вызвать массовое заболевание пищевой токсикоинфекцией.  Также имеет смысл проходить лечение здоровым носителям стафилококка, проживающим совместно с людьми, которые страдают повторными стафилококковыми инфекциями (например, фурункулезом) или тяжелыми хроническими болезнями.

Лечение носительства золотистого стафилококка антибиотиками нецелесообразно. В арсенале специалистов достаточно других средств. Лечение антибиотиками дисбактериоза с высоким содержанием стафилококка вовсе противопоказано, так как это приведет к противоположному результату – более интенсивному размножению стафилококка.

Профилактика стафилококковой инфекции включает в себя: соблюдение правил личной гигиены, отказ от вредных привычек, здоровое питание и полноценный сон. Необходимо избегать общих переохлаждений и перегревов, своевременно обрабатывать антисептиками (йод, зеленка) микротравмы кожи. Необходимо выявлять и лечить носителей золотистого стафилококка, особенно работающих в учреждениях здравоохранения и общественного питания, на время лечения такие лица не допускаются к исполнению своих обязанностей

Ни в коем случае не отчаивайтесь, если у Вас обнаружен  стафилококк. Победить его можно, сделать это будет легче при своевременном обращении к врачу и четком выполнении рекомендаций по лечению и профилактике, впрочем, это правило относится к любому заболеванию. Всегда согласовывайте свои действия с врачом.

Будьте здоровы.

Врач эпидемиолог                                                                                                                             С. С. Пынзарь

Стафилококк: что это, симптомы, причины, лечение

Что это такое?

Стафилококки — род анаэробных шарообразных бактерий, которые вызывают пневмонию, эндокардит, ряд инфекций кожи, остеомиелит, менингит, септический артрит, синдром токсического шока и другие заболевания. Бактерии постоянно обитают на кожных покровах здорового человека, его носоглотке и ротоглотке. Инфицирование происходит при снижении иммунитета.

Особенно подвержены стафилококковой инфекции новорожденные дети и кормящие женщины, пациенты со сниженным иммунитетом, в том числе болеющие гриппом, опухолями, лейкемией, хроническими лёгочными недугами, пребывающие на диализе, инъекционные наркоманы, люди с трансплантатами и протезами, с открытыми ранами, ожогами, хирургическими разрезами.

Чаще всего стафилококки передаются воздушно-капельным или контактным путём.

Наиболее патогенен для человека золотистый стафилококк, приводящий к воспалительным процессам и нагноению практически всех органов человека. «Золотистым» он называется из-за образования золотистого пигмента. Однако это не единственный вид бактерий. Помимо него, у пациентов встречаются:

  • эпидермальный стафилококк;
  • сапрофитный, приводящий к циститу и уретриту;
  • гемолитический, поражающий кожный покров и нередко приводящий к сепсису.

Симптомы инфицирования

Симптоматика широко варьируется в зависимости от поражённого органа, иммунитета пациента, его возраста. Бывают случаи бессимптомной бактериемии, когда микроорганизмы обнаруживаются в крови, но не доставляют беспокойства и не влияют на функционирование органов.

Однако наиболее распространённые симптомы могут включать в себя:

  • образование на кожных покровах гнойничков и карбункулов;
  • стоматит, конъюнктивит и другие локальные воспаления;
  • появление высыпаний на коже, сопровождаемых зудом;
  • повышение температуры тела, лихорадка;
  • ухудшение аппетита, общая слабость и апатия;
  • проблемы с ЖКТ: тошнота, рвота, метеоризм, диарея;
  • покраснение горла и увеличение миндалин — симптоматика ангины.

Поскольку стафилококки могут поразить любой орган, симптомы тоже могут различаться.

Причины развития стафилококковой инфекции

Главная причина развития заболевания — снижение иммунитета из-за стресса, болезней, неправильного питания, авитаминоза или приёма лекарственных препаратов. Падение иммунитета, в том числе сезонное, может спровоцировать размножение бактерий и последующее инфицирование.

Есть и другие причины:

  • несоблюдение рекомендаций врача при уходе за ранами, ссадинами и травмами;
  • тесное взаимодействие с носителем инфекции, например, с болеющим ангиной членом семьи;
  • употребление плохо обработанных продуктов питания — бактерии могут передаваться через пищу.

Младенцы инфицируются из-за патологий во время беременности и родов, к примеру, длительного безводного периода, недоношенности, несоблюдения гигиены.

Из-за особенностей способов передачи стафилококковую бактериемию сравнительно легко предотвратить, соблюдая базовые требования по гигиене, не взаимодействуя с чужими личными вещами, соблюдая рекомендации врача и избегая — по возможности — тесного общения с инфицированными.

Диагностика и лечение

Диагностика заболевания включает в себя:

  • стандартные клинические анализы крови, биохимия;
  • бакпосев для определения конкретного вида стафилококка;
  • иммуноферментный анализ ИФА, который поможет определить наличие антител.

Могут понадобиться исследования, касающиеся конкретного затронутого инфекцией органа.

Лечение — антибиотикотерапия с подбором лекарства под конкретный возбудитель. Это важно, поскольку среди бактерий стафилококкового рода встречаются резистентные к стандартным лекарствам, требующие особого подхода. Очень важно не «назначать» себе антибиотики самостоятельно — это чрезвычайно сильные и опасные лекарственные средства, прописать которые может только дерматолог.

Дополнительно могут назначаться средства для симптоматического лечения, например, мази для обработки гнойников и язв, жаропонижающие средства.

Страница не найдена |

Страница не найдена |



404. Страница не найдена

Архив за месяц

ПнВтСрЧтПтСбВс

14151617181920

21222324252627

282930    

       

       

       

     12

       

     12

       

      1

3031     

     12

       

15161718192021

       

25262728293031

       

    123

45678910

       

     12

17181920212223

31      

2728293031  

       

      1

       

   1234

567891011

       

     12

       

891011121314

       

11121314151617

       

28293031   

       

   1234

       

     12

       

  12345

6789101112

       

567891011

12131415161718

19202122232425

       

3456789

17181920212223

24252627282930

       

  12345

13141516171819

20212223242526

2728293031  

       

15161718192021

22232425262728

2930     

       

Архивы

Июл

Авг

Сен

Окт

Ноя

Дек

Метки

Настройки
для слабовидящих

Дифференциальный признак фекальной микробиоты грудных детей

BMC Microbiol. 2008; 8: 143.

, 1 , 1 , 1 , 1 , 2 , 2 , 2 , 1 , 2 и 1

Est

1 Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos, Universidad Complutense de Madrid, 28040, Мадрид, Испания

Susana Delgado

1 Departamento de Nutrición de Madrid, Bromatología de Compluence, Bromatologíón de Complutense de los Alimentos , 28040, Мадрид, Испания

Антонио Мальдонадо

1 Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos, Universidad Complutense de Madrid, 28040, Мадрид, Испания

Rebeca Arroyo

Departologína,

, 9 y Tecnología de los Alimentos, Universidad Complutense de Madrid, 28040, Madrid, Spain

Mar Albújar

2 Servei de Pediatria, Hosp ital Universitari Joan XXIII, 43007, Tarragona, Spain

Natalia García

2 Servei de Pediatria, Hospital Universitari Joan XXIII, 43007, Tarragona, Spain

Manel Jariod

de , 43007, Tarragona, Spain

Leonides Fernández

1 Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos, Universidad Complutense de Madrid, 28040, Мадрид, Испания

, Больница Адольфо Гомес

, Адольфо де Гомес

Universitari Joan XXIII, 43007, Tarragona, Spain

Juan M Rodríguez

1 Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos, Universidad Complutense de Madrid, 28040, Мадрид, Испания

y Tecnología de los Alimentos, Universidad Complutense de Madrid, 28040, Мадрид, Испания

9000 4 2 Servei de Pediatria, Hospital Universitari Joan XXIII, 43007, Tarragona, Spain

Автор, ответственный за переписку.

Поступило 2 апреля 2008 г .; Принято 10 сентября 2008 г.

Copyright © 2008 Jiménez et al; лицензиат BioMed Central Ltd.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе. при условии правильного цитирования оригинала.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Дополнительные материалы

Дополнительный файл 1 Анализ S.epidermidis штаммов. Таблица, показывающая наличие потенциальных детерминант вирулентности и других признаков среди 51 штамма S. epidermidis .

GUID: 6E711CF3-271E-4EFE-A5E9-8DFBBAB5B579

Дополнительный файл 2 Устойчивость к различным антибиотикам среди штаммов S. epidermidis . Таблица, показывающая распределение МИК и процент устойчивости к различным антибиотикам среди штаммов S. epidermidis .

GUID: 108E3FDB-BB2A-4CB5-AA63-27CFF43165AE

Дополнительный файл 3 Анализ штаммов энтерококков.Таблица, показывающая наличие потенциальных детерминант вирулентности и других признаков среди штаммов энтерококков.

GUID: 647AEC52-5E28-4FD8-A4BC-C1A8972A5129

Дополнительный файл 4 Устойчивость штаммов энтерококков к различным антибиотикам. Таблица, показывающая распределение МИК и процент устойчивости к различным антибиотикам среди штаммов энтерококков.

GUID: 9DB0C987-4BB9-4495-8008-A2B37C5A06D6

Abstract

Предпосылки

Грудное молоко является важным источником стафилококков и других бактериальных групп в кишечнике младенца.Целью данной работы было проанализировать бактериальное разнообразие в кале детей, вскармливаемых грудью, и сравнить его с таковым у детей, вскармливаемых смесью. В исследовании приняли участие 23 женщины и их младенцы (16 на грудном вскармливании и 7 на искусственном вскармливании). 16 женщин и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий, соответственно, на 7, 14 и 35 дни. Образцы помещали на различные питательные среды. Изоляты стафилококков и энтерококков были подвергнуты генетическому профилированию и схеме характеристики, включая определение признаков потенциальной вирулентности и чувствительности к антибиотикам.

Результаты

Практика кормления оказала значительное влияние на количество бактерий. Всего было идентифицировано 1210 изолятов (489 из молока, 531 из грудного вскармливания и 190 из младенцев, вскармливаемых смесью). Staphylococcus epidermidis был преобладающим видом в молоке и фекалиях младенцев, вскармливаемых грудью, тогда как среди младенцев, вскармливаемых смесью, он был менее распространен. Enterococcus faecalis был вторым преобладающим видом бактерий среди образцов кала, взятых у детей, вскармливаемых грудью, но он также присутствовал во всех образцах детей, вскармливаемых смесью.Связанный с биопленкой ген icaD и ген mecA были обнаружены только в небольшом количестве штаммов S. epidermidis . Были охарактеризованы также несколько изолятов энтерококков, и ни один из них не содержал гены устойчивости к антибиотикам cylA или vanABDEG . Все были чувствительны к ванкомицину.

Заключение

Присутствие S. epidermidis является отличительным признаком фекальной микробиоты грудных детей.Во всем мире изоляты стафилокка, полученные из молока и фекалий грудных детей, содержат небольшое количество детерминант вирулентности и чувствительны к большинству протестированных антибиотиков.

Предпосылки

Хотя состав кишечной микробиоты человека является основным фактором состояния здоровья как взрослых, так и младенцев, процесс начальной колонизации кишечника новорожденных и происхождение первых колонизаторов остаются неясными.

Хотя модель колонизации, по-видимому, зависит от хозяина, общепринято считать, что первоначально кишечник младенца будет содержать факультативные анаэробы, которые будут создавать ограниченную среду, благоприятную для создания облигатных анаэробов, таких как Bacteroides , Clostridium и видов Bifidobacterium [1].

Традиционно было широко признано, что развитие кишечной микробиоты начинается с рождения и во многом зависит от типа кормления [1-4]. Спектр бактерий в фекалиях детей, вскармливаемых грудью, уже, чем у детей, находящихся на искусственном вскармливании, хотя в младших возрастах количество фекальных бифидобактерий и молочнокислых бактерий обычно заметно выше, чем у детей, вскармливаемых смесью [5,6] . После начала отлучения от груди различия между грудным вскармливанием и грудным вскармливанием быстро исчезают, и кишечная экосистема превращается в стабильное специфическое для хозяина сообщество, в котором преобладают облигатные анаэробы [1].

Грудное молоко является основным фактором возникновения и развития микробиоты кишечника новорожденных не только потому, что оно содержит пребиотические вещества, которые способствуют росту отдельных бактериальных групп в кишечнике младенца [7], но и потому, что этот субстрат представляет собой непрерывный источник микроорганизмов в кишечник младенца в течение нескольких недель после рождения [8,9]. Присутствие нескольких преобладающих видов бактерий в грудном молоке [10] может объяснить, почему микробиота кишечника грудных детей состоит из узкого спектра видов, а более разнообразная микробиота развивается только после отлучения от груди.

Однако в нескольких исследованиях факторов, влияющих на состав кишечной микробиоты в раннем детстве, учитывалось влияние бактерий, естественным образом присутствующих в грудном молоке [11]. Стафилококки, и особенно Staphylococcus epidermidis , по-видимому, являются наиболее преобладающими бактериями как в свежем, так и в хранящемся материнском молоке [9,10], но, как это ни парадоксально, им уделялось незначительное внимание в отношении их роли в ранней колонизации кишечника младенца. Кроме того, несколько исследований, в которых сообщается об обнаружении стафилококков в кале новорожденных и младенцев, противоречивы, поскольку их наличие оценивается от низкого [1] до высокого [12].В этом контексте целью данного исследования было сравнение бактериального разнообразия грудного молока, фекалий грудных детей и фекалий детей, вскармливаемых смесью, методами культивирования, с особым вниманием к видам, принадлежащим к роду Staphylococcus. . Кроме того, мы исследовали роль грудного молока как источника стафилококков для кишечника младенцев и охарактеризовали штаммы S. epidermidis , выделенные из фекалий младенцев, находящихся на грудном вскармливании. Наконец, поскольку энтерококки, по-видимому, являются еще одной преобладающей группой бактерий в кишечнике младенцев, вскармливаемых грудью и искусственными смесями, характеристика штаммов энтерококков, выделенных из фекалий младенцев, составляла еще одну цель этого исследования.

Результаты

Подсчет бактерий в образцах фекалий и молока

Инокуляция подходящих разведений различных образцов кала (грудных или искусственных детей в возрасте 7, 14 или 35 дней) привела к росту бактерий во всех случаях. протестированные питательные среды. В глобальном масштабе значения колебались от 9,25 до 10,93 log 10 КОЕ / г (таблица). Двусторонний дисперсионный анализ с практикой кормления и младенческим возрастом в качестве факторов показал, что практика кормления оказала значительное влияние на количество бактерий в младенческих фекалиях (значение F = 10. 11, P = 0,0045), но влияние младенческого возраста не имело значения. Среднее количество бактерий в кале младенцев, находящихся на грудном вскармливании, было почти на 1 log 10 КОЕ / г ниже, чем значения, соответствующие фекалиям детей, вскармливаемых смесью, как показал тест Дункана (таблица). Второй анализ с культуральной средой, используемой для подсчета, и практикой кормления в качестве факторов в двухфакторном дисперсионном анализе, показал важное влияние культуральной среды (значение F = 11,09, P <0,0001) на количество бактерий в фекалиях (таблица).Количество аэробных бактерий (9,25 и 9,54 log 10 КОЕ / г, полученное в средах CNA и VRBA, соответственно) было значительно ниже, чем количество анаэробных бактерий (10,93 и 10,67 log 10 КОЕ / г, полученное в средах WCh и MRS, соответственно) . Среднее количество бактерий на среде BHI имело промежуточные значения. Кроме того, в этом втором анализе взаимодействие между используемой культуральной средой и практикой кормления также было значительным (значение F = 3,32, P = 0,0141), что свидетельствует о различном влиянии практики кормления на группы бактерий, присутствующих в фекалиях младенцев ( Таблица ).

Таблица 1

Влияние и взаимодействие практики кормления и возраста младенца или питательной среды, используемой для подсчета количества бактерий в фекалиях младенцев, как определено с помощью повторных измерений, двухфакторный дисперсионный анализ

Практика кормления 1

2

0

1,12

9020I

4

9020 9020

9020

9020

9020 практика × питательная среда

Эффект или взаимодействие DF Значение F Pr> F a Группировка Дункана b N Группа Среднее (log 10 КОЕ г -1 )
10.11 0,0045 A 215 На грудном вскармливании 9,87
B 10107 105
0,18 0,8343 A 115 7-дневный возраст 10,16
A 10206

9020 дневной возраст16
A 100 35-дневный 10,12
Практика кормления × младенческий возраст 2

Практика кормления 1 10,18 0,0044 A 215 Грудное вскармливание 9.87
B 105 Состав с кормом 10,71
Питательная среда 9020A 9,25
A 64 VRBA 9,54
BC 64 MRS 10,67
4 3,32 0,0141

Более подробное сравнение среднего количества бактерий в кале от грудных детей и детей, вскармливаемых смесью, с учетом полученных результатов в разных питательных средах для каждого младенческого возраста выявлены существенные различия (P <0.05) в количестве бактерий, соответствующих культуральной среде, инкубированной в аэробных условиях (BHI, VRBA и CNA) для образцов, полученных от 1- и 2-недельных младенцев, но не через 5 недель (таблица). Напротив, не наблюдалось значительных различий в количестве бактерий в любом младенческом возрасте, проанализированном в тех средах (WCh и MRS), которые инкубировались анаэробно.

Таблица 2

Количество бактерий, выраженное в виде среднего логарифма 10 КОЕ г -1 (стандартное отклонение) в кале младенцев, вскармливаемых грудью (n = 16) и на искусственном вскармливании (n = 7)

9.93 (0,95)

10,83 (0,80)

0,03

11,42 (0,68) 0,0078
2 9,92 (0,51) 11,05 (0,39) 0,0001
10206

NS
VRBA 1 9,17 (1,07) 10,61 (1,09) 0,0415
2
90,24

10.76 (0,91)

0.0011
5 9,49 (1,35) 10,04 (0,70) Н. 2 9,08 (1,04) 10,46 (0,27) 0,0030
5 8,52 (1,05) 9,74 (0,84) WC НС 11,25 (0,97) NS
2 10,42 (0,99) 11,12 (0,20) NS
5,01 9020 10,85 (0,51) NS
MRS 1 10,51 (0,98) 10,83 (1,04) NS
2 10206 (1,0206)

NS
5 10.57 (0,59) 10,51 (0,52) NS

Среднее количество бактерий в образцах молока составляло 4,16 log 10 КОЕ / мл, когда они были инокулированы в среды BHI, CNA, WCh и MRS (таблица) . Средние значения CNA значительно снизились (P = 0,031, тест Стьюдента t ) с 7 по 35 день (с 4,22 до 3,69 log 10 КОЕ / мл). В остальных средах не было статистически значимых различий между средним количеством бактерий за исследуемый период.Когда образцы инокулировали в агар VRBA, колонии не могли быть выделены в 9, 8 и 6 образцах молока на 7, 14 и 35 дни соответственно (таблица). В глобальном масштабе рост бактерий VRBA не был обнаружен ни в одном из трех образцов, предоставленных 4 женщинами, участвовавшими в исследовании. Среднее значение VRBA в остальных образцах колебалось от 4,42 до 4,80 log КОЕ / мл. Можно было наблюдать взаимосвязь (P <0,070) между количеством бактерий в грудном молоке и в младенческих фекалиях в CNA (недели 1, 2 и 5), MRS (неделя 1) и WCh (неделя 1).

Таблица 3

Количество бактерий, выраженное в виде среднего логарифма 10 КОЕ / г (стандартное отклонение) из грудного молока матерей, участвовавших в исследовании

3,97 (0,96)

Средняя Неделя 1 (n = 16) Неделя 2 (n = 13) Неделя 5 (n = 14) F a
BHI 4,63 (0,89) 4,58 (1,44) 4,22 (1,08)
VRBA ND b (n = 9) ND (n = 8) ND (n = 6)
4.80 (1,35) (n = 7) 4,74 (1,21) (n = 5) 4,42 (0,91) (n = 8)
CNA 4,22 (0,55) 4,03 (0,85 ) 3,69 (0,62) 2,97
WCh 4,22 (0,67) 4,43 (0,86) 4,27 (1,20) 1,41
MRS 4,14 (1,22) 0,21

Идентификация изолятов

В общей сложности 721 изолят был случайным образом выбран из чашек с агаром CNA, BHI, MRS и WCh, соответствующих фекалиям кормящих грудью ( 531 изолят) и младенцев, вскармливаемых смесью (190 изолятов).Впоследствии они были идентифицированы с помощью классических морфологических и биохимических тестов, видоспецифической ПЦР и / или секвенирования 16S рДНК.

S. epidermidis был преобладающим видом в фекалиях грудных детей, поскольку его можно было выделить из 86,05% образцов (таблица). В этой группе наблюдалось небольшое уменьшение количества положительных образцов S. epidermidis с 7 дня (16/14) по 35 день (9/13). Напротив, этот вид присутствовал только в 13,33% проб, полученных от младенцев, вскармливаемых смесью.Разница в количестве образцов, положительных на S. epidermidis , между младенцами, вскармливаемыми грудью и смесью, была статистически значимой (P <0,0001). Присутствие S. aureus и других видов Staphylococcus было одинаковым в обеих группах.

Таблица 4

Бактерии, обнаруженные в образцах грудного молока и фекалий младенцев, вскармливаемых грудью и искусственными смесями, и процент образцов, в которых они были обнаружены

0206

Кал

Микроорганизм Молоко Младенцы на грудном вскармливании Младенцы на искусственном вскармливании P-value a
31 Stapis00%

0011

86,05% 13,33% <0,0001
Staphylococcus aureus 16,28% 16,28% 13,33%

NS 9 16,28% 6,98% 6,67% NS
Enterococcus faecalis 20,93% 53,49%
Enterococcus faecium ND c 2.33% 13.33% NS
Другое Enterococcus spp. 4,65% 9,30% 26,67% NS
Streptococcus spp. 27,91% 13,95% ND NS
Другие грамположительные бактерии 20,93% 69.77% 33,33% 0,0130
грамотрицательные бактерии 46,51% 97,62% 66,67% 0,0008

9000ocram- Enterisocram-положительный второй вид бактерий широко распространена среди выборок из группы грудного вскармливания (53,49%). Однако, поскольку он присутствовал в 100% проб из образца, полученного смесью, между обеими группами была значительная разница в отношении этого микроорганизма (P = 0.0011). Другие виды энтерококков также были более широко распространены в фекалиях младенцев, вскармливаемых смесью, но различий между ними не было статистически (таблица). Напротив, стрептококки можно было выделить только из фекалий младенцев, находящихся на грудном вскармливании. Процент образцов, содержащих другие грамположительные бактерии (включая бифидобактерии) и грамотрицательные бактерии, также был значительно выше (P = 0,013 и 0,0008, соответственно) в образцах от грудных детей (таблица).

Во всем мире 140 изолятов (26.36%) из группы грудного вскармливания были идентифицированы как S. epidermidis , 76 (14,31%) как Bifidobacterium sp. ( B. adolescentis , B. brevis , B. infantis , B. bifidum , B. longum , B. pseudocatenulatum , B. dentium и B. angulatum ) и 69 (12,99%) как E. faecalis (таблица). Интересно, что только 3 изолята (1,57%) из группы, получавшей смесь, принадлежали к группе S.epidermidis видов, тогда как другие 3 изолята (1,57%) были идентифицированы как Bifidobacterium spp. Напротив, 84 изолята (44,21%) из этой группы были E. faecalis , и этот процент увеличивается до 52,63% с учетом всех идентифицированных видов энтерококков (таблица). Значительный процент (31–35%) изолятов от грудных детей и детей, вскармливаемых смесью, был идентифицирован как грамотрицательные бактерии, хотя они принадлежали к широкому спектру видов (таблица).

Таблица 5

Идентификация колоний, выделенных из грудного молока и фекалий младенцев, находящихся на грудном и искусственном вскармливании

Микроорганизмы
79
Молоко Младенцы на грудном вскармливании Младенцы на искусственном вскармливании
Кол-во колоний (%) Кол-во колоний (%) Кол-во колоний (%)

1.Грамположительные бактерии:
Staphylococcus epidermidis 304 (62,16) 140 (26,36) 3 (1,57) 3 (1,57)
21 (3,95) 3 (1,57)
Enterococcus faecalis 21 (4,29) 69 (12,99) 84 (44,21)
Другие входящие 6.20) 6 (1,12) 16 (8,42)
Streptococcus spp. 35 (7,15) 17 (3,20) ND a
Bifidobacterium spp. 4 (0,81) 74 (13,93) 3 (1,58)
Lactobacillus spp. 2 (0,40) 6 (1,13) 15 (7,89)
Другие грамположительные бактерии b 22 (4.49) 31 (5,83) ND
2. Грамотрицательные бактерии:
Acinetobacter johnsonii 9022

9022

Bacteroides spp. ND 6 (1,13) 2 (1,05)
Burkholderia spp. 2 (0,40) 5 (0,95) ND
Citrobacter spp. 7 (1,44) 4 (0,75) 5 (2,63)
Escherichia coli 37 (7,56) 94 (17,70) 50 (26,32)
29bs виды

9020ac5

42

Общее количество идентифицированных колоний

7 (1,44) 23 (4,33) 3 (1,58)
Pantoea agglomerans ND ND 2 (1,05) 7 (1.44) 30 (5,64) 4 (2,10)
Другие грамотрицательные бактерии c 11 (2,25) 5 (0,95) ND
489 531 190

Все образцы молока содержали S. epidermidis , и в целом процент образцов, в которых были выделены стафилококки, энтерококки и стрептококки, был более одинаковым. по сравнению с фекалиями младенцев, вскармливаемых грудью, чем с фекалиями в группе, получавшей смесь (таблица).Всего было случайным образом выделено 489 изолятов грудного молока, и 304 (62,16%) были идентифицированы как S. epidermidis (таблица). Остальные бактериальные группы, обнаруженные в кале грудных детей, также были обнаружены в грудном молоке (таблица). Стрептококки были выделены из некоторых образцов молока и фекалий младенцев, вскармливаемых грудью, но, напротив, они не могли быть обнаружены в фекалиях детей, вскармливаемых смесью (таблица).

Генотипирование изолятов

S. epidermidis методом случайной амплификации полиморфной ДНК (RAPD)

The 444 S.Epidermidis из фекалий грудных детей и грудного молока были генетически типизированы с помощью метода RAPD, и анализ профилей выявил существование 51 различных генотипов. Для дальнейшей характеристики был выбран представитель каждого профиля RAPD. Кроме того, сравнение профилей RAPD фекалий S. epidermidis с профилями, полученными из изолятов грудного молока, показало, что тот же штамм использовался в молоке и фекалиях младенцев в 12 из 16 пар мать-младенец [см. Дополнительный файл 1].

Характеристика штаммов

S. epidermidis

51 штамм S. epidermidis был проверен на наличие признаков потенциальной вирулентности [см. Дополнительный файл 1]. Что касается генов, кодирующих адгезин, анализ мультиплексной ПЦР выявил присутствие генов embp и atlE во всех штаммах. Напротив, ген fbe можно было обнаружить только в 13 штаммах (25%). Связанный с биопленкой ген icaD был обнаружен в 11 штаммах (20%), и в целом наблюдалась хорошая корреляция между присутствием такого гена и результатами, полученными с помощью анализа CRA, который определяет потенциал образования биопленок.Гемолитическую активность среди исследуемых штаммов обнаружить не удалось.

Среди 17 штаммов, показывающих устойчивость к оксациллину, ген mecA удалось обнаружить с помощью ПЦР у 9 (53%). Напротив, амплификация mecA была получена из 6 чувствительных к оксациллину штаммов. Только 3 штамма показали одновременное присутствие mecA и icaD [см. Дополнительный файл 1]. Тип SCC mec был определен во всех штаммах mec A + .Ген ccr B может быть амплифицирован из всех штаммов mec A + и на основе рестрикционного паттерна ccr B с Hinf I (тип IV: 264, 227 и 154 pb; тип III: 537 и 106 п.н.) или Hinf I / Bsm I (тип IV: 227, 171, 153 и 93 п. , который обычно переносится внебольничными стафилококками.

Определение МИК 21 антибиотика или смеси антибиотиков для 51 S.epidermidis показали, что все они были чувствительны к более низкой концентрации нитрофурантоина (32 мкг / мл), ванкомицина (≤ 2 мкг / мл; за одним исключением) и рифампицина (1 мкг / мл; за двумя исключениями), в то время как результаты по сравнению с остальными антибиотиками варьировались в зависимости от штамма [см. дополнительный файл 2]. Независимо от происхождения большинство штаммов были чувствительны к хинупристину / далфоприсцину (≤ 0,25 мкг / мл), триметоприму / сульфаметоксазолу (МПК <2/38 мкг / мл), гентамицину (≤ 2 мкг / мл), линезолиду (≤ 2 мкг / мл). мкг / мл), фосфомицин (≤ 16 мкг / мл), ципрофлоксацин (≤ 0.5 мкг / мл), хлорамфеникол (≤ 16 мкг / мл), ампициллин (≤ 4 мкг / мл) и тейкопланин (≤ 1 мкг / мл). Процент чувствительных штаммов был ниже для имипенема (≤ 0,12 мкг / мл), пенициллина (≤ 4 мкг / мл) и тетрациклина (≤ 8 мкг / мл).

Характеристика штаммов

Enterococcus faecium и Enterococcus faecalis

Ни один из 4 протестированных штаммов E. faecium не обнаружил детерминант вирулентности ( ccf , cpd , cpd , co , efaA fs , efaA fm , agg 2 , gelE , cylA , eps E.faecalis протестированные изоляты обладали некоторыми детерминантами потенциальной вирулентности [см. дополнительный файл 3]. Все детерминанты половых феромонов были обнаружены в 19 штаммах E. faecalis , но ген, кодирующий цитолизин ( cylA ), может быть обнаружен только в 7 штаммах. Результаты для остальных генов энтерококков варьировали в зависимости от штаммов [см. Дополнительный файл 3].

Все штаммы E. faecium и E. faecalis были чувствительны к низким концентрациям пенициллина, ампициллина, ципрофлоксацина, фосфомицина, нитрофурантоина, тетрациклина, эритромицина, ванкомицина, рифоракопланина и дополнительных химиопланинов.Процент штаммов, устойчивых к хинупристину / далфоприсцину (МИК ≥ 4 мкг / мл), составил 79,31%, в то время как 34,48% из них проявили устойчивость к стрептомицину (МИК> 1000 мкг / мл). Только один штамм был устойчив к гентамицину (МИК> 500 мкг / мл) и только один — к линезолиду (МИК ≥ 8 мкг / мл) [см. Дополнительный файл 4].

Обсуждение

Молозиво и молоко играют ключевую роль в инициации, развитии и составе микробиоты кишечника младенца, поскольку они содержат множество факторов, таких как иммуноглобулины, иммунокомпетентные клетки, жирные кислоты, полиамины, олигосахариды, лизоцим, лактоферрин и антимикробные пептиды, которые модулируют рост бактерий в экосистеме кишечника.Кроме того, грудное молоко является важным и постоянным источником комменсальных бактерий, включая стафилококки, стрептококки и молочнокислые бактерии, в кишечник младенца [8-10]. Поэтому неудивительно, что бактериальный состав фекальной флоры грудного ребенка отражает бактериальный состав грудного молока [9].

В этой работе S. epidermidis был преобладающим видом в молоке кормящих женщин и в фекалиях их соответствующих младенцев, в то время как он почти отсутствовал в образцах фекалий младенцев, вскармливаемых смесью.Ранее в различных исследованиях сообщалось, что этот вид бактерий является преобладающим в грудном молоке здоровых женщин [9,10]. Напротив, E. faecalis был доминирующим видом среди изолятов, полученных из фекалий младенцев, вскармливаемых смесью. Аналогичным образом, молекулярный анализ показал, что E. faecalis присутствовал в фекалиях младенца, вскармливаемого смесью, на шестой день жизни, но, напротив, S. epidermidis не мог быть обнаружен [13]. Было высказано предположение, что основные различия между микробиологическим составом грудного молока и детской смеси, вероятно, являются основным фактором, ответственным за различия, наблюдаемые между кишечной микробиотой грудных детей и детей, вскармливаемых смесью [1-4,14].Другие группы бактерий, такие как лактобациллы, были менее распространены, и этот факт может быть связан с их меньшим присутствием или с тем фактом, что их трудно изолировать с культуральной средой, использованной в этом исследовании.

Интересно, что один и тот же штамм S. epidermidis (как определено с помощью генетического профилирования) был выделен из молока и фекалий нескольких каждой пары мать-ребенок. В последние годы было показано, что грудное молоко играет важную роль в вертикальной передаче молочнокислых бактерий от матери ребенку [5,8,15,16].В этом контексте наши результаты показывают, что обильное присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца является отличительной чертой фекалий грудных детей по сравнению с фекалиями младенцев, вскармливаемых смесью.

Исследования, проведенные 20 лет назад, уже показали, что стафилококки часто встречаются в кале грудных детей [12,17,18]. Совсем недавно было показано, что коагулазонегативные стафилококки колонизировали 100% западных младенцев, вскармливаемых грудью, начиная с 3-го дня [19]. Такие стафилококки колонизируют вагинально и рожать кесарева сечения одинаково рано.Некоторые авторы предполагают, что на самом деле колонизация кишечника младенцев стафилококками увеличилась с 70-х годов до настоящего времени [19,20]. Было высказано предположение, что это может быть следствием очень гигиеничного образа жизни, который приводит к задержке приобретения «традиционных» фекальных бактерий, таких как энтеробактерии [19]. В их отсутствие стафилококки становятся первыми колонизаторами кишечника, и результаты нашей работы предполагают, что грудное молоко могло быть основным источником. Затем популяция значительно уменьшилась с 4 недель до 6 месяцев.Аналогичным образом, в нашем исследовании количество образцов от младенцев, находящихся на грудном вскармливании, в которых можно было выделить S. epidermidis , уменьшалось с 1-й по 5-ю неделю.

Различные штаммы S. epidermidis , выделенные из фекалий кормящих грудью. Младенцы были подвергнуты схеме характеристики, которая включала определение детерминант, связанных с вирулентностью, и профиль устойчивости к антибиотикам, чтобы подтвердить преобладание непатогенных изолятов в кишечнике здорового младенца.Среди проанализированных штаммов S. epidermidis присутствие генов, связанных с адгезией, было очень высоким, независимо от образца, из которого они были выделены. Все они несли гены embp и atlE , и 25% штаммов несли ген fbe . Белки клеточной поверхности могут помочь объяснить высокую распространенность S. epidermidis в грудном молоке, поскольку они могут способствовать прикреплению бактерий к ареоле и протокам молочной железы в течение периода лактации.Напротив, процент штаммов, несущих связанный с биопленкой оперон ica , был намного ниже (20%). Сообщалось о потенциальной связи между инфекцией S. epidermidis и присутствием такого оперона [21]. Фактически, образование биопленок было описано во многих случаях стафилококкового мастита, и это причина, по которой это свойство рассматривается как потенциальный фактор вирулентности [22]. Несколько штаммов проявили устойчивость к метициллину, но устойчивые к метициллину стафилококки все чаще появляются в сообществе, и они обычно выделяются от здоровых хозяев [23].Во всем мире большинство штаммов S. epidermidis , охарактеризованных в этом исследовании, несут несколько факторов адгезии, но не обладают детерминантами устойчивости к антибиотикам или вирулентности. Поскольку штаммы стафилококков, полученные сначала из молозива, а затем из грудного молока, могут успешно конкурировать с потенциально патогенными штаммами, обнаруженными в больничной среде, их применение в качестве пробиотиков в неонатальных отделениях может быть рассмотрено в будущем, если работа ведется (включая полное секвенирование генома и анализ) подтверждают безопасность выбранных штаммов.

Энтерококки, в частности E. faecium и E. faecalis , становятся нормальными компонентами желудочно-кишечного тракта человека вскоре после рождения. С другой стороны, энтерококки являются условно-патогенными микроорганизмами, которые могут вызывать внутрибольничные инфекции у новорожденных, страдающих основными заболеваниями [24]. Однако наличие детерминант вирулентности и характер устойчивости к антибиотикам, по-видимому, является штамм-специфическим среди изолятов, изученных на данный момент [25,26]. Фактически, кажется, что человеческие изоляты, вовлеченные в клиническую инфекцию, попали в четко определенную подгруппу, что предполагает наличие генетической основы для штаммов, связанных с заболеванием человека [27,28].Кроме того, энтерококки, не вовлеченные в клиническую инфекцию человека, обычно чувствительны к клинически значимым антибиотикам, включая ванкомицин [24,26], как и штаммы энтерококков, проанализированные в этой работе.

Заключение

Наши результаты показывают, что практика кормления (грудное вскармливание или кормление смесями) оказала значительное влияние на количество бактерий и состав фекальной микробиоты. S. epidermidis является наиболее распространенным видом в фекалиях младенцев, вскармливаемых грудью, тогда как в фекалиях младенцев, вскармливаемых смесью, он практически отсутствует.Таким образом, S. epidermidis можно рассматривать как отличительную черту фекальной микробиоты грудных детей, хотя это открытие требует дальнейшего подтверждения в более крупных исследованиях. Стафилоккальные изоляты содержат лишь небольшое количество детерминант вирулентности и чувствительны к большинству протестированных антибиотиков. Кроме того, мы наблюдали, что E. faecalis является вторым видом бактерий в фекалиях в группе, находящейся на грудном вскармливании, но он также присутствует во всех образцах из группы, получавшей смесь.Характеристика нескольких репрезентативных изолятов энтерококков показала, что ни один из них не был устойчив к ванкомицину. Стрептококки были выделены из некоторых образцов молока и фекалий грудных детей, но, напротив, они не были обнаружены в фекалиях детей, вскармливаемых смесью.

Методы

Субъекты и выборка

Всего в исследовании участвовали 23 женщины и их младенцы, и они были включены в соответствии со следующими критериями: (а) здоровые женщины без настоящих или прошлых основных заболеваний; (б) нормальная доношенная беременность; (c) вагинальные роды; и (d) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит.Из 23 женщин 16 кормили грудью своих младенцев, в то время как остальные 7 добровольно выбрали коммерческую смесь без пребиотиков для кормления своих младенцев, несмотря на то, что им сообщили о преимуществах грудного вскармливания. Оценка размера выборки для обеих групп младенцев (на грудном вскармливании и на искусственном вскармливании) была основана на предполагаемом значительном влиянии практики кормления на микробиоту кишечника младенца (0,8 log единицы разницы в средних значениях количества бактерий). , с α на 0,05 и статистической мощностью 83% в дисперсионном анализе повторных измерений.Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическим комитетом больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания). Участники предоставили образец грудного молока (группа грудного вскармливания) и младенческих фекалий на 7, 14 и 35 дни после рождения. Все образцы собирали в стерильные пробирки, как описано ранее [10], и хранили при 4 ° C до доставки в лабораторию.

Выделение и подсчет бактерий

Правильные разведения пептонной воды образцов молока и кала в трех экземплярах высевали на Brain Heart Infusion (BHI, Oxoid, Basingstoke, UK; среду общего назначения, подходящую для культивирования неприхотливых бактерий. , дрожжи и плесень), фиолетово-красный желчный агар (VRBA; Difco, Детройт, штат Мичиган; селективная среда для выделения энтеробактерий) и колумбийский агар с надиликсиновой кислотой (CNA, BioMerieux; высокопитательная среда общего назначения для выделения и культивирование привередливых микроорганизмов) чашки с агаром, которые инкубировали в аэробных условиях при 37 ° C в течение 24 ч.Параллельно те же образцы культивировали на Wilkins-Chalgren (WCh, Oxoid; общая среда для выделения анаэробных бактерий) и de Man, Rogosa и Sharpe (MRS, Oxoid; среда для выделения молочнокислых бактерий и бифидобактерий). чашки с агаром, которые инкубировали анаэробно (85% азота, 10% водорода, 5% углекислого газа) на анаэробной рабочей станции (MINI-MACS, DW Scientific, Шипли, Великобритания) при 37 ° C в течение 48 часов. От 5 до 10 изолятов из каждой культуральной среды, где наблюдался рост (~ 35 изолятов на образец в неделю), были отобраны случайным образом, выращены в бульоне BHI и сохранены при -80 ° C в присутствии глицерина (30%, об. / Об.) .

Идентификация бактериальных изолятов

Отобранные изоляты наблюдали с помощью оптической микроскопии для определения их морфологии и окрашивания по Граму. Кроме того, они были протестированы на активность каталазы, оксидазы и коагулазы, а также на возможность роста на чашках с агаром Байрда-Паркера (BP, BioMerieux) и канамицином и эскулин-азидом (KAA, Oxoid). Все изоляты, соответствующие образцам (молоко / фекалии), полученным на 1, 2 и 5 неделе, были идентифицированы до уровня вида. Первоначально большинство изолятов, которые на основании таких предварительных тестов, по-видимому, принадлежали к роду Staphylococcus , были идентифицированы как S.epidermidis, S. aureus или S. hominis с помощью нового метода мультиплексной ПЦР, основанного на генах dnaJ . Вкратце, одиночную колонию, растущую на твердой среде, удаляли стерильным пластиковым наконечником и ресуспендировали в 100 мкл стерильной деионизированной воды в микроцентрифужной пробирке. Затем к суспензиям добавляли 100 мкл хлороформ / изоамиловый спирт (24: 1) и после перемешивания в течение 5 с смесь центрифугировали при 16000 × g в течение 5 минут при 4 ° C. Затем 5–10 мкл верхней водной фазы использовали в качестве источника ДНК-матрицы для ПЦР с праймерами J-StGen (5′-TGGCCAAAAGAGACTATTATGA-3 ‘), J-StAur (5′-GGATCTCTTTGTCTGCCG-3′), J- StEpi (5’-CCACCAAAGCCTTGACTT-3 ‘) и J-StHom (5′-TTGACCACTACCCTCACAC-3’) в термоциклере Icycler (Bio-Rad Laboratories, Ричмонд, Калифорния).Пары праймеров J-StGen / J-StAur, J-StGen / J-StEpi и J-StGen / J-StHom приводят к получению видоспецифичного фрагмента из S. aureus размером 337 п.н., 249 п.н. S. epidermidis видов — специфический фрагмент и видоспецифический фрагмент S. hominis размером 589 п.н. соответственно. Условия ПЦР были следующими: 1 цикл при 94 ° C в течение 4 минут, 30 циклов при 94 ° C в течение 30 секунд, 60 ° C в течение 30 секунд и 72 ° C в течение 30 секунд, и конечное продление 72 ° C для 5 мин. С другой стороны, большинство изолятов, которые, по-видимому, принадлежали к роду Enterococcus , можно было идентифицировать с помощью ПЦР видоспецифического обнаружения генов энтерококка ddl , которые кодируют D-аланин: D-аланин-лигазы, согласно описанному протоколу Дутка-Мален и др.[29]. Подтверждение идентификации стафилококков и энтерококков и идентификация остальных изолятов выполняли с помощью ПЦР-секвенирования фрагмента 470 п.н. гена 16S рРНК, как описано Kullen et al. [30]. Ампликоны очищали с использованием набора Nucleospin ® Extract II (Macherey-Nagel, Düren, Германия) и секвенировали в отделении геномики Университета Комплутенсе в Мадриде, Испания. Полученные последовательности использовали для поиска последовательностей, депонированных в базе данных EMBL, с использованием алгоритма BLAST, и идентичность изолятов была определена на основе наивысших баллов (> 98%).

Генотипирование изолятов

S. epidermidis , E. faecium и E. faecalis методом случайной амплификации полиморфной ДНК (RAPD)

The S. epidermidis, E. faecium и E. faecalis изоляты были типизированы RAPD. ДНК экстрагировали из изолированных колоний в соответствии с протоколом Ruiz-Barba et al. [31] и был использован в качестве матрицы для определения профиля RAPD с праймером OPL5 (5′-ACGCAGGCAC-3 ») [32]. Этот метод также использовался для сравнения S.epidermidis , полученные из грудного молока и детских фекалий различных пар мать-ребенок, чтобы узнать, возможна ли вертикальная передача этого вида от матери к ребенку.

Скрининг на потенциальные детерминанты вирулентности,

mecA, SSCmec и чувствительность к антибиотикам среди изолятов S. epidermidis

На основании различных RAPD 51 S. epidermidis штаммов были выбраны для дальнейших исследований. Присутствие генов embp , fbe и atlE (продукты которых участвуют в адгезии) и icaD (участвуют в образовании биопленок) оценивали с использованием пар праймеров, описанных ранее [33-36].В случае fbe , atlE и icaD был разработан новый формат мультиплексной ПЦР с использованием следующих условий: 5 мин при 94 ° C, затем 30 циклов при 94 ° C в течение 1 мин, 60 ° C для 30 с, 72 ° C в течение 1 мин, а затем последнее продление на 5 мин при 72 ° C. С другой стороны, условия для амплификации гена embp были следующими: 5 мин при 94 ° C в течение 1 цикла, затем 30 циклов по 30 с при 94 ° C, 1 мин при 58 ° C, 1 мин при 72 ° C. ° C, и заключительный этап удлинения при 72 ° C в течение 5 мин.Гемолитическую активность изолятов определяли на колумбийском агаре с добавлением 5% лошадиной крови (COH, BioMerieux). После инкубации в течение 72 часов при 37 ° C планшеты были проанализированы, и изоляты были классифицированы как негемолитические (без ореола), умеренно гемолитические (ореол <1,5 мм) или сильно гемолитические (ореол> 1,5 мм). Способность изолятов S. epidermidis образовывать биопленки оценивали с помощью анализа с агаром Конго Красный (CRA) [37]. Наличие гена mecA , придающего устойчивость к метициллину, оценивали на S.epidermidis в соответствии с протоколом, описанным в предыдущем исследовании [38]. Ген mecA расположен в мобильном элементе стафилококковой хромосомы, составляющем кассету SCC mec . Элемент SCC mec был подвергнут процедуре типирования, описанной ранее [39], которая основана на ПЦР-амплификации гена ccr B с последующим анализом полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (RFLP) с использованием эндонуклеаз Hinf I и Bsm I.

Определение МПК для нескольких антибиотиков оценивали методом микроразбавления с использованием планшетов Sensititre Staenc1F (Trek Diagnostic Systems, Кливленд, Огайо) в соответствии с инструкциями производителя. Были проанализированы следующие антибиотики: пенициллин, ампициллин, амоксициллин-клавулановая кислота, тейкопланин, хлорамфеникол, эритромицин, мупироцин, стрептомицин, гентамицин, клиндамицин, оксациллин, ципрофлоксацин, фосфомицин, трикомицин-сурофурантимин, нитопримолид, фосфомицин, имипрацистин, нитоприпенемин. далфоприсцин и рифампицин.

Скрининг на потенциальные детерминанты вирулентности,

генов и чувствительность к антибиотикам среди изолятов энтерококков

Аналогичным образом 25 штаммов E. faecalis и 4 E. faecium (по одному представителю от каждой группы RAPD, обнаруженной в этом исследовании). ) были дополнительно охарактеризованы. Новый метод мультиплексной ПЦР был использован для определения наличия детерминант вирулентности, кодирующих половые феромоны ( ccf , cpd , cad , cob ), адгезины ( efaA fs , fs , fm ) и продукты, участвующие в агрегации ( agg 2 ), биосинтез внеклеточной металлоэндопептидазы ( gelE ), биосинтез цитолизина ( cylA epsilon ) и иммунное уклонение ).Пары праймеров и условия ПЦР, использованные для обнаружения всех упомянутых выше генов, были предложены Eaton и Gasson [25]. Контрольными штаммами, использованными в ПЦР-экспериментах, были штаммы E. faecalis F4 ( efaA fs + gelE + agg + cylMBA

06

04 cpd + cob + ccf + cad + ), P36 ( efaA fs + 9000Egg + + 9000E цилиндров + esp + cpd + cob + ccf + cad fs + gelE + agg + cylA + cpd + cob + c cf + cad + ) и E.faecium P61 ( efaA FM + esp + ) [25]. Гемолитическую активность изолятов и их способность образовывать биопленки оценивали точно так же, как описано для стафилококковых изолятов.

Реакции ПЦР для генов vanA и vanB получали, как описано Dutka-Malen et al. [29] и Рамос-Трухильо и др. [40] соответственно. E. faecium BM4147 (устойчивый к ванкомицину, VanA + ) и E.faecalis V583 (устойчивый к ванкомицину, VanB + ) использовали в качестве положительного контроля. Обнаружение генов vanD , vanE и vanG в изолятах E. faecalis проводили, как описано ранее [41-43]. Определение МПК для нескольких антибиотиков оценивали с помощью метода микроразбавления, указанного для изолятов стафилококка.

Статистический анализ

Микробиологические данные, записанные в виде колониеобразующих единиц (КОЕ) на грамм фекалий или миллилитр молока, были преобразованы в логарифмические значения перед статистическим анализом.Приведенные значения количества бактерий представляют собой средние значения повторных или трех повторных определений и стандартное отклонение (SD) среднего значения. Количество бактерий в образцах кала анализировали с помощью двухфакторного дисперсионного анализа для повторных измерений с использованием процедуры общей линейной модели для определения влияния практики кормления (грудное вскармливание и кормление смесью) и возраста младенца (7, 14 и 35 дней после рождения) или питательные среды, используемые для подсчета количества бактерий (BHI, VRBA, CNA, WCh и MRS) и их взаимодействия.За двухфакторным дисперсионным анализом последовали тесты Дункана с множественными диапазонами (α = 0,05). Однофакторный дисперсионный анализ с повторными измерениями был использован для проверки различий между средними значениями бактериального подсчета в грудном молоке для каждой культуральной среды, использованной при отборе образцов в качестве переменной повторных измерений. Для этого анализа использовался пакет статистического программного обеспечения SAS версии 9.1 (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США).

Тесты t Стьюдента были применены для определения статистически значимых различий между количеством бактерий в кале у детей, вскармливаемых грудью и на искусственном вскармливании, в каждом младенческом возрасте и для каждой питательной среды, используемой для подсчета количества бактерий.Сравнение количества бактерий в грудном молоке, полученном в разное время отбора проб (1, 2 и 5 недель), также проводилось с использованием тестов Стьюдента t . Значения двусторонней вероятности (P) ≥ 0,05 считались незначимыми. Идентифицированные бактериальные изоляты из фекалий младенцев были проанализированы для оценки связи между присутствием определенного вида бактерий в образцах фекалий и практикой кормления с использованием тестов χ 2 и уровня значимости P <0,05.

Корреляция продукта-момента Пирсона использовалась для оценки связи между количеством бактерий в грудном молоке и фекалиях младенцев для каждой среды и времени отбора проб.Тесты Стьюдента t , χ 2 тесты и тест Пирсона проводили с помощью программного обеспечения Statgraphics Plus 5.0 (Manugistics, Inc., Роквилл, Мэриленд).

Вклад авторов

EJ и SD провели микробиологический анализ образцов, AM разработал праймеры и условия ПЦР. РА помогала в подготовке материала и участвовала в идентификации изолятов. MA и NG собрали образцы и эпидемиологические данные. MJ и LF участвовали в разработке исследования и выполнили статистический анализ.AG координировал набор добровольцев и сбор образцов, участвовал в разработке исследования и редактировал рукопись. JMR задумал исследование, координировал его и подготовил рукопись. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Дополнительный материал

Дополнительный файл 1:

Анализ штаммов S. epidermidis . Таблица, показывающая наличие потенциальных детерминант вирулентности и других признаков среди 51 S.epidermidis штаммов.

Дополнительный файл 2:

Устойчивость штаммов S. epidermidis к различным антибиотикам. Таблица, показывающая распределение МИК и процент устойчивости к различным антибиотикам среди штаммов S. epidermidis .

Дополнительный файл 3:

Анализ штаммов энтерококков. Таблица, показывающая наличие потенциальных детерминант вирулентности и других признаков среди штаммов энтерококков.

Дополнительный файл 4:

Устойчивость штаммов энтерококков к различным антибиотикам.Таблица, показывающая распределение МИК и процент устойчивости к различным антибиотикам среди штаммов энтерококков.

Благодарности

Эта работа была поддержана проектами FUN-C-FOOD (Consolider-Ingenio 2010) и AGL2007-62042 Министерства образования и науки (Испания).

Ссылки

  • Маки Р.И., Сгир А., Гаскинс Х.Р. Микробная экология развития желудочно-кишечного тракта новорожденных. Am J Clin Nutr. 1999; 69: 1035S – 1045S.[PubMed] [Google Scholar]
  • Йошиока Х., Исэки К., Фугита К. Развитие и различия кишечной флоры в неонатальном периоде у младенцев, находящихся на грудном и искусственном вскармливании. Педиатрия. 1983; 72: 317–321. [PubMed] [Google Scholar]
  • Бенно И., Савада К., Мицуока Т. Микрофлора кишечника младенцев: состав фекальной флоры у младенцев, находящихся на грудном и искусственном вскармливании. Microbiol Immunol. 1984; 28: 975–986. [PubMed] [Google Scholar]
  • Harmsen HJM, Wildeboer-Veloo ACM, Raangs GC, Wagendorp AA, Klein N, Bondels JG, Welling GW.Анализ развития кишечной флоры у младенцев, находящихся на грудном вскармливании, с использованием методов молекулярной идентификации и обнаружения. J Педиатр Гастроэнтерол Нутр. 2000. 30: 61–67. DOI: 10.1097 / 00005176-200001000-00019. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ahrné S, Lönnermark E, Wold AE, berg N, Hesselmar B, Saalman R, Strannegård IL, Molin G, Adlerberth I. Лактобациллы в кишечной микробиоте шведских младенцев. Микробы заражают. 2005; 7: 1256–1262. DOI: 10.1016 / j.micinf.2005.04.011. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ринне М.М., Геймонд М., Каллиомяки М., Хоппу Ю., Салминен С.Дж., Исолаури Э.Сходные бифидогенные эффекты частично гидролизованной детской смеси с пребиотиками и грудного вскармливания на микробиоту кишечника младенца. FEMS Immunol Med Microbiol. 2005; 43: 59–65. DOI: 10.1016 / j.femsim.2004.07.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Бём Г., Шталь Б., Елинек Дж., Кнол Дж., Миньелло В., Моро Г.Е. Пребиотические углеводы в материнском молоке и смесях. Acta Paediatr Suppl. 2005; 94: 18–21. DOI: 10.1080 / 080353205

    93. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

  • Мартин Р., Ланга С., Ревириего С., Хименес Э., Марин М.Л., Хаус Дж., Фернандес Л., Родригес Дж.М.Грудное молоко является источником молочнокислых бактерий для кишечника младенца. J Pediatr. 2003. 143: 754–758. DOI: 10.1016 / j.jpeds.2003.09.028. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Хейккиля, член парламента, Сарис PEJ. Ингибирование золотистого стафилококка комменсальными бактериями грудного молока. J Appl Microbiol. 2003. 95: 471–478. DOI: 10.1046 / j.1365-2672.2003.02002.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мартин Р., Хейлиг Х.Г., Зоетендал Э.Г., Хименес Э., Фернандес Л., Смидт Х., Родригес Дж. М..Независимая от культивирования оценка бактериального разнообразия грудного молока среди здоровых женщин. Res Microbiol. 2007; 158: 31–37. DOI: 10.1016 / j.resmic.2006.11.004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Grönlund MM, Gueimonde M, Laitinen K, Kociubinski G, Grönroos T., Salminen S, Isolauri E. Материнское грудное молоко и кишечные бифидобактерии определяют композиционное развитие микробиоты Bifidobacterium . у младенцев с риском аллергических заболеваний. Clin Exp Allergy. 2007; 37: 1764–1772.DOI: 10.1111 / j.1365-2222.2007.02849.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Саката Х., Йошиока Х., Фудзита К. Развитие кишечной флоры у младенцев с очень низкой массой тела при рождении по сравнению с нормальными доношенными новорожденными. Eur J Pediatr. 1985; 144: 186–190. DOI: 10.1007 / BF00451911. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Park HK, Shim SS, Kim SY, Park JH, Park SE, Kim HJ, Kang BC, Kim CM. Молекулярный анализ колонизированных бактерий в кишечнике новорожденного человека. J Microbiol. 2005. 43: 345–353.[PubMed] [Google Scholar]
  • Favier CF, Vaughan EE, de Vos W., Akkermans A. Молекулярный мониторинг последовательности бактериальных сообществ у новорожденных людей. Appl Environ Microbiol. 2002. 68: 219–226. DOI: 10.1128 / AEM.68.1.219-226.2002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мацумиа Й., Като Н., Ватанабе К., Като Х. Молекулярно-эпидемиологическое исследование вертикальной передачи вагинальных видов Lactobacillus от матери новорожденным младенцам на японском языке, автор: произвольно затравленная полимеразная цепная реакция.J Infect Chemother. 2002; 8: 43–49. [PubMed] [Google Scholar]
  • Мартин Р., Хименес Э., Оливарес М., Марин М.Л., Фернандес Л., Хаус Дж., Родригес Дж. М.. Lactobacillus salivarius CECT потенциальный пробиотический штамм, выделенный из детских фекалий и грудного молока пары мать-ребенок. Int J Food Microbiol. 5713; 112: 35–43. DOI: 10.1016 / j.ijfoodmicro.2006.06.011. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Lundequist B, Nord CE, Winberg J. Состав фекальной микрофлоры у детей, находящихся на грудном и искусственном вскармливании, от рождения до восьми недель.Acta Pediatr Scan. 1985; 74: 45–51. DOI: 10.1111 / j.1651-2227.1985.tb10919.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Balmer SE, Wharton BA. Диета и фекальная флора новорожденного: грудное молоко и детские смеси. Arch Dis Child. 1989; 64: 1672–1677. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Adlerberth I, Lindberg E, Aberg N, Hesselmar B, Saalman R, Strannegård IL, Wold AE. Снижение энтеробактериальной и усиленной колонизации стафилококками детского кишечника: эффект гигиенического образа жизни.Pediatric Res. 2006; 59: 96–101. DOI: 10.1203 / 01.pdr.00001

    .12774.b2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

  • Borderon JC, Lionnet C, Rondeau C, Suc AI, Laugier J, Gold F. Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки. Pathol Biol. 1996; 44: 416–422. [PubMed] [Google Scholar]
  • Vandecasteele SJ, Peetermans WE, Merckx R, Rinders BJ, Van Eldere J. Надежность генов ica , aap и atlE в различении инвазивных, колонизирующих и контаминантов Staphylococcus epidermidis изолятов в диагностике катетерных инфекций.Clin Microbiol Infect. 2003. 9: 114–119. DOI: 10.1046 / j.1469-0691.2003.00544.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Мельхиор М.Б., Вааркамп Х., Финк-Греммельс Дж. Биопленки: роль в рецидивирующих инфекциях мастита? Вет Дж. 2006; 171: 398–407. DOI: 10.1016 / j.tvjl.2005.01.006. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Oliveira DC, Milheirico C, Vinga S., de Lencastre H. Оценка аллельной изменчивости в локусе ccr AB в метициллин-устойчивых клонах Staphylococcus aureus .J Antimicrob Chemother. 2006; 58: 23–30. DOI: 10.1093 / jac / dkl208. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Kayser FH. Аспекты безопасности энтерококков с медицинской точки зрения. Int J Food Microbiol. 2004. 88: 255–262. DOI: 10.1016 / S0168-1605 (03) 00188-0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Итон Т., Гассон М.Дж. Молекулярный скрининг детерминант вирулентности Enterococcus и возможности генетического обмена между пищевыми и медицинскими изолятами. Appl Environ Microbiol. 2001; 67: 1628–1635.DOI: 10.1128 / AEM.67.4.1628-1635.2001. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Франц CMAP, Muscholl-Silberhorn AB, Yousif NMK, Vancanneyt M, Swings J, Holzapfel WH. Распространенность факторов вирулентности и устойчивости к антибиотикам среди энтерококков, выделенных из пищевых продуктов. Appl Environ Microbiol. 2001; 67: 4385–4389. DOI: 10.1128 / AEM.67.9.4385-4389.2001. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Vancanneyt M, Lombardi A, Andrighetto C, Knijff E, Torriani S, Björkroth KJ, Franz CM, Foulquié Moreno MR, Revets H, De Vuyst L, Swings J, Kersters K, Dellaglio F, Holzapfel WH.Внутривидовые геномные группы в Enterococcus faecium и их корреляция с происхождением и патогенностью. Appl Environ Microbiol. 2002; 68: 1381–1391. DOI: 10.1128 / AEM.68.3.1381-1391.2002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Пиллаи С.К., Сакулас Г., Голд ХС, Веннерстен С., Элиопулос Г.М., Мёллеринг Р.С., младший, Иноуе RT. Распространенность локуса fsr в инфекциях Enterococcus faecalis . J Clin Microbiol. 2002; 40: 2651–2652. DOI: 10.1128 / JCM.40.7.2651-2652.2002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Дутка-Мален С., Эверс С., Курвалин П. Обнаружение генотипов устойчивости к гликопептидам и идентификация клинически значимых энтерококков на уровне видов с помощью ПЦР. J Clin Microbiol. 1995; 33: 24–27. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Каллен М.Дж., Санозски-Дауэс Р.Б., Кроуэлл, округ Колумбия, Клаенхаммер, TR. Использование последовательности ДНК вариабельных областей гена 16S рРНК для быстрой и точной идентификации бактерий в комплексе Lactobacillus acidophilus .J Appl Microbiol. 2000. 89: 511–516. DOI: 10.1046 / j.1365-2672.2000.01146.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Руис-Барба Дж. Л., Мальдонадо А., Хименес-Диас Р. Мелкомасштабная экстракция тотальной ДНК из бактерий и дрожжей для приложений ПЦР. Анальная биохимия. 2005; 347: 333–335. DOI: 10.1016 / j.ab.2005.09.028. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Родас А., Феррер С., Пардо И. Полифазное исследование винных штаммов Lactobacillus : таксономические последствия. Int J Syst Evol Microbiol.2005; 55: 197–207. DOI: 10.1099 / ijs.0.63249-0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Уильямс Р.Дж., Хендерсон Б., Шарп Л.Дж., Наир С.П. Идентификация фибронектин-связывающего белка из Staphylococcus epidermidis . Infect Immun. 2002; 70: 6805–6810. DOI: 10.1128 / IAI.70.12.6805-6810.2002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Нильссон М., Фрикберг Л., Флок Дж. И., Пей Л., Линдберг М., Гусс Б. Фибриноген-связывающий белок Staphylococcus epidermidis .Infect Immun. 1998. 66: 2666–2673. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Frebourg NB, Lefebvre S, Baert S, Lemeland JF. Анализ на основе ПЦР для различения инвазивных и контаминирующих штаммов Staphylococcus epidermidis . J Clin Microbiol. 2000; 38: 877–880. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Cafiso V, Bertuccio T, Santagati M, Campanile F, Amicosante G, Perilli MG, Selan L, Artini M, Nicoletti G, Stefani S. Наличие оперона ica в клинических изолятах Staphylococcus epidermidis и его роль в производстве биопленок.Clin Microbiol Infect. 2004; 10: 1081–1088. DOI: 10.1111 / j.1469-0691.2004.01024.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Оливейра М., Бексига Р., Нуньес С.Ф., Карнейро С., Кавако Л.М., Бернардо Ф., Вилела К.Л. Профилирование биопленкообразующей способности изолятов мастита Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis . Vet Microbiol. 2006. 118: 133–140. DOI: 10.1016 / j.vetmic.2006.07.008. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Cafiso V, Campanile F, Borbone S, Caia A, Cascone C, Santagati M, Stefani S.Корреляция между устойчивостью к метициллину и устойчивостью к фторхинолонам у Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis . Infez Med. 2001; 9: 90–97. [PubMed] [Google Scholar]
  • Ян Дж. А., Пак Д. В., Сон Дж. В., Ким М. Дж. Новый анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов с помощью ПЦР для быстрого типирования стафилококковых кассетных элементов хромосомы mec . J Clin Microbiol. 2006. 44: 236–238. DOI: 10.1128 / JCM.44.1.236-238.2006. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Рамос-Трухильо Э., Перес-Рот Э., Мендес-Альварес С., Клавери-Мартин Ф.Мультиплексная ПЦР или одновременное обнаружение энтерококковых генов vanA и vanB и стафилококковых генов meca , ileS -2 и femB . Int Microbiol. 2003; 6: 113-115. DOI: 10.1007 / s10123-003-0118-z. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Перихон Б., Рейнольдс П., Курвалин П. Устойчивый к гликопептидам типа VanD Enterococcus faecium BM 4339. Противомикробные агенты Chemother. 1997; 41: 2016–2018. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Fines M, Perichon B, Reynolds P, Sahm DF, Courvalin P.VanE, новый тип приобретенной устойчивости к гликопептидам у Enterococcus faecalis BM4405. Антимикробные агенты Chemother. 1999; 43: 2161–2164. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • McKessar SJ, Berry AM, Bell JM, Turnidge JD, Paton JC. Генетическая характеристика vanG. Новый локус устойчивости к ванкомицину Enterococcus faecalis . Антимикробные агенты Chemother. 2000; 44: 3224–3228. DOI: 10.1128 / AAC.44.11.3224-3228.2000. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS) Двенадцать информационных приложений M100-S12.Уэйн, Пенсильвания; 2000. Стандарты эффективности тестирования на чувствительность к противомикробным препаратам. [Google Scholar]

Характеристика штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из фекалий здоровых новорожденных, и потенциальной передачи микробов от матери ребенку при грудном вскармливании | FEMS Microbiology Ecology

Двадцать одна женщина и их соответствующие дети-одиночки участвовали в этом исследовании, предоставив образцы грудного молока и фекалий (на 7, 14 и 35 дни после рождения), соответственно, используемые для выздоровления Staphylococcus aureus .Цель состояла в том, чтобы отследить носительство S. aureus в молоке и детских фекалиях пар мать-младенец и определить генетические линии изолятов, их потенциальные клональные отношения и их содержание в кластере устойчивости к противомикробным препаратам, вирулентности и иммунного уклонения гены. Молекулярная характеристика была выполнена с помощью ПЦР и секвенирования. Клональные отношения между изолятами матери и ребенка определяли с помощью типирования spa , мультилокусного типирования последовательностей (MLST) и гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE). Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов). Из 41 извлеченных S. aureus 18 были метициллин-устойчивыми (MRSA) и 23 метициллин-чувствительными (MSSA). Среди S. aureus было обнаружено двенадцать типов differentes spa и восемь типов последовательностей. Преобладающими клональными комплексами были CC5 (43,9%) и CC30 (36,6%). Штаммы MRSA показали профиль множественной лекарственной устойчивости, 65.2% штаммов MSSA содержали ген токсина tsst-1 , а 26,8% всех штаммов несли ген cna . Потенциальная передача S. aureus от матери ребенку была продемонстрирована в четырех случаях с помощью типирования spa , MLST и PFGE (передача t322 / ST5 / CC5-PFGE-A, t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C). Грудное вскармливание, по-видимому, способствует ранней кишечной колонизации S. aureus у новорожденных, что может повлиять на развитие иммунной системы.

ВВЕДЕНИЕ

Ранняя жизнь, по-видимому, является решающим периодом для правильного установления микробиоты кишечника с краткосрочными, среднесрочными и долгосрочными последствиями для здоровья хозяина (Sim et al. , 2013). На этом жизненном этапе вертикальная передача микробов от матери ребенку обычно играет ключевую роль в начальной колонизации кишечника новорожденного (Cho and Blaser 2012). Хотя существует множество исследований потенциальной передачи этих бактерий, наиболее часто участвующих в неонатальном сепсисе (например,грамм. Streptococcus agalactiae , Escherichia coli ), данные о других бактериях, которые могут иметь эпидемиологическое значение в обществе, таких как Staphylococcus aureus , немногочисленны (Bourgeois-Nicolaos et al. , 2010; Delgado et al. , 2011; Хименес-Трук и др. , 2012; Лешем и др. , 2012).

Staphylococcus aureus — это вид, обычно встречающийся в составе нормальной микробиоты человека, в основном в ротоглотке, носу и коже, хотя его также можно найти как часть микробиоты кишечника (Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Benito и другие., 2013) как здоровых, так и госпитализированных хозяев. Золотистый стафилококк — чрезвычайно универсальный условно-патогенный микроорганизм с множеством механизмов, способных вызывать заболевание и обходить иммунную защиту. Следовательно, заселение доношенных новорожденных этим видом может увеличить риск инфицирования в раннем возрасте (van Belkum et al. , 2009). Тем не менее, в других исследованиях сообщается, что перинатальная колонизация S. aureus может иметь положительный эффект на развитие иммунной системы новорожденных (Lundell et al., 2007).

Staphylococcus aureus может содержать или приобретать различные детерминанты устойчивости, и среди них приобретение гена mecA особенно актуально, поскольку он придает устойчивость к метициллину и большинству бета-лактамов. Метициллин-устойчивый S. aureus (MRSA) может поражать как госпитализированных (HA-MRSA), так и местных (CA-MRSA) пациентов. С другой стороны, S. aureus может продуцировать большое количество факторов вирулентности, которые могут усугубить клинический исход стафилококковых инфекций (Jarraud et al., 2002). Некоторые из наиболее важных факторов вирулентности — лейкоцидин Пантона-Валентайна (PVL), токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), различные гемолизины, эксфолиатины, энтеротоксины и другие факторы вирулентности, которые способствуют клеточной инвазии, росту бактерий и уклонению от иммунитета (Sabat и др. , 2000; Cucarella и др. , 2001; Jarraud и др. , 2002; van Wamel и др. , 2006; Витте и др. , 2007).

В последнее время возник особый интерес к генетическим линиям S.aureus , которые циркулируют в разных средах, чтобы отслеживать их эволюцию в разных нишах и знать потенциальные первоисточники. В этом смысле кластер иммунного уклонения (IEC) может быть важным маркером, разрешающим S . aureus , чтобы избежать действия некоторых компонентов врожденной иммунной системы человека. Изоляты, адаптированные для животных-хозяев, часто не имеют генов системы IEC (Benito et al. , 2013).

В предыдущем исследовании нашей группы оценивалось культивируемое бактериальное разнообразие молока и фекалий 16 кормящих матерей и их младенцев, находящихся на грудном вскармливании, соответственно (Jiménez et al., 2008). Выделенные изолятов S. epidermidis и энтерококков были полностью охарактеризованы (Jiménez et al. , 2008). Кроме того, изолятов S. aureus можно было выделить из некоторых из этих пар мать-младенец, но они не были охарактеризованы. Целью этого исследования было, во-первых, проследить носительство S. aureus в образцах молока и детских фекалий, предоставленных 21 парой мать-ребенок (включая 16 из предыдущего исследования и 5 дополнительных, привлеченных в этом исследовании). и, позднее, для определения генетических линий изолятов, потенциальных клональных взаимоотношений между этими изолятами, полученных в одной и той же паре мать-младенец, и их содержания в генах устойчивости к противомикробным препаратам, а также в генах вирулентности и IEC.

МЕТОДЫ

Сборник образцов

Всего в исследовании участвовала 21 женщина и их соответствующие дети-одиночки, которые соответствовали следующим характеристикам: (a) здоровые женщины с нормальной доношенной беременностью; (б) вагинальные роды; (c) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит, и отсутствие использования антибиотиков во время родов; и (d) младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании. Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическими комитетами больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания) и больницы Clínico San Carlos (Мадрид, Испания).Женщины и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий соответственно на 7, 14 и 35 дни после рождения. Образцы молока собирали в стерильных условиях в стерильную пробирку путем ручного сцеживания с использованием стерильных перчаток. Раньше соски и ареола молочной железы промывались стерильной водой с мылом и пропитывались хлоргексидином (Cristalmina, Salvat, Барселона, Испания). Первые капли (~ 500 мкл) были отброшены. Образцы фекалий (~ 5 г) собирали в отдельные стерильные контейнеры для фекалий.Все образцы хранились при 4ºC до доставки в лабораторию (максимум 12 часов) и сразу же обрабатывались.

Процедуры отбора образцов

изолятов S. aureus

Разведения образцов высевали на две селективные среды: агар Байрда – Паркера и агар Колумбия – Налидиксовая кислота (BioMerieux, Marcy l Etoile, Франция). От 5 до 10 репрезентативных изолятов, морфология колоний и другие фенотипические характеристики (форма клеток, окрашивание по Граму, активность каталазы и оксидазы) были совместимы с таковыми для стафилококков (включая, по крайней мере, одного представителя каждой морфологии колонии), были отобраны из каждого питательная среда, выращенная в бульоне BHI и хранящаяся при -80ºC в присутствии глицерина (30%, об. / об.).Все изоляты были идентифицированы до видового уровня с помощью метода мультиплексной ПЦР на основе генов dnaJ (Jiménez et al. , 2008), и идентификация была позже подтверждена с помощью MALDI-TOF (VITEK MS, BioMerieux). Впоследствии в это исследование были включены все изоляты, которые были идентифицированы как S. aureus либо из образцов молока, либо из фекалий. Присутствие гена nuc было также изучено для дальнейшего подтверждения изолятов S. aureus (Lozano et al., 2011).

Молекулярное типирование изолятов

Молекулярная характеристика изолятов S. aureus была выполнена различными молекулярными методами. Было проведено типирование Spa (Harmsen et al. , 2003) и полученные последовательности проанализированы с использованием программного обеспечения Ridom Staph Type версии 1.5.21 (Ridom GmbH). Определение аллотипов agr — дополнительных регуляторных локусов генов — выполняли с помощью двух мультиплексных ПЦР (Shopsin et al., 2003) для всех изолятов. Мультилокусное типирование последовательностей (MLST) было также выполнено для одного представителя каждого типа spa , обнаруженного в этом исследовании, для определения типа последовательности (ST) и клонального комплекса (CC) изолятов (www.saureus.mlst.net).

Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE)

Когда аналогичные типы spa были идентифицированы среди изолятов, полученных от данной матери и ее соответствующего ребенка (и, следовательно, предполагая потенциальную передачу от матери ребенку), анализ клонального родства был выполнен PFGE (Murchan и другие., 2003) тотальной ДНК, расщепленной эндонуклеазой Sma I (New England Biolabs). Гель готовили на 1,8% агаре и прогоняли в течение 22 часов при 6 В см –1 , используя время импульса от 5 до 50 с. Электрофорез проводили в системе CHEF DR-II (Bio-Rad). Стандартный ДНК-маркер (Lambda Ladder PFG Marker, New England Biolab) был включен в гель.

Тестирование чувствительности и выявление генов устойчивости к противомикробным препаратам

Тестирование чувствительности проводилось методом диско-диффузионного агара для 17 противомикробных препаратов (пенициллин, оксациллин, цефокситин, эритромицин, клиндамицин, ципрофлоксацин, гентамицин, стрептомицин, канамицин, тобрамицин, тетрациклино-маликомицин, сульфаметамицин – мантоломициклин, хлорамприциклин, хлорамприциклин, хлорамприциклин, хлорамприптолид). фузидиевая кислота) в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST (CLSI 2014; EUCAST 2014).Кроме того, был проведен D-тест для выявления индуцибельной устойчивости к клиндамицину (CLSI 2014).

Наличие 25 генов устойчивости [ mec (A) , blaZ , tet (M) , tet (K) , tet (L) , tet (O) , erm (A) , erm (B) , erm (C) , erm (F) , erm (T) , msr (A) , msr (B) , mph ( C) , lnu (A) , lnu (B) , vga (A) , ant (4 ) -Ia , aph (3 ) -IIIa , aac (6 ) Ie-aph (2 ) , aad (A) , aad (E) , str , fus (B) и fus (C) ] в S.aureus исследовали с помощью ПЦР (Удо, Аль-Свейл и Норонха, 2003; Лозано, и др., , 2011; Бенито, и др., , 2013).

Обнаружение генов вирулентности

Анализ профиля вирулентности был проведен с помощью ПЦР для выявления следующих генетических детерминант: лейкоцидин Пантона-Валентайна ( lukF / lukS- PV ) , токсин синдрома токсического шока ( tsst-1 ) и эксфолиативный токсин A ( eta ), B ( etd ) и D ( etd ).Кроме того, гены, кодирующие лейкоцидины DE ( lukD-lukE ) и M ( lukM ), ауреолизин ( aur ), ассоциированный с биопленкой белок ( bap) и коллаген-связывающий белок ( cna ). ) также были изучены с помощью ПЦР (Sabat et al. , 2000; Cucarella et al. , 2001; Witte et al. , 2007; Lozano et al. , 2011; Benito et al. , 2013).

Кластер иммунного уклонения

Пять генов, составляющих IEC ( scn , chp, sak и sea или sep ), были изучены с помощью ПЦР.В зависимости от наличия или отсутствия этих генов и их различных комбинаций все изоляты S. aureus были классифицированы на семь типов IEC в соответствии с ранее описанными схемами (van Wamel et al. , 2006).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Изоляция

S. aureus

Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов) (Таблица 1).Более конкретно, S. aureus был получен в образцах фекалий двух младенцев на 7-й день, трех — на 14-й день и десяти — на 35-й день после рождения (таблица 2). Золотистый стафилококк был обнаружен как в молоке матери, так и в фекалиях младенца в шести из исследованных случаев. Выявлено четыре потенциальных случая передачи инфекции от матери ребенку при грудном вскармливании (таблица 1).

Таблица 1.

Основные характеристики штаммов S. aureus , выделенных от матерей и младенцев в этом исследовании.

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнский MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнская MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

Таблица 1.

Основные характеристики штаммов S. aureus , полученных от матерей и младенцев в этом исследовании.

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнский MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнская MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

Таблица 2.

Staphylococcus aureus штаммов, выделенных в 12 случаях от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, согласно оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0

0 6

.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0 90.

Staphylococcus aureus штаммов, выделенных в 12 случаях от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, согласно оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.

. Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440
Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0

0 6

.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0 9689 изолятор

Молекулярный изолятор

Всего 41 S.aureus были выделены в этом исследовании от матерей и младенцев, и 18 из них были признаны MRSA, поскольку они показали устойчивость к оксациллину и цефокситину и были положительными по гену mec A. Эти изоляты MRSA были получены от 2 из 21 протестированной матери (9,6%) и от 5 из 21 ребенка (23,8%). Остальные 23 изолята были чувствительны к оксациллину и цефокситину, не имели гена mecA и рассматривались как MSSA.

Результаты полной характеристики всех изолятов MRSA и MSSA, выделенных в этом исследовании, показаны в таблице 1.Было обнаружено двенадцать различных типов спа (t002, t012, t015, t021, t122, t136, t148, t166, t322, t440, t5204 и новый тип spa , зарегистрированный как t10664 в Ridom Spa Server), и большинство Частые agr аллотипов были II и III.

Изоляты Staphylococcus aureus принадлежали к восьми различным типам последовательностей (ST5, ST8, ST15, ST30, ST34, ST45, ST1434 и ST1869), включенным в шесть различных клональных комплексов (CC5, CC8, CC15, CC30, CC45 и CC72).Изоляты MRSA были типированы как ST5 ( spa -322 и spa -t002), отнесены к клональному комплексу CC5 и типизированы как SCC mec IV. Другие ST, идентифицированные среди MSSA, были (приписаны ST / CC): ST8 / CC8, ST15 / CC15, ST30-ST34-ST1869 / CC30, ST45 / CC45 и ST1434 / CC72. Преобладающими клональными комплексами были CC5 и CC30, они составляли 43,9 и 36,6% от общего числа изолятов (таблица 1).

Анализ PFGE для проверки потенциального от матери ребенку

Передача S. aureus

Модель spa тип модели S.aureus от матерей и младенцев предполагают потенциальную передачу инфекции от матери к ребенку в четырех парах мать-младенец (случаи 1–4). Чтобы прояснить этот вопрос, сравнивали профили PFGE изолятов с аналогичными типами spa . Было подтверждено совместное использование клона MRSA t322 / ST5 / CC5-PFGE-A между матерями и младенцами в случаях 1 и 2. Точно так же клоны MSSA t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и MSSA t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C были общими для случая 3 и случая 4 соответственно (таблица 2, рис.1). Не было обнаружено сходства между типами spa и среди изолятов от матерей и младенцев из остальных восьми случаев.

Рисунок 1. Анализ

PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C.Сокращения. В: младенец; Мо: мама.

Рисунок 1. Анализ

PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C. Сокращения. В: младенец; Мо: мама.

Тестирование чувствительности и выявление генов устойчивости к противомикробным препаратам

Изоляты MSSA показали чувствительность к большинству протестированных противомикробных препаратов, за исключением двух изолятов, отнесенных к линиям CC30 и CC45, которые проявляли устойчивость к стрептомицину и которые содержали ген str . С другой стороны, изоляты MRSA-CC5-t322 демонстрируют фенотип множественной лекарственной устойчивости с устойчивостью к эритромицину, клиндамицину, гентамицину, тобрамицину и канамицину в дополнение к устойчивости к метициллину; эти изоляты несли erm (C) , aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia и aph (3 ) -III , и два из них также несли ген lnu (A) .В дополнение к вышеупомянутым противомикробным препаратам один изолят, типизированный как t002-ST5 / CC5, показал устойчивость к ципрофлоксацину, стрептомицину и фузидовой кислоте, содержащий гены str и fus (C) (Таблица 1).

Гены вирулентности

Различное количество факторов вирулентности было обнаружено среди 41 изолята S. aureus (таблица 1). Интересно, что 15 изолятов MSSA, принадлежащих к клональному комплексу CC30, содержали ген токсина tsst-1 (36.6%), тогда как восемь изолятов (три MRSA-CC5 и пять MSSA-CC30) несли ген эксфолиативного токсина A ( эта, ). Пять из протестированных младенцев содержали в своих фекалиях TSST-продуцирующие штаммы S. aureus клонального комплекса CC30 (в двух случаях он также был обнаружен в молоке их матерей). Гены lukD – lukE были обнаружены у 30 изолятов (73,2%), из них 18 MRSA и 12 MSSA. В общей сложности 35 изолятов содержали ген aur , и 12 были положительными по гену cna (принадлежащему в основном к клональным комплексам CC30 и CC45).Все изоляты были отрицательными на присутствие генов lukF / lukS- PV, lukM, bap, etb или etd (таблица 1).

Анализ генов IEC

Только шесть изолятов S. aureus MSSA-CC30 из 41 исследованных S. aureus не содержали гены IEC. Среди остальных изолятов были получены следующие типы IEC (тип IEC / CC): A / CC30, B / CC30-CC45-CC8-CC72, C / CC15, E / CC30-CC5 и F / CC5-CC45. Типы IEC D и G не были обнаружены ни в одном из изолятов (таблица 1).

Персистентность

клонов S. aureus

Один и тот же клон S. aureus был выделен от одного и того же младенца, по крайней мере, в два разных периода отбора проб, в случаях 2 и 5, что указывает на клональную персистентность. У остальных младенцев S. aureus было выделено только в одной из трех проб фекалий, полученных в течение исследуемого периода (35 дней).

ОБСУЖДЕНИЕ

Высокий уровень фекального носительства S. aureus (12 из 21 протестированного, 57%) был обнаружен среди здоровых младенцев в этом исследовании в течение первых 35 дней их жизни.Штаммы MRSA были обнаружены у 5 из этих 12 младенцев, что составляет 23,8% от общего числа протестированных младенцев. Ни у одного из MRSA-положительных младенцев, выявленных в этом исследовании, не развилась инфекция MRSA в течение следующих 6 лет жизни (данные не показаны). В предыдущих исследованиях сообщалось о фекальном носительстве S. aureus в диапазоне от 6 до 65% у здоровых младенцев (Björkstén et al. , 2001; Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Lindberg et al. 2004) и заметно более низком MRSA. Показатели вынашивания здоровых детей и людей на момент поступления в больницу (0–5%) (Dominguez, Zarazaga and Torres, 2002; Jernigan et al., 2003), хотя зарегистрированный процент увеличился среди госпитализированных пациентов (24%) (Klotz et al. , 2005). Кроме того, предыдущее исследование показало, что колонизация кишечника младенца S. aureus была высокой в ​​течение первого месяца жизни, но уменьшалась в последующие недели (Björkstén et al. , 2001). В нашем исследовании самая высокая распространенность у младенцев была обнаружена через 35 дней после рождения. Что касается образцов молока протестированных матерей, два из 21 (9,6%) содержали MRSA, что также свидетельствует о высоком уровне носительства.

Обращает на себя внимание генетическое разнообразие типов spa , выявленных в нашем исследовании (12 различных типов spa , включая новый). Более одной трети штаммов показали типов spa , которые можно отнести к клональному комплексу CC30, линии, которая, по-видимому, успешно колонизирует людей и показала большую повсеместность (Deurenberg et al. , 2009). Этот клональный комплекс, по-видимому, связан с внебольничными инфекциями 9 . Наши штаммы MSSA CC30 показали небольшое количество генов устойчивости к противомикробным препаратам, но замечательный профиль генов вирулентности; Фактически, более 90% штаммов MSSA-CC30 содержат ген токсина синдрома токсического шока ( tsst-1 ).Эта связь между MSSA-CC30 и tsst-1 наблюдалась в других исследованиях (Deurenberg et al. 2009), но в меньших процентах, чем в нашем исследовании (Mégevand et al. , 2010; Lozano et al. , 2011). Ранняя кишечная колонизация изолятами S. aureus , продуцирующими токсины с суперантигенной функцией (TSST-1), по-видимому, способствует системным ответам IgA у новорожденных, которые отрицательно коррелируют с развитием аллергии (Lundell et al. , 2009).

Примерно одна треть из штаммов S. aureus была типирована как MRSA-t322-ST5-CC5, с agr -II и SCC mec IV. Эти штаммы показали типичный профиль HA-MRSA (Schaumburg et al. , 2012), продемонстрировали множественную лекарственную устойчивость (макролиды, линкозамины и аминоглюкозиды) и различные гены устойчивости к противомикробным препаратам, включая erm (C), aac (6 ). -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia и aph (3 ) -III, а также lnu (A) в двух из них .Обнаружение IEC типа F или E во всех этих штаммах дополнительно подтверждает их профиль HA-MRSA (Benito et al. , 2013).

Интересно, что в одном образце фекалий был обнаружен один штамм MSSA t148 / ST1434-CC72; эта клада S aureus ранее была связана со штаммами CA-MRSA, обнаруженными в азиатских странах (Harastani, Araj and Tokajian, 2014), но в нашем случае у штамма CC72 отсутствовали детерминанты устойчивости к метициллину. Точно так же штамм MSSA, типизированный как t10664 / ST8-CC8, не обладал генами токсина PVL и, следовательно, не демонстрировал типичный профиль CA-MRSA (Uhlemann et al., 2014).

Все наши штаммы S. aureus были PVL-отрицательными, а luk-M отрицательными. Более того, ни один из них не содержал ген bap , кодирующий ассоциированный с биопленкой белок (Cucarella et al. , 2001). Ранее предполагалось, что распространенность гена bap среди штаммов S. aureus очень низкая (Vautor et al. , 2008). Кроме того, восемь штаммов (19,5%) несли ген eta , кодирующий эксфолиативный токсин А, и они были отнесены к клональным комплексам CC5 и CC30.Сообщалось, что эти штаммы вызывают стафилококковый синдром ошпаренной кожи и импетиго (Masiuk et al. , 2010). Кроме того, 73,2% наших штаммов несли гены lukD – lukE , которые кодируют лейкотоксин, который более распространен в HA-MRSA (Uhlemann et al. , 2014). Двенадцать штаммов CC8, CC30 или CC45 содержат ген cna , кодирующий коллаген-связывающий белок, в основном связанный с приобретенным сообществом MRSA или MSSA (Deurenberg et al. , 2009).

Анализ

PFGE выявил четыре случая возможной передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко (рис. 1). Интересно, что один и тот же клон использовался в образцах молока и фекалий младенцев в двух разных случаях (случаи 1 и 2). Некоторые авторы предполагают, что колонизированная кожа родителей является источником большей части S. aureus , который колонизирует младенцев или младенческую микробиоту кишечника (Gries et al. , 2009), в то время как другие предполагают, что сотрудники родильного отделения могут быть еще одним источником заражения. передача между младенцами и матерями (Matussek et al., 2007). Кроме того, есть исследования, которые постулируют, что увеличение частоты появления S. aureus на коже госпитализированных пациентов может быть потенциальным источником, способствующим внутрибольничной передаче (Bhalla, Aron and Donskey 2007). В нашем исследовании клон t322-CC5, который был обнаружен в двух случаях потенциальной передачи вируса от матери ребенку, мог иметь больничное происхождение, поскольку он обладал типичными характеристиками HA-MRSA. Младенцы случаев 1 и 2 родились в одной больнице, но с разницей в 6 месяцев.

Грудное молоко представляет собой сложную биологическую жидкость, специфичную для каждого вида, адаптированную для удовлетворения пищевых потребностей быстро растущего младенца; Кроме того, он обучает иммунную систему младенца и обеспечивает определенную степень защиты от патогенов. Эти эффекты отражают синергетическое действие многих биоактивных молекул (Ballard et al. , 2013). Кроме того, недавние исследования показали, что грудное молоко является постоянным источником бактерий для кишечника младенца, а исследования как в культуре, так и в микробиоме показали, что стафилококки, в основном ЦНС, составляют доминирующие бактерии в этой биологической жидкости (Fernández et al. ., 2013). Интересно, что и S. aureus , и S. epidermidis относятся к микроорганизмам с самой высокой способностью метаболизировать олигосахариды грудного молока (Hunt et al. , 2012). Различные исследования показывают, что некоторые бактерии, присутствующие в кишечнике матери, включая стафилококки, могут достигать молочной железы на поздних сроках беременности и в период лактации через механизм, включающий моноциты кишечника (Martin et al. , 2004; Pérez et al. , 2007) .Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , включая токсигенные изоляты, влияет на уровень растворимого CD14 или IgA, циркулирующих в плазме новорожденных, что влияет на развитие иммунной системы и риск развития аллергии (Lundell et al. , 2007, 2009).

Присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца, по-видимому, является отличительной особенностью фекалий младенцев, вскармливаемых грудью, по сравнению с фекалиями младенцев на искусственном вскармливании (Borderon et al., 1996; Adlerberth et al. , 2006; Хименес и др. , 2008). В этом контексте обильное присутствие этого вида во всех образцах молока и фекалий, протестированных в этом исследовании (данные не показаны) (Jiménez et al. , 2008), может объяснить, по крайней мере частично, почему все младенцы оставались здоровыми на протяжении всего периода. период обучения, а также в последующие годы. Действительно, ЦНС, обеспечиваемая грудным молоком, может быть особенно полезной для уменьшения приобретения нежелательных патогенов младенцами, находящимися в больничной среде.Было высказано предположение, что S. epidermidis и другие ЦНС могут выполнять пробиотическую функцию, предотвращая колонизацию хозяина более серьезными патогенами, такими как S. aureus (Otto et al. , 2009). Фактически, некоторые штаммы S. epidermidis , которые ингибируют колонизацию in vivo S. aureus , были постулированы в качестве будущей стратегии по искоренению такого патогена с поверхностей слизистых оболочек (Iwase et al. , 2010; Park, Iwase и Лю 2011).

В заключение, высокий уровень фекального носительства S. aureus наблюдался среди здоровых младенцев в этом исследовании, включая штаммы MRSA. Было выявлено четыре случая передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко, что подчеркивает способность этого микроорганизма передаваться этим путем и закрепляться в кишечной микробиоте младенца. В связи с этим важно отметить, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять последствия или возможную роль этой микробной передачи от матери к ребенку.Дальнейшие исследования должны быть сосредоточены на влиянии этой ранней кишечной колонизации S. aureus у младенцев (включая колонизацию изолятами MRSA) на правильное развитие их иммунной системы, эволюцию колонизации S. aureus в течение первых лет жизни младенца и влияние на создание других бактерий кишечного микробиома.

Мы выражаем признательность за исправление текста, выполненное Ф. Руис-Ларреа.

ФИНАНСИРОВАНИЕ

Эта работа была частично поддержана проектом SAF2012–35474 Министерства экономики и конкуренции Испании и Европейского фонда де Десарролло (FEDER).Даниэль Бенито имеет докторскую стипендию FPI от Министерства экономики и конкуренции Испании, а К. Лозано финансируется проектом SAF2012–35474.

Конфликт интересов . Не существует в связи с этой рукописью.

ССЫЛКИ

Адлерберт

I

Линдберг

E

Аберг

N

et al.

Пониженная энтеробактериальная и повышенная стафилококковая колонизация кишечника младенцев: влияние гигиенического образа жизни

Педиатр Res

2006

59

96

101

Баллард

О

Морроу

AL

Состав грудного молока: питательные вещества и биоактивные факторы

Pediatr Clin N Am

2013

60

49

74

Бенито

D

Лозано

C

Gómez-Sanz

E

et al.

Обнаружение метициллин-чувствительных штаммов Staphylococcus aureus ST398 и ST133 в кишечной микробиоте здоровых людей в Испании

Microb Ecol

2013

66

105

11

Бхалла

A

Арон

DC

Донски

CJ

Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S.aureus на коже госпитализированных пациентов

BMC Инфекция Dis

2007

7

105

Björkstén

B

Сепп

E

Julge

K

et al.

Развитие аллергии и микрофлора кишечника на первом году жизни

J Allergy Clin Immunol

2001

108

516

20

Borderon

JC

Lionnet

C

Rondeau

C

et al.

Текущие аспекты фекальной флоры новорожденных без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки

Патол Биол

1996

44

416

22

Буржуа-Николаос

N

Люсет

JC

Daubié

C

et al.

Колонизация материнского влагалища Staphylococcus aureus и приобретение новорожденного при родах

Paediatr Perinat Ep

2010

24

488

91

Чо

Я

Blaser

MJ

Микробиом человека: на стыке здоровья и болезни

Nat Rev Genet

2012

13

260

70

Институт стандартов клинической лаборатории

Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать два информационных приложения M100-S24

2014

Уэйн, Пенсильвания, США

CLSI

Cucarella

C

Солано

C

Valle

J

et al.

Bap, поверхностный белок Staphylococcus aureus , участвующий в образовании биопленок

Дж Бактериол

2001

183

2888

96

Delgado

S

Гарсия

П

Фернандес

L

et al.

Характеристика штаммов Staphylococcus aureus , вызывающих мастит у человека и крупного рогатого скота

FEMS Иммунол Мед Микрофон

2011

62

225

35

Deurenberg

RH

Rijnders

MI

Себастьян

S

et al.

Staphylococcus aureus клоноспецифические маркеры коллаген-адгезин и токсин 1 синдрома токсического шока различают мультилокусные последовательности, типирующие клональные комплексы в пределах spa клональных комплексов

Диагностика Micr Infec Dis

2009

65

116

122

Домингес

E

Саразага

M

Торрес

C

Устойчивость к антибиотикам у изолятов Staphylococcus , полученных из образцов фекалий здоровых детей

J Clin Microbiol

2002

40

2638

41

Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (EUCAST)

Таблицы контрольных точек для интерпретации MIC и диаметров зон Версия 4.0 , январь 2014

Европейское общество клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (ESCMID)

Фернандес

L

Langa

S

Мартин

V

et al.

Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях

Pharmacol Res

2013

69

1

10

Gries

DM

Земзарс

TF

Gibson

KA

et al.

Пилотное исследование по оценке частоты носительства и путей заражения Staphylococcus aureus здоровыми младенцами

Am J Infect Control

2009

37

598

600

Harastani

HH

Арадж

GF

Токаджян

ST

Молекулярные характеристики золотистого стафилококка , выделенного из крупной больницы в Ливане

Int J Заражение Dis

2014

19

33

8

Хармсен

D

Клаус

H

Witte

W

et al.

Типирование метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в условиях университетской больницы с использованием нового программного обеспечения для spa повторное определение и управление базой данных

J Clin Microbiol

2003

41

5442

8

Hunt

км

Preuss

J

Nissan

C

et al.

Олигосахариды грудного молока способствуют росту стафилококков

Приложение Environ Microb

2012

78

4763

70

Ивасе

Т

Уэхара

Y

Синдзи

H

et al.

Staphylococcus epidermidis sp ингибирует Staphylococcus aureus образование биопленок и колонизацию в носу

Природа

2010

465

346

9

Жарро

S

Mougel

C

Тиулуза

J

et al.

Взаимосвязь между Staphylococcus aureus генетическими фоновыми факторами вирулентности, agr группами (аллелями) и заболеванием человека

Инфекционный иммунитет

2002

70

631

41

Джерниган

JA

Тяга

AL

Цветы

L

et al.

Распространенность и факторы риска колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus на момент госпитализации

Инфекция Cont Hosp Ep

2003

24

409

14

Хименес

E

Delgado

S

Мальдонадо

A

et al.

Staphylococcus epidermidis : отличительный признак фекальной микробиоты грудных детей

BMC Microbiol

2008

8

143

Хименес-Трюке

N

Тедески

S

Saye

EJ

et al.

Взаимоотношения между матерью и новорожденным Staphylococcus aureus колонизация

Педиатрия

2012

129

1252

9

Klotz

M

Циммерманн

S

Оппер

S

et al.

Возможный риск повторной колонизации метициллин-резистентным Staphylococcus aureus (MRSA) через фекальную передачу

Инт Дж. Хиг Энвир Хил

2005

208

401

5

Лешем

Е

Мааян-Мецгер

A

Rahav

G

et al.

Передача Staphylococcus aureus от матери новорожденным

Pediatr Infect Dis J

2012

31

360

3

Линдберг

E

Адлерберт

I

Hesselmar

B

et al.

Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца

J Clin Microbiol

2004

42

530

4

Лозано

C

Gómez-Sanz

E

Бенито

D

et al.

Staphylococcus aureus носительство в носу, признаки вирулентности, механизмы устойчивости к антибиотикам и генетические линии у здоровых людей в Испании, с обнаружением штаммов CC398 и CC97

Int J Med Microbiol

2011

301

500

5

Lundell

AC

Адлерберт

Линдберг

E

et al.

Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus

Clin Exp Allergy

2007

37

62

71

Lundell

AC

Хессельмар

B

Nordström

I

et al.

Высокие уровни циркулирующего иммуноглобулина А у младенцев связаны с кишечным токсигенным Staphylococcus aureus и меньшей частотой экземы

Clin Exp Allergy

2009

39

662

70

Мартин

Р

Langa

S

Reviriego

C

et al.

Комменсальная микрофлора грудного молока: новые перспективы пищевой бактериотерапии и пробиотиков

Trends Food Sci Tech

2004

15

121

7

Масюк

H

Копрон

К

Grumann

D

et al.

Ассоциация рецидивирующего фурункулеза с лейкоцидином Пантон-валентина и генетическим фоном Staphylococcus aureus

J Clin Microbiol

2010

48

1527

35

Матуссек

А

Taipalensuu

J

Einemo

IM

et al.

Передача Staphylococcus aureus от сотрудников родильного отделения новорожденным, раскрытая через spa , набрав

Am J Infect Control

2007

35

122

5

Mégevand

C

Gervaix

A

Heininger

U

et al.

Молекулярная эпидемиология колонизации носа метициллин-чувствительными Staphylococcus aureus у детей в Швейцарии

Clin Microbiol Infec

2010

16

1414

20

Мурчан

S

Кауфманн

ME

Deplano

A

et al.

Гармонизация протоколов гель-электрофореза в импульсном поле для эпидемиологического типирования штаммов метициллин-резистентных Staphylococcus aureus: единый подход, разработанный консенсусом в 10 европейских лабораториях, и его применение для отслеживания распространения родственных штаммов

J Clin Microbiol

2003

41

1574

85

Отто

М.

Staphylococcus epidermidis ; «случайный» патоген

Nat Rev Microbiol

2009

7

555

67

Парк

Б

Ивасе

Т

Лю

GY

Интраназальное введение S. epidermidis предотвращает колонизацию метициллин-резистентным Staphylococcus aureus у мышей

Plos One

2011

6 (10)

e25880

Перес

PF

Доре

Дж

Leclerc

M

et al.

Бактериальный импринтинг иммунной системы новорожденных: уроки материнских клеток?

Педиатрия

2007

119

e724

32

Сабат

А

Kosowska

K

Poulsen

K

et al.

Две аллельные формы гена ауреолизина ( aur ) в пределах Staphylococcus aureus

Инфекционный иммунитет

2000

68

973

6

Шаумбург

F

Кёк

R

Mellmann

A

et al.

Динамика численности метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus в Германии за 6-летний период

J Clin Microbiol

2012

50

3186

92

Магазин

Б

Матема

В

Alcabes

P

et al.

Распространенность групп специфичности agr среди штаммов Staphylococcus aureus , колонизирующих детей и их опекунов

J Clin Microbiol

2003

41

456

9

Сим

К

Пауэлл

E

Shaw

AG

et al.

Микробиота желудочно-кишечного тракта новорожденных: основа здоровья будущего?

Arch Dis Child-Fetal

2013

98

362

64

Удо

EE

Аль-Свейл

N

Норонья

BC

Хромосомное местоположение гена mupA в Staphylococcus aureus , экспрессирующем высокий уровень устойчивости к мупироцину

J Антимикробный препарат Chemoth

2003

51

1283

6

Uhlemann

AC

Отто

M

Lowy

FD

et al.

Эволюция метициллин-резистентности, связанной с населением и здравоохранением Staphylococcus aureus

Заразить Genet Evol

2014

21

563

74

Ван Белкум

А

Меллес

DC

Nouwen

J

et al.

Коэволюционные аспекты колонизации человека и инфицирования Staphylococcus aureus

Заразить Genet Evol

2009

9

32

47

Фургон Wamel

WJ

Rooijakkers

SH

Ruyken

M

et al.

Модуляторы врожденного иммунитета, стафилококковый ингибитор комплемента и белок, ингибирующий хемотаксис Staphylococcus aureus , расположены на бета-гемолизин-превращающих бактериофагах

Дж Бактериол

2006

188

1310

5

Vautor

E

Абадие

G

Pont

A

et al.

Оценка присутствия гена bap в изолятах Staphylococcus aureus , выделенных от людей и животных

Vet Microbiol

2008

127

407

11

Витте

Вт

Стромменгер

B

Stanek

C

et al.

Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ST398 у людей и животных, Центральная Европа

Emerg Infect Dis

2007

13

255

8

Характеристика штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из фекалий здоровых новорожденных, и потенциальных микробных передач от матери ребенку при грудном вскармливании | FEMS Microbiology Ecology

Двадцать одна женщина и их соответствующие дети-одиночки участвовали в этом исследовании, предоставив образцы грудного молока и фекалий (на 7, 14 и 35 дни после рождения), соответственно, используемые для выздоровления Staphylococcus aureus .Цель состояла в том, чтобы отследить носительство S. aureus в молоке и детских фекалиях пар мать-младенец и определить генетические линии изолятов, их потенциальные клональные отношения и их содержание в кластере устойчивости к противомикробным препаратам, вирулентности и иммунного уклонения гены. Молекулярная характеристика была выполнена с помощью ПЦР и секвенирования. Клональные отношения между изолятами матери и ребенка определяли с помощью типирования spa , мультилокусного типирования последовательностей (MLST) и гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE). Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов). Из 41 извлеченных S. aureus 18 были метициллин-устойчивыми (MRSA) и 23 метициллин-чувствительными (MSSA). Среди S. aureus было обнаружено двенадцать типов differentes spa и восемь типов последовательностей. Преобладающими клональными комплексами были CC5 (43,9%) и CC30 (36,6%). Штаммы MRSA показали профиль множественной лекарственной устойчивости, 65.2% штаммов MSSA содержали ген токсина tsst-1 , а 26,8% всех штаммов несли ген cna . Потенциальная передача S. aureus от матери ребенку была продемонстрирована в четырех случаях с помощью типирования spa , MLST и PFGE (передача t322 / ST5 / CC5-PFGE-A, t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C). Грудное вскармливание, по-видимому, способствует ранней кишечной колонизации S. aureus у новорожденных, что может повлиять на развитие иммунной системы.

ВВЕДЕНИЕ

Ранняя жизнь, по-видимому, является решающим периодом для правильного установления микробиоты кишечника с краткосрочными, среднесрочными и долгосрочными последствиями для здоровья хозяина (Sim et al. , 2013). На этом жизненном этапе вертикальная передача микробов от матери ребенку обычно играет ключевую роль в начальной колонизации кишечника новорожденного (Cho and Blaser 2012). Хотя существует множество исследований потенциальной передачи этих бактерий, наиболее часто участвующих в неонатальном сепсисе (например,грамм. Streptococcus agalactiae , Escherichia coli ), данные о других бактериях, которые могут иметь эпидемиологическое значение в обществе, таких как Staphylococcus aureus , немногочисленны (Bourgeois-Nicolaos et al. , 2010; Delgado et al. , 2011; Хименес-Трук и др. , 2012; Лешем и др. , 2012).

Staphylococcus aureus — это вид, обычно встречающийся в составе нормальной микробиоты человека, в основном в ротоглотке, носу и коже, хотя его также можно найти как часть микробиоты кишечника (Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Benito и другие., 2013) как здоровых, так и госпитализированных хозяев. Золотистый стафилококк — чрезвычайно универсальный условно-патогенный микроорганизм с множеством механизмов, способных вызывать заболевание и обходить иммунную защиту. Следовательно, заселение доношенных новорожденных этим видом может увеличить риск инфицирования в раннем возрасте (van Belkum et al. , 2009). Тем не менее, в других исследованиях сообщается, что перинатальная колонизация S. aureus может иметь положительный эффект на развитие иммунной системы новорожденных (Lundell et al., 2007).

Staphylococcus aureus может содержать или приобретать различные детерминанты устойчивости, и среди них приобретение гена mecA особенно актуально, поскольку он придает устойчивость к метициллину и большинству бета-лактамов. Метициллин-устойчивый S. aureus (MRSA) может поражать как госпитализированных (HA-MRSA), так и местных (CA-MRSA) пациентов. С другой стороны, S. aureus может продуцировать большое количество факторов вирулентности, которые могут усугубить клинический исход стафилококковых инфекций (Jarraud et al., 2002). Некоторые из наиболее важных факторов вирулентности — лейкоцидин Пантона-Валентайна (PVL), токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), различные гемолизины, эксфолиатины, энтеротоксины и другие факторы вирулентности, которые способствуют клеточной инвазии, росту бактерий и уклонению от иммунитета (Sabat и др. , 2000; Cucarella и др. , 2001; Jarraud и др. , 2002; van Wamel и др. , 2006; Витте и др. , 2007).

В последнее время возник особый интерес к генетическим линиям S.aureus , которые циркулируют в разных средах, чтобы отслеживать их эволюцию в разных нишах и знать потенциальные первоисточники. В этом смысле кластер иммунного уклонения (IEC) может быть важным маркером, разрешающим S . aureus , чтобы избежать действия некоторых компонентов врожденной иммунной системы человека. Изоляты, адаптированные для животных-хозяев, часто не имеют генов системы IEC (Benito et al. , 2013).

В предыдущем исследовании нашей группы оценивалось культивируемое бактериальное разнообразие молока и фекалий 16 кормящих матерей и их младенцев, находящихся на грудном вскармливании, соответственно (Jiménez et al., 2008). Выделенные изолятов S. epidermidis и энтерококков были полностью охарактеризованы (Jiménez et al. , 2008). Кроме того, изолятов S. aureus можно было выделить из некоторых из этих пар мать-младенец, но они не были охарактеризованы. Целью этого исследования было, во-первых, проследить носительство S. aureus в образцах молока и детских фекалий, предоставленных 21 парой мать-ребенок (включая 16 из предыдущего исследования и 5 дополнительных, привлеченных в этом исследовании). и, позднее, для определения генетических линий изолятов, потенциальных клональных взаимоотношений между этими изолятами, полученных в одной и той же паре мать-младенец, и их содержания в генах устойчивости к противомикробным препаратам, а также в генах вирулентности и IEC.

МЕТОДЫ

Сборник образцов

Всего в исследовании участвовала 21 женщина и их соответствующие дети-одиночки, которые соответствовали следующим характеристикам: (a) здоровые женщины с нормальной доношенной беременностью; (б) вагинальные роды; (c) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит, и отсутствие использования антибиотиков во время родов; и (d) младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании. Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическими комитетами больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания) и больницы Clínico San Carlos (Мадрид, Испания).Женщины и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий соответственно на 7, 14 и 35 дни после рождения. Образцы молока собирали в стерильных условиях в стерильную пробирку путем ручного сцеживания с использованием стерильных перчаток. Раньше соски и ареола молочной железы промывались стерильной водой с мылом и пропитывались хлоргексидином (Cristalmina, Salvat, Барселона, Испания). Первые капли (~ 500 мкл) были отброшены. Образцы фекалий (~ 5 г) собирали в отдельные стерильные контейнеры для фекалий.Все образцы хранились при 4ºC до доставки в лабораторию (максимум 12 часов) и сразу же обрабатывались.

Процедуры отбора образцов

изолятов S. aureus

Разведения образцов высевали на две селективные среды: агар Байрда – Паркера и агар Колумбия – Налидиксовая кислота (BioMerieux, Marcy l Etoile, Франция). От 5 до 10 репрезентативных изолятов, морфология колоний и другие фенотипические характеристики (форма клеток, окрашивание по Граму, активность каталазы и оксидазы) были совместимы с таковыми для стафилококков (включая, по крайней мере, одного представителя каждой морфологии колонии), были отобраны из каждого питательная среда, выращенная в бульоне BHI и хранящаяся при -80ºC в присутствии глицерина (30%, об. / об.).Все изоляты были идентифицированы до видового уровня с помощью метода мультиплексной ПЦР на основе генов dnaJ (Jiménez et al. , 2008), и идентификация была позже подтверждена с помощью MALDI-TOF (VITEK MS, BioMerieux). Впоследствии в это исследование были включены все изоляты, которые были идентифицированы как S. aureus либо из образцов молока, либо из фекалий. Присутствие гена nuc было также изучено для дальнейшего подтверждения изолятов S. aureus (Lozano et al., 2011).

Молекулярное типирование изолятов

Молекулярная характеристика изолятов S. aureus была выполнена различными молекулярными методами. Было проведено типирование Spa (Harmsen et al. , 2003) и полученные последовательности проанализированы с использованием программного обеспечения Ridom Staph Type версии 1.5.21 (Ridom GmbH). Определение аллотипов agr — дополнительных регуляторных локусов генов — выполняли с помощью двух мультиплексных ПЦР (Shopsin et al., 2003) для всех изолятов. Мультилокусное типирование последовательностей (MLST) было также выполнено для одного представителя каждого типа spa , обнаруженного в этом исследовании, для определения типа последовательности (ST) и клонального комплекса (CC) изолятов (www.saureus.mlst.net).

Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE)

Когда аналогичные типы spa были идентифицированы среди изолятов, полученных от данной матери и ее соответствующего ребенка (и, следовательно, предполагая потенциальную передачу от матери ребенку), анализ клонального родства был выполнен PFGE (Murchan и другие., 2003) тотальной ДНК, расщепленной эндонуклеазой Sma I (New England Biolabs). Гель готовили на 1,8% агаре и прогоняли в течение 22 часов при 6 В см –1 , используя время импульса от 5 до 50 с. Электрофорез проводили в системе CHEF DR-II (Bio-Rad). Стандартный ДНК-маркер (Lambda Ladder PFG Marker, New England Biolab) был включен в гель.

Тестирование чувствительности и выявление генов устойчивости к противомикробным препаратам

Тестирование чувствительности проводилось методом диско-диффузионного агара для 17 противомикробных препаратов (пенициллин, оксациллин, цефокситин, эритромицин, клиндамицин, ципрофлоксацин, гентамицин, стрептомицин, канамицин, тобрамицин, тетрациклино-маликомицин, сульфаметамицин – мантоломициклин, хлорамприциклин, хлорамприциклин, хлорамприциклин, хлорамприптолид). фузидиевая кислота) в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST (CLSI 2014; EUCAST 2014).Кроме того, был проведен D-тест для выявления индуцибельной устойчивости к клиндамицину (CLSI 2014).

Наличие 25 генов устойчивости [ mec (A) , blaZ , tet (M) , tet (K) , tet (L) , tet (O) , erm (A) , erm (B) , erm (C) , erm (F) , erm (T) , msr (A) , msr (B) , mph ( C) , lnu (A) , lnu (B) , vga (A) , ant (4 ) -Ia , aph (3 ) -IIIa , aac (6 ) Ie-aph (2 ) , aad (A) , aad (E) , str , fus (B) и fus (C) ] в S.aureus исследовали с помощью ПЦР (Удо, Аль-Свейл и Норонха, 2003; Лозано, и др., , 2011; Бенито, и др., , 2013).

Обнаружение генов вирулентности

Анализ профиля вирулентности был проведен с помощью ПЦР для выявления следующих генетических детерминант: лейкоцидин Пантона-Валентайна ( lukF / lukS- PV ) , токсин синдрома токсического шока ( tsst-1 ) и эксфолиативный токсин A ( eta ), B ( etd ) и D ( etd ).Кроме того, гены, кодирующие лейкоцидины DE ( lukD-lukE ) и M ( lukM ), ауреолизин ( aur ), ассоциированный с биопленкой белок ( bap) и коллаген-связывающий белок ( cna ). ) также были изучены с помощью ПЦР (Sabat et al. , 2000; Cucarella et al. , 2001; Witte et al. , 2007; Lozano et al. , 2011; Benito et al. , 2013).

Кластер иммунного уклонения

Пять генов, составляющих IEC ( scn , chp, sak и sea или sep ), были изучены с помощью ПЦР.В зависимости от наличия или отсутствия этих генов и их различных комбинаций все изоляты S. aureus были классифицированы на семь типов IEC в соответствии с ранее описанными схемами (van Wamel et al. , 2006).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Изоляция

S. aureus

Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов) (Таблица 1).Более конкретно, S. aureus был получен в образцах фекалий двух младенцев на 7-й день, трех — на 14-й день и десяти — на 35-й день после рождения (таблица 2). Золотистый стафилококк был обнаружен как в молоке матери, так и в фекалиях младенца в шести из исследованных случаев. Выявлено четыре потенциальных случая передачи инфекции от матери ребенку при грудном вскармливании (таблица 1).

Таблица 1.

Основные характеристики штаммов S. aureus , выделенных от матерей и младенцев в этом исследовании.

. Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440
Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнский MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнская MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

Таблица 1.

Основные характеристики штаммов S. aureus , полученных от матерей и младенцев в этом исследовании.

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнский MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнская MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

Таблица 2.

Staphylococcus aureus штаммов, выделенных в 12 случаях от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, согласно оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0

0 6

.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0 90.

Staphylococcus aureus штаммов, выделенных в 12 случаях от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, согласно оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.

. Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440
Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0

0 6

.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0 9689 изолятор

Молекулярный изолятор

Всего 41 S.aureus были выделены в этом исследовании от матерей и младенцев, и 18 из них были признаны MRSA, поскольку они показали устойчивость к оксациллину и цефокситину и были положительными по гену mec A. Эти изоляты MRSA были получены от 2 из 21 протестированной матери (9,6%) и от 5 из 21 ребенка (23,8%). Остальные 23 изолята были чувствительны к оксациллину и цефокситину, не имели гена mecA и рассматривались как MSSA.

Результаты полной характеристики всех изолятов MRSA и MSSA, выделенных в этом исследовании, показаны в таблице 1.Было обнаружено двенадцать различных типов спа (t002, t012, t015, t021, t122, t136, t148, t166, t322, t440, t5204 и новый тип spa , зарегистрированный как t10664 в Ridom Spa Server), и большинство Частые agr аллотипов были II и III.

Изоляты Staphylococcus aureus принадлежали к восьми различным типам последовательностей (ST5, ST8, ST15, ST30, ST34, ST45, ST1434 и ST1869), включенным в шесть различных клональных комплексов (CC5, CC8, CC15, CC30, CC45 и CC72).Изоляты MRSA были типированы как ST5 ( spa -322 и spa -t002), отнесены к клональному комплексу CC5 и типизированы как SCC mec IV. Другие ST, идентифицированные среди MSSA, были (приписаны ST / CC): ST8 / CC8, ST15 / CC15, ST30-ST34-ST1869 / CC30, ST45 / CC45 и ST1434 / CC72. Преобладающими клональными комплексами были CC5 и CC30, они составляли 43,9 и 36,6% от общего числа изолятов (таблица 1).

Анализ PFGE для проверки потенциального от матери ребенку

Передача S. aureus

Модель spa тип модели S.aureus от матерей и младенцев предполагают потенциальную передачу инфекции от матери к ребенку в четырех парах мать-младенец (случаи 1–4). Чтобы прояснить этот вопрос, сравнивали профили PFGE изолятов с аналогичными типами spa . Было подтверждено совместное использование клона MRSA t322 / ST5 / CC5-PFGE-A между матерями и младенцами в случаях 1 и 2. Точно так же клоны MSSA t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и MSSA t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C были общими для случая 3 и случая 4 соответственно (таблица 2, рис.1). Не было обнаружено сходства между типами spa и среди изолятов от матерей и младенцев из остальных восьми случаев.

Рисунок 1. Анализ

PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C.Сокращения. В: младенец; Мо: мама.

Рисунок 1. Анализ

PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C. Сокращения. В: младенец; Мо: мама.

Тестирование чувствительности и выявление генов устойчивости к противомикробным препаратам

Изоляты MSSA показали чувствительность к большинству протестированных противомикробных препаратов, за исключением двух изолятов, отнесенных к линиям CC30 и CC45, которые проявляли устойчивость к стрептомицину и которые содержали ген str . С другой стороны, изоляты MRSA-CC5-t322 демонстрируют фенотип множественной лекарственной устойчивости с устойчивостью к эритромицину, клиндамицину, гентамицину, тобрамицину и канамицину в дополнение к устойчивости к метициллину; эти изоляты несли erm (C) , aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia и aph (3 ) -III , и два из них также несли ген lnu (A) .В дополнение к вышеупомянутым противомикробным препаратам один изолят, типизированный как t002-ST5 / CC5, показал устойчивость к ципрофлоксацину, стрептомицину и фузидовой кислоте, содержащий гены str и fus (C) (Таблица 1).

Гены вирулентности

Различное количество факторов вирулентности было обнаружено среди 41 изолята S. aureus (таблица 1). Интересно, что 15 изолятов MSSA, принадлежащих к клональному комплексу CC30, содержали ген токсина tsst-1 (36.6%), тогда как восемь изолятов (три MRSA-CC5 и пять MSSA-CC30) несли ген эксфолиативного токсина A ( эта, ). Пять из протестированных младенцев содержали в своих фекалиях TSST-продуцирующие штаммы S. aureus клонального комплекса CC30 (в двух случаях он также был обнаружен в молоке их матерей). Гены lukD – lukE были обнаружены у 30 изолятов (73,2%), из них 18 MRSA и 12 MSSA. В общей сложности 35 изолятов содержали ген aur , и 12 были положительными по гену cna (принадлежащему в основном к клональным комплексам CC30 и CC45).Все изоляты были отрицательными на присутствие генов lukF / lukS- PV, lukM, bap, etb или etd (таблица 1).

Анализ генов IEC

Только шесть изолятов S. aureus MSSA-CC30 из 41 исследованных S. aureus не содержали гены IEC. Среди остальных изолятов были получены следующие типы IEC (тип IEC / CC): A / CC30, B / CC30-CC45-CC8-CC72, C / CC15, E / CC30-CC5 и F / CC5-CC45. Типы IEC D и G не были обнаружены ни в одном из изолятов (таблица 1).

Персистентность

клонов S. aureus

Один и тот же клон S. aureus был выделен от одного и того же младенца, по крайней мере, в два разных периода отбора проб, в случаях 2 и 5, что указывает на клональную персистентность. У остальных младенцев S. aureus было выделено только в одной из трех проб фекалий, полученных в течение исследуемого периода (35 дней).

ОБСУЖДЕНИЕ

Высокий уровень фекального носительства S. aureus (12 из 21 протестированного, 57%) был обнаружен среди здоровых младенцев в этом исследовании в течение первых 35 дней их жизни.Штаммы MRSA были обнаружены у 5 из этих 12 младенцев, что составляет 23,8% от общего числа протестированных младенцев. Ни у одного из MRSA-положительных младенцев, выявленных в этом исследовании, не развилась инфекция MRSA в течение следующих 6 лет жизни (данные не показаны). В предыдущих исследованиях сообщалось о фекальном носительстве S. aureus в диапазоне от 6 до 65% у здоровых младенцев (Björkstén et al. , 2001; Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Lindberg et al. 2004) и заметно более низком MRSA. Показатели вынашивания здоровых детей и людей на момент поступления в больницу (0–5%) (Dominguez, Zarazaga and Torres, 2002; Jernigan et al., 2003), хотя зарегистрированный процент увеличился среди госпитализированных пациентов (24%) (Klotz et al. , 2005). Кроме того, предыдущее исследование показало, что колонизация кишечника младенца S. aureus была высокой в ​​течение первого месяца жизни, но уменьшалась в последующие недели (Björkstén et al. , 2001). В нашем исследовании самая высокая распространенность у младенцев была обнаружена через 35 дней после рождения. Что касается образцов молока протестированных матерей, два из 21 (9,6%) содержали MRSA, что также свидетельствует о высоком уровне носительства.

Обращает на себя внимание генетическое разнообразие типов spa , выявленных в нашем исследовании (12 различных типов spa , включая новый). Более одной трети штаммов показали типов spa , которые можно отнести к клональному комплексу CC30, линии, которая, по-видимому, успешно колонизирует людей и показала большую повсеместность (Deurenberg et al. , 2009). Этот клональный комплекс, по-видимому, связан с внебольничными инфекциями 9 . Наши штаммы MSSA CC30 показали небольшое количество генов устойчивости к противомикробным препаратам, но замечательный профиль генов вирулентности; Фактически, более 90% штаммов MSSA-CC30 содержат ген токсина синдрома токсического шока ( tsst-1 ).Эта связь между MSSA-CC30 и tsst-1 наблюдалась в других исследованиях (Deurenberg et al. 2009), но в меньших процентах, чем в нашем исследовании (Mégevand et al. , 2010; Lozano et al. , 2011). Ранняя кишечная колонизация изолятами S. aureus , продуцирующими токсины с суперантигенной функцией (TSST-1), по-видимому, способствует системным ответам IgA у новорожденных, которые отрицательно коррелируют с развитием аллергии (Lundell et al. , 2009).

Примерно одна треть из штаммов S. aureus была типирована как MRSA-t322-ST5-CC5, с agr -II и SCC mec IV. Эти штаммы показали типичный профиль HA-MRSA (Schaumburg et al. , 2012), продемонстрировали множественную лекарственную устойчивость (макролиды, линкозамины и аминоглюкозиды) и различные гены устойчивости к противомикробным препаратам, включая erm (C), aac (6 ). -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia и aph (3 ) -III, а также lnu (A) в двух из них .Обнаружение IEC типа F или E во всех этих штаммах дополнительно подтверждает их профиль HA-MRSA (Benito et al. , 2013).

Интересно, что в одном образце фекалий был обнаружен один штамм MSSA t148 / ST1434-CC72; эта клада S aureus ранее была связана со штаммами CA-MRSA, обнаруженными в азиатских странах (Harastani, Araj and Tokajian, 2014), но в нашем случае у штамма CC72 отсутствовали детерминанты устойчивости к метициллину. Точно так же штамм MSSA, типизированный как t10664 / ST8-CC8, не обладал генами токсина PVL и, следовательно, не демонстрировал типичный профиль CA-MRSA (Uhlemann et al., 2014).

Все наши штаммы S. aureus были PVL-отрицательными, а luk-M отрицательными. Более того, ни один из них не содержал ген bap , кодирующий ассоциированный с биопленкой белок (Cucarella et al. , 2001). Ранее предполагалось, что распространенность гена bap среди штаммов S. aureus очень низкая (Vautor et al. , 2008). Кроме того, восемь штаммов (19,5%) несли ген eta , кодирующий эксфолиативный токсин А, и они были отнесены к клональным комплексам CC5 и CC30.Сообщалось, что эти штаммы вызывают стафилококковый синдром ошпаренной кожи и импетиго (Masiuk et al. , 2010). Кроме того, 73,2% наших штаммов несли гены lukD – lukE , которые кодируют лейкотоксин, который более распространен в HA-MRSA (Uhlemann et al. , 2014). Двенадцать штаммов CC8, CC30 или CC45 содержат ген cna , кодирующий коллаген-связывающий белок, в основном связанный с приобретенным сообществом MRSA или MSSA (Deurenberg et al. , 2009).

Анализ

PFGE выявил четыре случая возможной передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко (рис. 1). Интересно, что один и тот же клон использовался в образцах молока и фекалий младенцев в двух разных случаях (случаи 1 и 2). Некоторые авторы предполагают, что колонизированная кожа родителей является источником большей части S. aureus , который колонизирует младенцев или младенческую микробиоту кишечника (Gries et al. , 2009), в то время как другие предполагают, что сотрудники родильного отделения могут быть еще одним источником заражения. передача между младенцами и матерями (Matussek et al., 2007). Кроме того, есть исследования, которые постулируют, что увеличение частоты появления S. aureus на коже госпитализированных пациентов может быть потенциальным источником, способствующим внутрибольничной передаче (Bhalla, Aron and Donskey 2007). В нашем исследовании клон t322-CC5, который был обнаружен в двух случаях потенциальной передачи вируса от матери ребенку, мог иметь больничное происхождение, поскольку он обладал типичными характеристиками HA-MRSA. Младенцы случаев 1 и 2 родились в одной больнице, но с разницей в 6 месяцев.

Грудное молоко представляет собой сложную биологическую жидкость, специфичную для каждого вида, адаптированную для удовлетворения пищевых потребностей быстро растущего младенца; Кроме того, он обучает иммунную систему младенца и обеспечивает определенную степень защиты от патогенов. Эти эффекты отражают синергетическое действие многих биоактивных молекул (Ballard et al. , 2013). Кроме того, недавние исследования показали, что грудное молоко является постоянным источником бактерий для кишечника младенца, а исследования как в культуре, так и в микробиоме показали, что стафилококки, в основном ЦНС, составляют доминирующие бактерии в этой биологической жидкости (Fernández et al. ., 2013). Интересно, что и S. aureus , и S. epidermidis относятся к микроорганизмам с самой высокой способностью метаболизировать олигосахариды грудного молока (Hunt et al. , 2012). Различные исследования показывают, что некоторые бактерии, присутствующие в кишечнике матери, включая стафилококки, могут достигать молочной железы на поздних сроках беременности и в период лактации через механизм, включающий моноциты кишечника (Martin et al. , 2004; Pérez et al. , 2007) .Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , включая токсигенные изоляты, влияет на уровень растворимого CD14 или IgA, циркулирующих в плазме новорожденных, что влияет на развитие иммунной системы и риск развития аллергии (Lundell et al. , 2007, 2009).

Присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца, по-видимому, является отличительной особенностью фекалий младенцев, вскармливаемых грудью, по сравнению с фекалиями младенцев на искусственном вскармливании (Borderon et al., 1996; Adlerberth et al. , 2006; Хименес и др. , 2008). В этом контексте обильное присутствие этого вида во всех образцах молока и фекалий, протестированных в этом исследовании (данные не показаны) (Jiménez et al. , 2008), может объяснить, по крайней мере частично, почему все младенцы оставались здоровыми на протяжении всего периода. период обучения, а также в последующие годы. Действительно, ЦНС, обеспечиваемая грудным молоком, может быть особенно полезной для уменьшения приобретения нежелательных патогенов младенцами, находящимися в больничной среде.Было высказано предположение, что S. epidermidis и другие ЦНС могут выполнять пробиотическую функцию, предотвращая колонизацию хозяина более серьезными патогенами, такими как S. aureus (Otto et al. , 2009). Фактически, некоторые штаммы S. epidermidis , которые ингибируют колонизацию in vivo S. aureus , были постулированы в качестве будущей стратегии по искоренению такого патогена с поверхностей слизистых оболочек (Iwase et al. , 2010; Park, Iwase и Лю 2011).

В заключение, высокий уровень фекального носительства S. aureus наблюдался среди здоровых младенцев в этом исследовании, включая штаммы MRSA. Было выявлено четыре случая передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко, что подчеркивает способность этого микроорганизма передаваться этим путем и закрепляться в кишечной микробиоте младенца. В связи с этим важно отметить, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять последствия или возможную роль этой микробной передачи от матери к ребенку.Дальнейшие исследования должны быть сосредоточены на влиянии этой ранней кишечной колонизации S. aureus у младенцев (включая колонизацию изолятами MRSA) на правильное развитие их иммунной системы, эволюцию колонизации S. aureus в течение первых лет жизни младенца и влияние на создание других бактерий кишечного микробиома.

Мы выражаем признательность за исправление текста, выполненное Ф. Руис-Ларреа.

ФИНАНСИРОВАНИЕ

Эта работа была частично поддержана проектом SAF2012–35474 Министерства экономики и конкуренции Испании и Европейского фонда де Десарролло (FEDER).Даниэль Бенито имеет докторскую стипендию FPI от Министерства экономики и конкуренции Испании, а К. Лозано финансируется проектом SAF2012–35474.

Конфликт интересов . Не существует в связи с этой рукописью.

ССЫЛКИ

Адлерберт

I

Линдберг

E

Аберг

N

et al.

Пониженная энтеробактериальная и повышенная стафилококковая колонизация кишечника младенцев: влияние гигиенического образа жизни

Педиатр Res

2006

59

96

101

Баллард

О

Морроу

AL

Состав грудного молока: питательные вещества и биоактивные факторы

Pediatr Clin N Am

2013

60

49

74

Бенито

D

Лозано

C

Gómez-Sanz

E

et al.

Обнаружение метициллин-чувствительных штаммов Staphylococcus aureus ST398 и ST133 в кишечной микробиоте здоровых людей в Испании

Microb Ecol

2013

66

105

11

Бхалла

A

Арон

DC

Донски

CJ

Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S.aureus на коже госпитализированных пациентов

BMC Инфекция Dis

2007

7

105

Björkstén

B

Сепп

E

Julge

K

et al.

Развитие аллергии и микрофлора кишечника на первом году жизни

J Allergy Clin Immunol

2001

108

516

20

Borderon

JC

Lionnet

C

Rondeau

C

et al.

Текущие аспекты фекальной флоры новорожденных без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки

Патол Биол

1996

44

416

22

Буржуа-Николаос

N

Люсет

JC

Daubié

C

et al.

Колонизация материнского влагалища Staphylococcus aureus и приобретение новорожденного при родах

Paediatr Perinat Ep

2010

24

488

91

Чо

Я

Blaser

MJ

Микробиом человека: на стыке здоровья и болезни

Nat Rev Genet

2012

13

260

70

Институт стандартов клинической лаборатории

Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать два информационных приложения M100-S24

2014

Уэйн, Пенсильвания, США

CLSI

Cucarella

C

Солано

C

Valle

J

et al.

Bap, поверхностный белок Staphylococcus aureus , участвующий в образовании биопленок

Дж Бактериол

2001

183

2888

96

Delgado

S

Гарсия

П

Фернандес

L

et al.

Характеристика штаммов Staphylococcus aureus , вызывающих мастит у человека и крупного рогатого скота

FEMS Иммунол Мед Микрофон

2011

62

225

35

Deurenberg

RH

Rijnders

MI

Себастьян

S

et al.

Staphylococcus aureus клоноспецифические маркеры коллаген-адгезин и токсин 1 синдрома токсического шока различают мультилокусные последовательности, типирующие клональные комплексы в пределах spa клональных комплексов

Диагностика Micr Infec Dis

2009

65

116

122

Домингес

E

Саразага

M

Торрес

C

Устойчивость к антибиотикам у изолятов Staphylococcus , полученных из образцов фекалий здоровых детей

J Clin Microbiol

2002

40

2638

41

Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (EUCAST)

Таблицы контрольных точек для интерпретации MIC и диаметров зон Версия 4.0 , январь 2014

Европейское общество клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (ESCMID)

Фернандес

L

Langa

S

Мартин

V

et al.

Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях

Pharmacol Res

2013

69

1

10

Gries

DM

Земзарс

TF

Gibson

KA

et al.

Пилотное исследование по оценке частоты носительства и путей заражения Staphylococcus aureus здоровыми младенцами

Am J Infect Control

2009

37

598

600

Harastani

HH

Арадж

GF

Токаджян

ST

Молекулярные характеристики золотистого стафилококка , выделенного из крупной больницы в Ливане

Int J Заражение Dis

2014

19

33

8

Хармсен

D

Клаус

H

Witte

W

et al.

Типирование метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в условиях университетской больницы с использованием нового программного обеспечения для spa повторное определение и управление базой данных

J Clin Microbiol

2003

41

5442

8

Hunt

км

Preuss

J

Nissan

C

et al.

Олигосахариды грудного молока способствуют росту стафилококков

Приложение Environ Microb

2012

78

4763

70

Ивасе

Т

Уэхара

Y

Синдзи

H

et al.

Staphylococcus epidermidis sp ингибирует Staphylococcus aureus образование биопленок и колонизацию в носу

Природа

2010

465

346

9

Жарро

S

Mougel

C

Тиулуза

J

et al.

Взаимосвязь между Staphylococcus aureus генетическими фоновыми факторами вирулентности, agr группами (аллелями) и заболеванием человека

Инфекционный иммунитет

2002

70

631

41

Джерниган

JA

Тяга

AL

Цветы

L

et al.

Распространенность и факторы риска колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus на момент госпитализации

Инфекция Cont Hosp Ep

2003

24

409

14

Хименес

E

Delgado

S

Мальдонадо

A

et al.

Staphylococcus epidermidis : отличительный признак фекальной микробиоты грудных детей

BMC Microbiol

2008

8

143

Хименес-Трюке

N

Тедески

S

Saye

EJ

et al.

Взаимоотношения между матерью и новорожденным Staphylococcus aureus колонизация

Педиатрия

2012

129

1252

9

Klotz

M

Циммерманн

S

Оппер

S

et al.

Возможный риск повторной колонизации метициллин-резистентным Staphylococcus aureus (MRSA) через фекальную передачу

Инт Дж. Хиг Энвир Хил

2005

208

401

5

Лешем

Е

Мааян-Мецгер

A

Rahav

G

et al.

Передача Staphylococcus aureus от матери новорожденным

Pediatr Infect Dis J

2012

31

360

3

Линдберг

E

Адлерберт

I

Hesselmar

B

et al.

Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца

J Clin Microbiol

2004

42

530

4

Лозано

C

Gómez-Sanz

E

Бенито

D

et al.

Staphylococcus aureus носительство в носу, признаки вирулентности, механизмы устойчивости к антибиотикам и генетические линии у здоровых людей в Испании, с обнаружением штаммов CC398 и CC97

Int J Med Microbiol

2011

301

500

5

Lundell

AC

Адлерберт

Линдберг

E

et al.

Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus

Clin Exp Allergy

2007

37

62

71

Lundell

AC

Хессельмар

B

Nordström

I

et al.

Высокие уровни циркулирующего иммуноглобулина А у младенцев связаны с кишечным токсигенным Staphylococcus aureus и меньшей частотой экземы

Clin Exp Allergy

2009

39

662

70

Мартин

Р

Langa

S

Reviriego

C

et al.

Комменсальная микрофлора грудного молока: новые перспективы пищевой бактериотерапии и пробиотиков

Trends Food Sci Tech

2004

15

121

7

Масюк

H

Копрон

К

Grumann

D

et al.

Ассоциация рецидивирующего фурункулеза с лейкоцидином Пантон-валентина и генетическим фоном Staphylococcus aureus

J Clin Microbiol

2010

48

1527

35

Матуссек

А

Taipalensuu

J

Einemo

IM

et al.

Передача Staphylococcus aureus от сотрудников родильного отделения новорожденным, раскрытая через spa , набрав

Am J Infect Control

2007

35

122

5

Mégevand

C

Gervaix

A

Heininger

U

et al.

Молекулярная эпидемиология колонизации носа метициллин-чувствительными Staphylococcus aureus у детей в Швейцарии

Clin Microbiol Infec

2010

16

1414

20

Мурчан

S

Кауфманн

ME

Deplano

A

et al.

Гармонизация протоколов гель-электрофореза в импульсном поле для эпидемиологического типирования штаммов метициллин-резистентных Staphylococcus aureus: единый подход, разработанный консенсусом в 10 европейских лабораториях, и его применение для отслеживания распространения родственных штаммов

J Clin Microbiol

2003

41

1574

85

Отто

М.

Staphylococcus epidermidis ; «случайный» патоген

Nat Rev Microbiol

2009

7

555

67

Парк

Б

Ивасе

Т

Лю

GY

Интраназальное введение S. epidermidis предотвращает колонизацию метициллин-резистентным Staphylococcus aureus у мышей

Plos One

2011

6 (10)

e25880

Перес

PF

Доре

Дж

Leclerc

M

et al.

Бактериальный импринтинг иммунной системы новорожденных: уроки материнских клеток?

Педиатрия

2007

119

e724

32

Сабат

А

Kosowska

K

Poulsen

K

et al.

Две аллельные формы гена ауреолизина ( aur ) в пределах Staphylococcus aureus

Инфекционный иммунитет

2000

68

973

6

Шаумбург

F

Кёк

R

Mellmann

A

et al.

Динамика численности метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus в Германии за 6-летний период

J Clin Microbiol

2012

50

3186

92

Магазин

Б

Матема

В

Alcabes

P

et al.

Распространенность групп специфичности agr среди штаммов Staphylococcus aureus , колонизирующих детей и их опекунов

J Clin Microbiol

2003

41

456

9

Сим

К

Пауэлл

E

Shaw

AG

et al.

Микробиота желудочно-кишечного тракта новорожденных: основа здоровья будущего?

Arch Dis Child-Fetal

2013

98

362

64

Удо

EE

Аль-Свейл

N

Норонья

BC

Хромосомное местоположение гена mupA в Staphylococcus aureus , экспрессирующем высокий уровень устойчивости к мупироцину

J Антимикробный препарат Chemoth

2003

51

1283

6

Uhlemann

AC

Отто

M

Lowy

FD

et al.

Эволюция метициллин-резистентности, связанной с населением и здравоохранением Staphylococcus aureus

Заразить Genet Evol

2014

21

563

74

Ван Белкум

А

Меллес

DC

Nouwen

J

et al.

Коэволюционные аспекты колонизации человека и инфицирования Staphylococcus aureus

Заразить Genet Evol

2009

9

32

47

Фургон Wamel

WJ

Rooijakkers

SH

Ruyken

M

et al.

Модуляторы врожденного иммунитета, стафилококковый ингибитор комплемента и белок, ингибирующий хемотаксис Staphylococcus aureus , расположены на бета-гемолизин-превращающих бактериофагах

Дж Бактериол

2006

188

1310

5

Vautor

E

Абадие

G

Pont

A

et al.

Оценка присутствия гена bap в изолятах Staphylococcus aureus , выделенных от людей и животных

Vet Microbiol

2008

127

407

11

Витте

Вт

Стромменгер

B

Stanek

C

et al.

Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ST398 у людей и животных, Центральная Европа

Emerg Infect Dis

2007

13

255

8

Характеристика штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из фекалий здоровых новорожденных, и потенциальных микробных передач от матери ребенку при грудном вскармливании | FEMS Microbiology Ecology

Двадцать одна женщина и их соответствующие дети-одиночки участвовали в этом исследовании, предоставив образцы грудного молока и фекалий (на 7, 14 и 35 дни после рождения), соответственно, используемые для выздоровления Staphylococcus aureus .Цель состояла в том, чтобы отследить носительство S. aureus в молоке и детских фекалиях пар мать-младенец и определить генетические линии изолятов, их потенциальные клональные отношения и их содержание в кластере устойчивости к противомикробным препаратам, вирулентности и иммунного уклонения гены. Молекулярная характеристика была выполнена с помощью ПЦР и секвенирования. Клональные отношения между изолятами матери и ребенка определяли с помощью типирования spa , мультилокусного типирования последовательностей (MLST) и гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE). Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов). Из 41 извлеченных S. aureus 18 были метициллин-устойчивыми (MRSA) и 23 метициллин-чувствительными (MSSA). Среди S. aureus было обнаружено двенадцать типов differentes spa и восемь типов последовательностей. Преобладающими клональными комплексами были CC5 (43,9%) и CC30 (36,6%). Штаммы MRSA показали профиль множественной лекарственной устойчивости, 65.2% штаммов MSSA содержали ген токсина tsst-1 , а 26,8% всех штаммов несли ген cna . Потенциальная передача S. aureus от матери ребенку была продемонстрирована в четырех случаях с помощью типирования spa , MLST и PFGE (передача t322 / ST5 / CC5-PFGE-A, t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C). Грудное вскармливание, по-видимому, способствует ранней кишечной колонизации S. aureus у новорожденных, что может повлиять на развитие иммунной системы.

ВВЕДЕНИЕ

Ранняя жизнь, по-видимому, является решающим периодом для правильного установления микробиоты кишечника с краткосрочными, среднесрочными и долгосрочными последствиями для здоровья хозяина (Sim et al. , 2013). На этом жизненном этапе вертикальная передача микробов от матери ребенку обычно играет ключевую роль в начальной колонизации кишечника новорожденного (Cho and Blaser 2012). Хотя существует множество исследований потенциальной передачи этих бактерий, наиболее часто участвующих в неонатальном сепсисе (например,грамм. Streptococcus agalactiae , Escherichia coli ), данные о других бактериях, которые могут иметь эпидемиологическое значение в обществе, таких как Staphylococcus aureus , немногочисленны (Bourgeois-Nicolaos et al. , 2010; Delgado et al. , 2011; Хименес-Трук и др. , 2012; Лешем и др. , 2012).

Staphylococcus aureus — это вид, обычно встречающийся в составе нормальной микробиоты человека, в основном в ротоглотке, носу и коже, хотя его также можно найти как часть микробиоты кишечника (Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Benito и другие., 2013) как здоровых, так и госпитализированных хозяев. Золотистый стафилококк — чрезвычайно универсальный условно-патогенный микроорганизм с множеством механизмов, способных вызывать заболевание и обходить иммунную защиту. Следовательно, заселение доношенных новорожденных этим видом может увеличить риск инфицирования в раннем возрасте (van Belkum et al. , 2009). Тем не менее, в других исследованиях сообщается, что перинатальная колонизация S. aureus может иметь положительный эффект на развитие иммунной системы новорожденных (Lundell et al., 2007).

Staphylococcus aureus может содержать или приобретать различные детерминанты устойчивости, и среди них приобретение гена mecA особенно актуально, поскольку он придает устойчивость к метициллину и большинству бета-лактамов. Метициллин-устойчивый S. aureus (MRSA) может поражать как госпитализированных (HA-MRSA), так и местных (CA-MRSA) пациентов. С другой стороны, S. aureus может продуцировать большое количество факторов вирулентности, которые могут усугубить клинический исход стафилококковых инфекций (Jarraud et al., 2002). Некоторые из наиболее важных факторов вирулентности — лейкоцидин Пантона-Валентайна (PVL), токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), различные гемолизины, эксфолиатины, энтеротоксины и другие факторы вирулентности, которые способствуют клеточной инвазии, росту бактерий и уклонению от иммунитета (Sabat и др. , 2000; Cucarella и др. , 2001; Jarraud и др. , 2002; van Wamel и др. , 2006; Витте и др. , 2007).

В последнее время возник особый интерес к генетическим линиям S.aureus , которые циркулируют в разных средах, чтобы отслеживать их эволюцию в разных нишах и знать потенциальные первоисточники. В этом смысле кластер иммунного уклонения (IEC) может быть важным маркером, разрешающим S . aureus , чтобы избежать действия некоторых компонентов врожденной иммунной системы человека. Изоляты, адаптированные для животных-хозяев, часто не имеют генов системы IEC (Benito et al. , 2013).

В предыдущем исследовании нашей группы оценивалось культивируемое бактериальное разнообразие молока и фекалий 16 кормящих матерей и их младенцев, находящихся на грудном вскармливании, соответственно (Jiménez et al., 2008). Выделенные изолятов S. epidermidis и энтерококков были полностью охарактеризованы (Jiménez et al. , 2008). Кроме того, изолятов S. aureus можно было выделить из некоторых из этих пар мать-младенец, но они не были охарактеризованы. Целью этого исследования было, во-первых, проследить носительство S. aureus в образцах молока и детских фекалий, предоставленных 21 парой мать-ребенок (включая 16 из предыдущего исследования и 5 дополнительных, привлеченных в этом исследовании). и, позднее, для определения генетических линий изолятов, потенциальных клональных взаимоотношений между этими изолятами, полученных в одной и той же паре мать-младенец, и их содержания в генах устойчивости к противомикробным препаратам, а также в генах вирулентности и IEC.

МЕТОДЫ

Сборник образцов

Всего в исследовании участвовала 21 женщина и их соответствующие дети-одиночки, которые соответствовали следующим характеристикам: (a) здоровые женщины с нормальной доношенной беременностью; (б) вагинальные роды; (c) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит, и отсутствие использования антибиотиков во время родов; и (d) младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании. Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическими комитетами больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания) и больницы Clínico San Carlos (Мадрид, Испания).Женщины и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий соответственно на 7, 14 и 35 дни после рождения. Образцы молока собирали в стерильных условиях в стерильную пробирку путем ручного сцеживания с использованием стерильных перчаток. Раньше соски и ареола молочной железы промывались стерильной водой с мылом и пропитывались хлоргексидином (Cristalmina, Salvat, Барселона, Испания). Первые капли (~ 500 мкл) были отброшены. Образцы фекалий (~ 5 г) собирали в отдельные стерильные контейнеры для фекалий.Все образцы хранились при 4ºC до доставки в лабораторию (максимум 12 часов) и сразу же обрабатывались.

Процедуры отбора образцов

изолятов S. aureus

Разведения образцов высевали на две селективные среды: агар Байрда – Паркера и агар Колумбия – Налидиксовая кислота (BioMerieux, Marcy l Etoile, Франция). От 5 до 10 репрезентативных изолятов, морфология колоний и другие фенотипические характеристики (форма клеток, окрашивание по Граму, активность каталазы и оксидазы) были совместимы с таковыми для стафилококков (включая, по крайней мере, одного представителя каждой морфологии колонии), были отобраны из каждого питательная среда, выращенная в бульоне BHI и хранящаяся при -80ºC в присутствии глицерина (30%, об. / об.).Все изоляты были идентифицированы до видового уровня с помощью метода мультиплексной ПЦР на основе генов dnaJ (Jiménez et al. , 2008), и идентификация была позже подтверждена с помощью MALDI-TOF (VITEK MS, BioMerieux). Впоследствии в это исследование были включены все изоляты, которые были идентифицированы как S. aureus либо из образцов молока, либо из фекалий. Присутствие гена nuc было также изучено для дальнейшего подтверждения изолятов S. aureus (Lozano et al., 2011).

Молекулярное типирование изолятов

Молекулярная характеристика изолятов S. aureus была выполнена различными молекулярными методами. Было проведено типирование Spa (Harmsen et al. , 2003) и полученные последовательности проанализированы с использованием программного обеспечения Ridom Staph Type версии 1.5.21 (Ridom GmbH). Определение аллотипов agr — дополнительных регуляторных локусов генов — выполняли с помощью двух мультиплексных ПЦР (Shopsin et al., 2003) для всех изолятов. Мультилокусное типирование последовательностей (MLST) было также выполнено для одного представителя каждого типа spa , обнаруженного в этом исследовании, для определения типа последовательности (ST) и клонального комплекса (CC) изолятов (www.saureus.mlst.net).

Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE)

Когда аналогичные типы spa были идентифицированы среди изолятов, полученных от данной матери и ее соответствующего ребенка (и, следовательно, предполагая потенциальную передачу от матери ребенку), анализ клонального родства был выполнен PFGE (Murchan и другие., 2003) тотальной ДНК, расщепленной эндонуклеазой Sma I (New England Biolabs). Гель готовили на 1,8% агаре и прогоняли в течение 22 часов при 6 В см –1 , используя время импульса от 5 до 50 с. Электрофорез проводили в системе CHEF DR-II (Bio-Rad). Стандартный ДНК-маркер (Lambda Ladder PFG Marker, New England Biolab) был включен в гель.

Тестирование чувствительности и выявление генов устойчивости к противомикробным препаратам

Тестирование чувствительности проводилось методом диско-диффузионного агара для 17 противомикробных препаратов (пенициллин, оксациллин, цефокситин, эритромицин, клиндамицин, ципрофлоксацин, гентамицин, стрептомицин, канамицин, тобрамицин, тетрациклино-маликомицин, сульфаметамицин – мантоломициклин, хлорамприциклин, хлорамприциклин, хлорамприциклин, хлорамприптолид). фузидиевая кислота) в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST (CLSI 2014; EUCAST 2014).Кроме того, был проведен D-тест для выявления индуцибельной устойчивости к клиндамицину (CLSI 2014).

Наличие 25 генов устойчивости [ mec (A) , blaZ , tet (M) , tet (K) , tet (L) , tet (O) , erm (A) , erm (B) , erm (C) , erm (F) , erm (T) , msr (A) , msr (B) , mph ( C) , lnu (A) , lnu (B) , vga (A) , ant (4 ) -Ia , aph (3 ) -IIIa , aac (6 ) Ie-aph (2 ) , aad (A) , aad (E) , str , fus (B) и fus (C) ] в S.aureus исследовали с помощью ПЦР (Удо, Аль-Свейл и Норонха, 2003; Лозано, и др., , 2011; Бенито, и др., , 2013).

Обнаружение генов вирулентности

Анализ профиля вирулентности был проведен с помощью ПЦР для выявления следующих генетических детерминант: лейкоцидин Пантона-Валентайна ( lukF / lukS- PV ) , токсин синдрома токсического шока ( tsst-1 ) и эксфолиативный токсин A ( eta ), B ( etd ) и D ( etd ).Кроме того, гены, кодирующие лейкоцидины DE ( lukD-lukE ) и M ( lukM ), ауреолизин ( aur ), ассоциированный с биопленкой белок ( bap) и коллаген-связывающий белок ( cna ). ) также были изучены с помощью ПЦР (Sabat et al. , 2000; Cucarella et al. , 2001; Witte et al. , 2007; Lozano et al. , 2011; Benito et al. , 2013).

Кластер иммунного уклонения

Пять генов, составляющих IEC ( scn , chp, sak и sea или sep ), были изучены с помощью ПЦР.В зависимости от наличия или отсутствия этих генов и их различных комбинаций все изоляты S. aureus были классифицированы на семь типов IEC в соответствии с ранее описанными схемами (van Wamel et al. , 2006).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Изоляция

S. aureus

Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов) (Таблица 1).Более конкретно, S. aureus был получен в образцах фекалий двух младенцев на 7-й день, трех — на 14-й день и десяти — на 35-й день после рождения (таблица 2). Золотистый стафилококк был обнаружен как в молоке матери, так и в фекалиях младенца в шести из исследованных случаев. Выявлено четыре потенциальных случая передачи инфекции от матери ребенку при грудном вскармливании (таблица 1).

Таблица 1.

Основные характеристики штаммов S. aureus , выделенных от матерей и младенцев в этом исследовании.

. Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440
Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнский MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнская MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

Таблица 1.

Основные характеристики штаммов S. aureus , полученных от матерей и младенцев в этом исследовании.

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнский MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

6

6

6 Младенческий t322

9 ER2361 ST5 / CC5EN

, класс

1 —

6 9136 9136

1 —

6

6

1

6

6

6 ST45 / CC45

9236 III

III —

92 361 t136

9229

Случаи NON S. aureus передача матери ребенку

1

str

CC 2361

/9 GEN, TOB, STR, FUS, CIP

9206

CC —

61 —

06 923UK

61

06 923 DE

1

1

. . MRSA /
.

.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штаммов
.
СПА тип
.
агр
.
SCC МЭК
.
MLST / CC a
.
Фенотип b
.
Генотип
.
IEC тип c
.
Другие гены d
.
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus матери ребенку
1 1 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-AF (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Мать MRSA 7 t322 II CC61 /

II 9020 ERY, CLI, GEN, TOB, KAN erm (C), lnu (A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, aph (3 ) -III3 F luk-DE, aur 900 04 2 , эта 2
Мать MSSA 1 t136 III ST34 / CC30

1 — ST34 / CC30

1 — luk-DE, aur, tsst-1
2 младенец MRSA 5 t322 II IV erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
Материнский MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB6 er, KAN

l A), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), муравей (4 ) -Ia F luk-DE, aur, eta
Младенец MSSA 1 ST34 / CC30 E aur, tsst-1
3 Младенец MSSA MSSA B aur, cna
Младенец MSSA 3 9236 9020 III E luk-DE, eta, aur, tsst-1
Мать MSSA 1 III ST34 / CC30 E luk-DE, eta, aur, tsst-1 1 MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 1 9023

9236 9236

Материнская плата, cna, cna, cna MSSA 1 t021 III ST1869 / CC30 aur, cna, cna, tsst
5 Младенец MRSA

6 9236 II

IV

ST5 / CC5 ERY, CLI, GEN, TOB erm (C), aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia F luk-DE, aur
6 Младенец MSSA 1 t015 I 9023 9023 ST206206 F luk-DE, aur, cna
Мать MSSA 1 t021 III aur, cna, tsst-1
7 младенец MRSA 1 t002 II ST, t002 II msrA, mrsB, aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia, str, fus (C) E luk-DE, aur
8 для младенцев MSSA 1 t012 III A luk-DE, aur, cna, tsst-1
для младенцев MSSA 1 t5204 II CC С luk-DE, aur
9 младенец MSSA 1 t122 ​​ III ST30 / CC30 STR

06 923

STR

06 923 923 , cna, tsst-1

10 младенец MSSA 1 t10664 I ST8 / CC8

06 923ur , cna

11 Младенцы MSSA 1 t148 I ST1434 / CC72
12 Младенец MRSA 1 t322 II IV ST5 / CC5 90 206

STR str F luk-DE, aur
Материнская MSSA 3 t1661 t1661 III CC3

лук-ДЕ, авр, цст-1, эта 1
Материнская MSSA III 1

ST30 / CC30 B aur, cna, tsst-1

Таблица 2.

Staphylococcus aureus штаммов, выделенных в 12 случаях от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, согласно оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0

0 6

.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0 90.

Staphylococcus aureus штаммов, выделенных в 12 случаях от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, согласно оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.

. Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440
Изоляты детских фекалий
.
. Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа
.
MLST
.
Шаблоны PFGE a
.
Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
Корпус 4 C
Корпус 5 C5513 C5514
Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

Корпус 8 C5511, C5512
9023
Корпус 10 C5530
Корпус 11
Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0

0 6

.

9236

C,

6 C550950 9206

6 C550 0 ST1869

1

9236 9236 9206

9236 9206 9206 9206

1

1

1

1

1

1

9206 9206

9206 9206 9206 0206

0 9689 изолятор

Молекулярный изолятор

Всего 41 S.aureus были выделены в этом исследовании от матерей и младенцев, и 18 из них были признаны MRSA, поскольку они показали устойчивость к оксациллину и цефокситину и были положительными по гену mec A. Эти изоляты MRSA были получены от 2 из 21 протестированной матери (9,6%) и от 5 из 21 ребенка (23,8%). Остальные 23 изолята были чувствительны к оксациллину и цефокситину, не имели гена mecA и рассматривались как MSSA.

Результаты полной характеристики всех изолятов MRSA и MSSA, выделенных в этом исследовании, показаны в таблице 1.Было обнаружено двенадцать различных типов спа (t002, t012, t015, t021, t122, t136, t148, t166, t322, t440, t5204 и новый тип spa , зарегистрированный как t10664 в Ridom Spa Server), и большинство Частые agr аллотипов были II и III.

Изоляты Staphylococcus aureus принадлежали к восьми различным типам последовательностей (ST5, ST8, ST15, ST30, ST34, ST45, ST1434 и ST1869), включенным в шесть различных клональных комплексов (CC5, CC8, CC15, CC30, CC45 и CC72).Изоляты MRSA были типированы как ST5 ( spa -322 и spa -t002), отнесены к клональному комплексу CC5 и типизированы как SCC mec IV. Другие ST, идентифицированные среди MSSA, были (приписаны ST / CC): ST8 / CC8, ST15 / CC15, ST30-ST34-ST1869 / CC30, ST45 / CC45 и ST1434 / CC72. Преобладающими клональными комплексами были CC5 и CC30, они составляли 43,9 и 36,6% от общего числа изолятов (таблица 1).

Анализ PFGE для проверки потенциального от матери ребенку

Передача S. aureus

Модель spa тип модели S.aureus от матерей и младенцев предполагают потенциальную передачу инфекции от матери к ребенку в четырех парах мать-младенец (случаи 1–4). Чтобы прояснить этот вопрос, сравнивали профили PFGE изолятов с аналогичными типами spa . Было подтверждено совместное использование клона MRSA t322 / ST5 / CC5-PFGE-A между матерями и младенцами в случаях 1 и 2. Точно так же клоны MSSA t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и MSSA t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C были общими для случая 3 и случая 4 соответственно (таблица 2, рис.1). Не было обнаружено сходства между типами spa и среди изолятов от матерей и младенцев из остальных восьми случаев.

Рисунок 1. Анализ

PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C.Сокращения. В: младенец; Мо: мама.

Рисунок 1. Анализ

PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C. Сокращения. В: младенец; Мо: мама.

Тестирование чувствительности и выявление генов устойчивости к противомикробным препаратам

Изоляты MSSA показали чувствительность к большинству протестированных противомикробных препаратов, за исключением двух изолятов, отнесенных к линиям CC30 и CC45, которые проявляли устойчивость к стрептомицину и которые содержали ген str . С другой стороны, изоляты MRSA-CC5-t322 демонстрируют фенотип множественной лекарственной устойчивости с устойчивостью к эритромицину, клиндамицину, гентамицину, тобрамицину и канамицину в дополнение к устойчивости к метициллину; эти изоляты несли erm (C) , aac (6 ) -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia и aph (3 ) -III , и два из них также несли ген lnu (A) .В дополнение к вышеупомянутым противомикробным препаратам один изолят, типизированный как t002-ST5 / CC5, показал устойчивость к ципрофлоксацину, стрептомицину и фузидовой кислоте, содержащий гены str и fus (C) (Таблица 1).

Гены вирулентности

Различное количество факторов вирулентности было обнаружено среди 41 изолята S. aureus (таблица 1). Интересно, что 15 изолятов MSSA, принадлежащих к клональному комплексу CC30, содержали ген токсина tsst-1 (36.6%), тогда как восемь изолятов (три MRSA-CC5 и пять MSSA-CC30) несли ген эксфолиативного токсина A ( эта, ). Пять из протестированных младенцев содержали в своих фекалиях TSST-продуцирующие штаммы S. aureus клонального комплекса CC30 (в двух случаях он также был обнаружен в молоке их матерей). Гены lukD – lukE были обнаружены у 30 изолятов (73,2%), из них 18 MRSA и 12 MSSA. В общей сложности 35 изолятов содержали ген aur , и 12 были положительными по гену cna (принадлежащему в основном к клональным комплексам CC30 и CC45).Все изоляты были отрицательными на присутствие генов lukF / lukS- PV, lukM, bap, etb или etd (таблица 1).

Анализ генов IEC

Только шесть изолятов S. aureus MSSA-CC30 из 41 исследованных S. aureus не содержали гены IEC. Среди остальных изолятов были получены следующие типы IEC (тип IEC / CC): A / CC30, B / CC30-CC45-CC8-CC72, C / CC15, E / CC30-CC5 и F / CC5-CC45. Типы IEC D и G не были обнаружены ни в одном из изолятов (таблица 1).

Персистентность

клонов S. aureus

Один и тот же клон S. aureus был выделен от одного и того же младенца, по крайней мере, в два разных периода отбора проб, в случаях 2 и 5, что указывает на клональную персистентность. У остальных младенцев S. aureus было выделено только в одной из трех проб фекалий, полученных в течение исследуемого периода (35 дней).

ОБСУЖДЕНИЕ

Высокий уровень фекального носительства S. aureus (12 из 21 протестированного, 57%) был обнаружен среди здоровых младенцев в этом исследовании в течение первых 35 дней их жизни.Штаммы MRSA были обнаружены у 5 из этих 12 младенцев, что составляет 23,8% от общего числа протестированных младенцев. Ни у одного из MRSA-положительных младенцев, выявленных в этом исследовании, не развилась инфекция MRSA в течение следующих 6 лет жизни (данные не показаны). В предыдущих исследованиях сообщалось о фекальном носительстве S. aureus в диапазоне от 6 до 65% у здоровых младенцев (Björkstén et al. , 2001; Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Lindberg et al. 2004) и заметно более низком MRSA. Показатели вынашивания здоровых детей и людей на момент поступления в больницу (0–5%) (Dominguez, Zarazaga and Torres, 2002; Jernigan et al., 2003), хотя зарегистрированный процент увеличился среди госпитализированных пациентов (24%) (Klotz et al. , 2005). Кроме того, предыдущее исследование показало, что колонизация кишечника младенца S. aureus была высокой в ​​течение первого месяца жизни, но уменьшалась в последующие недели (Björkstén et al. , 2001). В нашем исследовании самая высокая распространенность у младенцев была обнаружена через 35 дней после рождения. Что касается образцов молока протестированных матерей, два из 21 (9,6%) содержали MRSA, что также свидетельствует о высоком уровне носительства.

Обращает на себя внимание генетическое разнообразие типов spa , выявленных в нашем исследовании (12 различных типов spa , включая новый). Более одной трети штаммов показали типов spa , которые можно отнести к клональному комплексу CC30, линии, которая, по-видимому, успешно колонизирует людей и показала большую повсеместность (Deurenberg et al. , 2009). Этот клональный комплекс, по-видимому, связан с внебольничными инфекциями 9 . Наши штаммы MSSA CC30 показали небольшое количество генов устойчивости к противомикробным препаратам, но замечательный профиль генов вирулентности; Фактически, более 90% штаммов MSSA-CC30 содержат ген токсина синдрома токсического шока ( tsst-1 ).Эта связь между MSSA-CC30 и tsst-1 наблюдалась в других исследованиях (Deurenberg et al. 2009), но в меньших процентах, чем в нашем исследовании (Mégevand et al. , 2010; Lozano et al. , 2011). Ранняя кишечная колонизация изолятами S. aureus , продуцирующими токсины с суперантигенной функцией (TSST-1), по-видимому, способствует системным ответам IgA у новорожденных, которые отрицательно коррелируют с развитием аллергии (Lundell et al. , 2009).

Примерно одна треть из штаммов S. aureus была типирована как MRSA-t322-ST5-CC5, с agr -II и SCC mec IV. Эти штаммы показали типичный профиль HA-MRSA (Schaumburg et al. , 2012), продемонстрировали множественную лекарственную устойчивость (макролиды, линкозамины и аминоглюкозиды) и различные гены устойчивости к противомикробным препаратам, включая erm (C), aac (6 ). -Ie-aph (2 ), ant (4 ) -Ia и aph (3 ) -III, а также lnu (A) в двух из них .Обнаружение IEC типа F или E во всех этих штаммах дополнительно подтверждает их профиль HA-MRSA (Benito et al. , 2013).

Интересно, что в одном образце фекалий был обнаружен один штамм MSSA t148 / ST1434-CC72; эта клада S aureus ранее была связана со штаммами CA-MRSA, обнаруженными в азиатских странах (Harastani, Araj and Tokajian, 2014), но в нашем случае у штамма CC72 отсутствовали детерминанты устойчивости к метициллину. Точно так же штамм MSSA, типизированный как t10664 / ST8-CC8, не обладал генами токсина PVL и, следовательно, не демонстрировал типичный профиль CA-MRSA (Uhlemann et al., 2014).

Все наши штаммы S. aureus были PVL-отрицательными, а luk-M отрицательными. Более того, ни один из них не содержал ген bap , кодирующий ассоциированный с биопленкой белок (Cucarella et al. , 2001). Ранее предполагалось, что распространенность гена bap среди штаммов S. aureus очень низкая (Vautor et al. , 2008). Кроме того, восемь штаммов (19,5%) несли ген eta , кодирующий эксфолиативный токсин А, и они были отнесены к клональным комплексам CC5 и CC30.Сообщалось, что эти штаммы вызывают стафилококковый синдром ошпаренной кожи и импетиго (Masiuk et al. , 2010). Кроме того, 73,2% наших штаммов несли гены lukD – lukE , которые кодируют лейкотоксин, который более распространен в HA-MRSA (Uhlemann et al. , 2014). Двенадцать штаммов CC8, CC30 или CC45 содержат ген cna , кодирующий коллаген-связывающий белок, в основном связанный с приобретенным сообществом MRSA или MSSA (Deurenberg et al. , 2009).

Анализ

PFGE выявил четыре случая возможной передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко (рис. 1). Интересно, что один и тот же клон использовался в образцах молока и фекалий младенцев в двух разных случаях (случаи 1 и 2). Некоторые авторы предполагают, что колонизированная кожа родителей является источником большей части S. aureus , который колонизирует младенцев или младенческую микробиоту кишечника (Gries et al. , 2009), в то время как другие предполагают, что сотрудники родильного отделения могут быть еще одним источником заражения. передача между младенцами и матерями (Matussek et al., 2007). Кроме того, есть исследования, которые постулируют, что увеличение частоты появления S. aureus на коже госпитализированных пациентов может быть потенциальным источником, способствующим внутрибольничной передаче (Bhalla, Aron and Donskey 2007). В нашем исследовании клон t322-CC5, который был обнаружен в двух случаях потенциальной передачи вируса от матери ребенку, мог иметь больничное происхождение, поскольку он обладал типичными характеристиками HA-MRSA. Младенцы случаев 1 и 2 родились в одной больнице, но с разницей в 6 месяцев.

Грудное молоко представляет собой сложную биологическую жидкость, специфичную для каждого вида, адаптированную для удовлетворения пищевых потребностей быстро растущего младенца; Кроме того, он обучает иммунную систему младенца и обеспечивает определенную степень защиты от патогенов. Эти эффекты отражают синергетическое действие многих биоактивных молекул (Ballard et al. , 2013). Кроме того, недавние исследования показали, что грудное молоко является постоянным источником бактерий для кишечника младенца, а исследования как в культуре, так и в микробиоме показали, что стафилококки, в основном ЦНС, составляют доминирующие бактерии в этой биологической жидкости (Fernández et al. ., 2013). Интересно, что и S. aureus , и S. epidermidis относятся к микроорганизмам с самой высокой способностью метаболизировать олигосахариды грудного молока (Hunt et al. , 2012). Различные исследования показывают, что некоторые бактерии, присутствующие в кишечнике матери, включая стафилококки, могут достигать молочной железы на поздних сроках беременности и в период лактации через механизм, включающий моноциты кишечника (Martin et al. , 2004; Pérez et al. , 2007) .Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , включая токсигенные изоляты, влияет на уровень растворимого CD14 или IgA, циркулирующих в плазме новорожденных, что влияет на развитие иммунной системы и риск развития аллергии (Lundell et al. , 2007, 2009).

Присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца, по-видимому, является отличительной особенностью фекалий младенцев, вскармливаемых грудью, по сравнению с фекалиями младенцев на искусственном вскармливании (Borderon et al., 1996; Adlerberth et al. , 2006; Хименес и др. , 2008). В этом контексте обильное присутствие этого вида во всех образцах молока и фекалий, протестированных в этом исследовании (данные не показаны) (Jiménez et al. , 2008), может объяснить, по крайней мере частично, почему все младенцы оставались здоровыми на протяжении всего периода. период обучения, а также в последующие годы. Действительно, ЦНС, обеспечиваемая грудным молоком, может быть особенно полезной для уменьшения приобретения нежелательных патогенов младенцами, находящимися в больничной среде.Было высказано предположение, что S. epidermidis и другие ЦНС могут выполнять пробиотическую функцию, предотвращая колонизацию хозяина более серьезными патогенами, такими как S. aureus (Otto et al. , 2009). Фактически, некоторые штаммы S. epidermidis , которые ингибируют колонизацию in vivo S. aureus , были постулированы в качестве будущей стратегии по искоренению такого патогена с поверхностей слизистых оболочек (Iwase et al. , 2010; Park, Iwase и Лю 2011).

В заключение, высокий уровень фекального носительства S. aureus наблюдался среди здоровых младенцев в этом исследовании, включая штаммы MRSA. Было выявлено четыре случая передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко, что подчеркивает способность этого микроорганизма передаваться этим путем и закрепляться в кишечной микробиоте младенца. В связи с этим важно отметить, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять последствия или возможную роль этой микробной передачи от матери к ребенку.Дальнейшие исследования должны быть сосредоточены на влиянии этой ранней кишечной колонизации S. aureus у младенцев (включая колонизацию изолятами MRSA) на правильное развитие их иммунной системы, эволюцию колонизации S. aureus в течение первых лет жизни младенца и влияние на создание других бактерий кишечного микробиома.

Мы выражаем признательность за исправление текста, выполненное Ф. Руис-Ларреа.

ФИНАНСИРОВАНИЕ

Эта работа была частично поддержана проектом SAF2012–35474 Министерства экономики и конкуренции Испании и Европейского фонда де Десарролло (FEDER).Даниэль Бенито имеет докторскую стипендию FPI от Министерства экономики и конкуренции Испании, а К. Лозано финансируется проектом SAF2012–35474.

Конфликт интересов . Не существует в связи с этой рукописью.

ССЫЛКИ

Адлерберт

I

Линдберг

E

Аберг

N

et al.

Пониженная энтеробактериальная и повышенная стафилококковая колонизация кишечника младенцев: влияние гигиенического образа жизни

Педиатр Res

2006

59

96

101

Баллард

О

Морроу

AL

Состав грудного молока: питательные вещества и биоактивные факторы

Pediatr Clin N Am

2013

60

49

74

Бенито

D

Лозано

C

Gómez-Sanz

E

et al.

Обнаружение метициллин-чувствительных штаммов Staphylococcus aureus ST398 и ST133 в кишечной микробиоте здоровых людей в Испании

Microb Ecol

2013

66

105

11

Бхалла

A

Арон

DC

Донски

CJ

Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S.aureus на коже госпитализированных пациентов

BMC Инфекция Dis

2007

7

105

Björkstén

B

Сепп

E

Julge

K

et al.

Развитие аллергии и микрофлора кишечника на первом году жизни

J Allergy Clin Immunol

2001

108

516

20

Borderon

JC

Lionnet

C

Rondeau

C

et al.

Текущие аспекты фекальной флоры новорожденных без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки

Патол Биол

1996

44

416

22

Буржуа-Николаос

N

Люсет

JC

Daubié

C

et al.

Колонизация материнского влагалища Staphylococcus aureus и приобретение новорожденного при родах

Paediatr Perinat Ep

2010

24

488

91

Чо

Я

Blaser

MJ

Микробиом человека: на стыке здоровья и болезни

Nat Rev Genet

2012

13

260

70

Институт стандартов клинической лаборатории

Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать два информационных приложения M100-S24

2014

Уэйн, Пенсильвания, США

CLSI

Cucarella

C

Солано

C

Valle

J

et al.

Bap, поверхностный белок Staphylococcus aureus , участвующий в образовании биопленок

Дж Бактериол

2001

183

2888

96

Delgado

S

Гарсия

П

Фернандес

L

et al.

Характеристика штаммов Staphylococcus aureus , вызывающих мастит у человека и крупного рогатого скота

FEMS Иммунол Мед Микрофон

2011

62

225

35

Deurenberg

RH

Rijnders

MI

Себастьян

S

et al.

Staphylococcus aureus клоноспецифические маркеры коллаген-адгезин и токсин 1 синдрома токсического шока различают мультилокусные последовательности, типирующие клональные комплексы в пределах spa клональных комплексов

Диагностика Micr Infec Dis

2009

65

116

122

Домингес

E

Саразага

M

Торрес

C

Устойчивость к антибиотикам у изолятов Staphylococcus , полученных из образцов фекалий здоровых детей

J Clin Microbiol

2002

40

2638

41

Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (EUCAST)

Таблицы контрольных точек для интерпретации MIC и диаметров зон Версия 4.0 , январь 2014

Европейское общество клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (ESCMID)

Фернандес

L

Langa

S

Мартин

V

et al.

Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях

Pharmacol Res

2013

69

1

10

Gries

DM

Земзарс

TF

Gibson

KA

et al.

Пилотное исследование по оценке частоты носительства и путей заражения Staphylococcus aureus здоровыми младенцами

Am J Infect Control

2009

37

598

600

Harastani

HH

Арадж

GF

Токаджян

ST

Молекулярные характеристики золотистого стафилококка , выделенного из крупной больницы в Ливане

Int J Заражение Dis

2014

19

33

8

Хармсен

D

Клаус

H

Witte

W

et al.

Типирование метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в условиях университетской больницы с использованием нового программного обеспечения для spa повторное определение и управление базой данных

J Clin Microbiol

2003

41

5442

8

Hunt

км

Preuss

J

Nissan

C

et al.

Олигосахариды грудного молока способствуют росту стафилококков

Приложение Environ Microb

2012

78

4763

70

Ивасе

Т

Уэхара

Y

Синдзи

H

et al.

Staphylococcus epidermidis sp ингибирует Staphylococcus aureus образование биопленок и колонизацию в носу

Природа

2010

465

346

9

Жарро

S

Mougel

C

Тиулуза

J

et al.

Взаимосвязь между Staphylococcus aureus генетическими фоновыми факторами вирулентности, agr группами (аллелями) и заболеванием человека

Инфекционный иммунитет

2002

70

631

41

Джерниган

JA

Тяга

AL

Цветы

L

et al.

Распространенность и факторы риска колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus на момент госпитализации

Инфекция Cont Hosp Ep

2003

24

409

14

Хименес

E

Delgado

S

Мальдонадо

A

et al.

Staphylococcus epidermidis : отличительный признак фекальной микробиоты грудных детей

BMC Microbiol

2008

8

143

Хименес-Трюке

N

Тедески

S

Saye

EJ

et al.

Взаимоотношения между матерью и новорожденным Staphylococcus aureus колонизация

Педиатрия

2012

129

1252

9

Klotz

M

Циммерманн

S

Оппер

S

et al.

Возможный риск повторной колонизации метициллин-резистентным Staphylococcus aureus (MRSA) через фекальную передачу

Инт Дж. Хиг Энвир Хил

2005

208

401

5

Лешем

Е

Мааян-Мецгер

A

Rahav

G

et al.

Передача Staphylococcus aureus от матери новорожденным

Pediatr Infect Dis J

2012

31

360

3

Линдберг

E

Адлерберт

I

Hesselmar

B

et al.

Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца

J Clin Microbiol

2004

42

530

4

Лозано

C

Gómez-Sanz

E

Бенито

D

et al.

Staphylococcus aureus носительство в носу, признаки вирулентности, механизмы устойчивости к антибиотикам и генетические линии у здоровых людей в Испании, с обнаружением штаммов CC398 и CC97

Int J Med Microbiol

2011

301

500

5

Lundell

AC

Адлерберт

Линдберг

E

et al.

Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus

Clin Exp Allergy

2007

37

62

71

Lundell

AC

Хессельмар

B

Nordström

I

et al.

Высокие уровни циркулирующего иммуноглобулина А у младенцев связаны с кишечным токсигенным Staphylococcus aureus и меньшей частотой экземы

Clin Exp Allergy

2009

39

662

70

Мартин

Р

Langa

S

Reviriego

C

et al.

Комменсальная микрофлора грудного молока: новые перспективы пищевой бактериотерапии и пробиотиков

Trends Food Sci Tech

2004

15

121

7

Масюк

H

Копрон

К

Grumann

D

et al.

Ассоциация рецидивирующего фурункулеза с лейкоцидином Пантон-валентина и генетическим фоном Staphylococcus aureus

J Clin Microbiol

2010

48

1527

35

Матуссек

А

Taipalensuu

J

Einemo

IM

et al.

Передача Staphylococcus aureus от сотрудников родильного отделения новорожденным, раскрытая через spa , набрав

Am J Infect Control

2007

35

122

5

Mégevand

C

Gervaix

A

Heininger

U

et al.

Молекулярная эпидемиология колонизации носа метициллин-чувствительными Staphylococcus aureus у детей в Швейцарии

Clin Microbiol Infec

2010

16

1414

20

Мурчан

S

Кауфманн

ME

Deplano

A

et al.

Гармонизация протоколов гель-электрофореза в импульсном поле для эпидемиологического типирования штаммов метициллин-резистентных Staphylococcus aureus: единый подход, разработанный консенсусом в 10 европейских лабораториях, и его применение для отслеживания распространения родственных штаммов

J Clin Microbiol

2003

41

1574

85

Отто

М.

Staphylococcus epidermidis ; «случайный» патоген

Nat Rev Microbiol

2009

7

555

67

Парк

Б

Ивасе

Т

Лю

GY

Интраназальное введение S. epidermidis предотвращает колонизацию метициллин-резистентным Staphylococcus aureus у мышей

Plos One

2011

6 (10)

e25880

Перес

PF

Доре

Дж

Leclerc

M

et al.

Бактериальный импринтинг иммунной системы новорожденных: уроки материнских клеток?

Педиатрия

2007

119

e724

32

Сабат

А

Kosowska

K

Poulsen

K

et al.

Две аллельные формы гена ауреолизина ( aur ) в пределах Staphylococcus aureus

Инфекционный иммунитет

2000

68

973

6

Шаумбург

F

Кёк

R

Mellmann

A

et al.

Динамика численности метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus в Германии за 6-летний период

J Clin Microbiol

2012

50

3186

92

Магазин

Б

Матема

В

Alcabes

P

et al.

Распространенность групп специфичности agr среди штаммов Staphylococcus aureus , колонизирующих детей и их опекунов

J Clin Microbiol

2003

41

456

9

Сим

К

Пауэлл

E

Shaw

AG

et al.

Микробиота желудочно-кишечного тракта новорожденных: основа здоровья будущего?

Arch Dis Child-Fetal

2013

98

362

64

Удо

EE

Аль-Свейл

N

Норонья

BC

Хромосомное местоположение гена mupA в Staphylococcus aureus , экспрессирующем высокий уровень устойчивости к мупироцину

J Антимикробный препарат Chemoth

2003

51

1283

6

Uhlemann

AC

Отто

M

Lowy

FD

et al.

Эволюция метициллин-резистентности, связанной с населением и здравоохранением Staphylococcus aureus

Заразить Genet Evol

2014

21

563

74

Ван Белкум

А

Меллес

DC

Nouwen

J

et al.

Коэволюционные аспекты колонизации человека и инфицирования Staphylococcus aureus

Заразить Genet Evol

2009

9

32

47

Фургон Wamel

WJ

Rooijakkers

SH

Ruyken

M

et al.

Модуляторы врожденного иммунитета, стафилококковый ингибитор комплемента и белок, ингибирующий хемотаксис Staphylococcus aureus , расположены на бета-гемолизин-превращающих бактериофагах

Дж Бактериол

2006

188

1310

5

Vautor

E

Абадие

G

Pont

A

et al.

Оценка присутствия гена bap в изолятах Staphylococcus aureus , выделенных от людей и животных

Vet Microbiol

2008

127

407

11

Витте

Вт

Стромменгер

B

Stanek

C

et al.

Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ST398 у людей и животных, Центральная Европа

Emerg Infect Dis

2007

13

255

8

(PDF) Staphylococcus epidermidis в корме и кале недоношенных новорожденных

40. ЛаТуга М.С., Эллис Дж. К., Коттон С. М., Голдберг Р. Н., Винн Дж. Л., Джексон Р. Б. и др. Помимо бактерий: исследование

консорциума кишечных микробов у младенцев с крайне низкой массой тела при рождении.PLoS One. 2011; 6 (12): 1–10.

41. Магне Ф., Аб М., Морвилл П., Покхарт П., Суау А. Низкое видовое разнообразие и высокая межиндивидуальная изменчивость

в фекалиях недоношенных детей, что выявлено последовательностями генов 16S рРНК и ПЦР-темпоральной температурой-

градиентный гель профили электрофореза. 2006; 57: 128–38.

42. Schwiertz A, Gruhl B, Lo

bnitz M, Michel P, Radke M, Blaut M. Развитие кишечных бактерий

Композиция у госпитализированных недоношенных младенцев по сравнению с доношенными младенцами, находящимися на грудном вскармливании.2003;

54 (3): 393–9.

43. Smith B, Bode

´S, Skov TH, Mirsepasi H, Greisen G, Krogfelt KA. Исследование ранней кишечной микрофлоры

у недоношенных детей с / без некротического энтероколита двумя разными методами. 2012;

71 (1): 115–20.

44. Мшвильдадзе М., Ной Дж., Шустер Дж., Териак Д., Ли Н., Май В. Микробная экология кишечника у недоношенных

младенцев, оцененных с использованием некультуральной техники. 2010; 156 (1): 20–5.

45. Химе

Инез Е., Де Андре

Дж, Манрике М., Пареджа-Тобес П., Тобес Р., Марты

Инез-Бланш Дж. Ф. и др. Метаж-

номический анализ молока здоровых и страдающих маститом женщин. J Hum Lact. 2015; 31 (3): 406–15.

https://doi.org/10.1177/08

415585078 PMID: 25

4176 PMID: 28418807

60. Cacho NT, Harrison NA, Parker LA, Padgett KA, Lemas DJ, Marcial GE и др. Персонализация микробиоты

донорского человеческого молока с материнским молоком. 2017; 8 (август): 1–12.

Staphylococcus epidermidis в микробиоте недоношенных

PLOS ONE | https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0227823 3 февраля 2020 г. 14/15

Золотистый стафилококк (инфекция стафилококка) — MotherToBaby

В этом листе рассказывается о воздействии золотистого стафилококка и инфекций стафилококка во время беременности и грудного вскармливания. Эта информация не должна заменять медицинскую помощь и советы вашего лечащего врача.

Что такое золотистый стафилококк / стафилококковая инфекция?

Staphylococcus aureus (Staph) — это разновидность бактерий (микробов).Бактерии стафилококка обычно находятся на коже или в носу.

В большинстве случаев у людей не будет проблем с этими бактериями. Однако, если Staph попадает внутрь тела через порез или язву, это может привести к инфекции Staph. Инфекция стафилококка может вызвать фурункулы или волдыри на коже; или инфекции в легких (пневмония), кровоток (сепсис) или в ране.

К людям с более высоким шансом заразиться стафилококковой инфекцией относятся больные в больницах, люди, выздоравливающие после операций или других медицинских процедур, люди, живущие в условиях перенаселенности (приюты или тюрьмы), дети в детских садах, потребители инъекционных наркотиков, люди с ослабленной иммунной системой, люди с хроническими заболеваниями (например, диабет или рак), спортсмены и военнослужащие.

Употребление в пищу продуктов, зараженных бактериями Staph, также может вызвать пищевое отравление. Симптомами могут быть сильная рвота и диарея с болью в животе, которая начнется в течение нескольких часов после заражения. Этот тип инфекции, вызываемой бактериями Staph, обычно не является серьезным и длится не более суток.

Я беременна. Если у моего партнера, другого члена семьи или друга подтверждена кожная инфекция, вызванная стафилококком, что я могу сделать, чтобы уменьшить свои шансы заразиться инфекцией?

  • Не касайтесь ран, порезов или повязок человека.
  • Часто мойте руки с мылом и всегда мойте руки после прямого контакта с кем-либо, у кого есть кожная инфекция.
  • Не используйте совместно полотенца, мыло, бритвы, пинцеты или другие личные вещи.
  • Если вам нужно постирать белье для человека, инфицированного Staph, постирайте его при самой теплой температуре, рекомендованной производителем, и тщательно высушите одежду.

У меня инфекция стафилококка. Может ли мне сложнее забеременеть?

На основании имеющихся данных неизвестно, может ли инфекция Staph затруднить беременность.

Увеличивает ли заражение стафилококком вероятность выкидыша?

Выкидыш может произойти при любой беременности. На основании имеющихся данных неизвестно, увеличивает ли инфекция стафилококка вероятность выкидыша.

Повышает ли / заражение стафилококковой инфекцией риск врожденных дефектов?

Каждая беременность начинается с 3-5% вероятности наличия врожденного порока. Это называется фоновым риском. Инфекции стафилококка не связаны с повышенным риском врожденных дефектов.Однако инфекции Staph, которые достигают крови, могут вызвать лихорадку, а температура 101 градус и более может увеличить вероятность некоторых врожденных дефектов. См. Наш информационный бюллетень о гипертермии по адресу https://mothertobaby.org/fact-sheets/hyperthermia-pregnancy/ для получения дополнительной информации о лихорадке.

Может ли инфекция стафилококка вызвать другие осложнения беременности?

Если околоплодные воды (жидкость вокруг ребенка) инфицированы стафилококком, это может вызвать преждевременные роды (рождение ребенка до 37 недель).Младенцы также могут заразиться стафилококком от матери во время рождения. В большинстве случаев это не вызывает проблем у ребенка, но иногда может вызвать заболевание у новорожденного.

Вызывает ли наличие / заражение стафилококковой инфекцией во время беременности долгосрочные проблемы для ребенка?

Неизвестно, может ли инфекция стафилококка во время беременности вызвать у ребенка долгосрочные проблемы.

Могу ли я кормить грудью, если у меня инфекция стафилококка?

Инфекции, вызванные стафилококком, являются частой причиной мастита в груди.По данным Американской академии педиатрии, молоко безопасно для ребенка, и люди, страдающие маститом, могут продолжать кормить грудью.

Вполне возможно, что инфекция стафилококка может распространиться на грудного ребенка во время кормления грудью в результате прямого контакта с кожей. Если у вас кожная инфекция, вызванная стафилококком, важно держать рану закрытой повязкой, чтобы ребенок не касался раны или выделений из нее. Это важно, даже если в настоящее время вы не кормите грудью. Ребенок также может заразиться от контакта с одеждой, постельным бельем или другими материалами, на которых есть бактерии.

Кроме того, есть сообщения о том, что младенцы заразились стафилококком через сцеженное (сцеженное) грудное молоко, которое было заражено из насосного оборудования или контейнеров для хранения. Поэтому важно тщательно мыть и стерилизовать насосное оборудование и емкости для хранения, а также руки при сцеживании грудного молока.

Не все инфекции Staph требуют лечения. Однако, если вы проходите лечение, вы можете связаться с MotherToBaby, чтобы обсудить ваши конкретные лекарства во время кормления грудью.Обязательно обсудите вопросы, связанные с грудным вскармливанием, со своим врачом.

У меня инфекция стафилококка. Может ли мне осложнить беременность моей партнерши или увеличить вероятность врожденных дефектов?

Некоторые исследования показали, что инфекция Staph может повлиять на сперму и фертильность. В общем, воздействие отцов или доноров спермы вряд ли повысит риск беременности. Для получения дополнительной информации см. Информационный бюллетень MotherToBaby «Отцовские воздействия» по адресу https: // mothertobaby.орг / фактологические бюллетени / отцовские-разоблачения-беременность /.

Щелкните здесь, чтобы получить ссылки.

Просмотреть в PDF Информационный бюллетень

MRSA Action UK | Младенцы

  • Что такое золотистый стафилококк или стафилококк?
  • Какие лекарства используются для лечения кожных и раневых инфекций стафилококка?
  • Как будет выглядеть инфекция стафилококка или MRSA?
  • Что мне делать, если я думаю, что у меня инфекция стафилококка или MRSA?
  • Как предотвратить распространение кожных инфекций, вызываемых стафилококком или MRSA?
  • Я беременна и у меня кожная инфекция, вызванная стафилококком или MRSA.Будет ли это вредно для ребенка?
  • Я беременна, у меня стафилококк. Есть ли безопасное лечение?
  • Я кормлю грудью. Могу ли я принимать антибиотики при инфекции стафилококка или MRSA?
  • Могу ли я заразиться от моего ребенка, находящегося на грудном вскармливании, стафилококком или MRSA?
  • Что делать, если я беременна, кормящая мать и болею MRSA или контактировала с кем-то, у кого есть MRSA?
  • Должен ли я ограничить контакты с кем-либо, у кого есть MRSA, со мной или моим ребенком?
  • Другие полезные источники информации
  • Список литературы
  • Что такое золотистый стафилококк или стафилококк?

    Золотистый стафилококк (стафилококк) — это тип бактерий (микробов), обнаруживаемых на коже или в носу.В большинстве случаев у людей не будет проблем с этими бактериями, и люди, прошедшие скрининг или анализы перед операцией, считаются «колонизированными», если у них обнаруживается стафилококк на коже или в носу. Колонизация означает, что микроб не причиняет вреда. Однако, если стафилококок попадает внутрь тела через порез или язву, он может вызвать болезненные нарывы ​​или абсцессы на коже или инфекцию в легких (пневмония), кровоток или в рану, которая заживает после операции.

    К людям, которые более уязвимы к инфекциям стафилококка, относятся люди, которые уже плохо себя чувствуют, например, выздоравливающие после операций или других медицинских процедур, люди с долгосрочными заболеваниями, такими как диабет, и люди, которые ранее были инфицированы стафилококком.Около 30% населения являются носителями золотистого стафилококка. Когда происходят разрывы кожи, такие как порезы или язвы, этот организм может воспользоваться возможностью проникнуть в организм и вызвать кожную инфекцию, которая может привести к болезненным фурункулам, абсцессам или инфекции в легких.

    Какие лекарства используются для лечения стафилококка и раневых инфекций?

    Дренирование абсцессов врачом может быть единственным методом лечения кожных инфекций стафилококка. При других более глубоких раневых инфекциях может потребоваться лечение.Если необходимы лекарства, используются антибиотики. Некоторые из антибиотиков, используемых для лечения стафилококковой инфекции, включают метициллин, пенициллин, оксациллин и амоксициллин. В некоторых случаях бактерии стафилококка не реагируют на эти виды антибиотиков. Это известно как «устойчивость к метициллину к золотистому стафилококку» или «MRSA». В этой ситуации для лечения доступны другие лекарства.

    Как будет выглядеть инфекция стафилококка или MRSA?

    Бактериальные инфекции, вызванные стафилококком, включая MRSA, могут выглядеть как прыщик или нарыв, могут быть красными, опухшими и иметь гной или другую жидкость, выходящую из язвы.

    Что мне делать, если я думаю, что у меня инфекция стафилококка или MRSA?

    Обратитесь к врачу. Анализы определят, является ли инфекция стафилококком или MRSA, и позволят врачу назначить правильные антибиотики. Если вам назначили антибиотик, очень важно следовать инструкциям и использовать все лекарства в течение указанного времени, даже если инфекция проходит. Не делитесь своим лекарством с другими людьми и не сохраняйте лекарство для использования в другое время. Если инфекция не исчезнет через несколько дней или ухудшится, немедленно сообщите об этом своему врачу.

    Как я могу предотвратить распространение кожных инфекций стафилококка или MRSA?

    Соблюдайте правила гигиены, уделяя особое внимание мытью рук:
    Часто мойте руки водой с мылом, особенно после посещения туалета, обращения с деньгами, приготовления еды или смены подгузников. Может оказаться полезным регулярное использование антибактериального мыла. Очистите все порезы или царапины и накройте повязкой до образования корки. Не трогайте чужие порезы или их повязки. Если вы ухаживаете за кем-то уязвимым или навещаете кого-то в больнице, вас попросят использовать дезинфицирующее средство для рук (обычно спиртовой гель), которое помогает удалить бактерии с ваших рук.

    Я беременна и у меня кожная инфекция стафилококка или MRSA. Будет ли это вредно для ребенка?

    Хотя инфекции стафилококка или MRSA недостаточно изучены во время беременности, важно знать, что серьезные инфекции у детей, вызываемые MRSA, встречаются редко, и если у ребенка разовьется инфекция MRSA, их можно вылечить. Эти инфекции не были связаны с врожденными дефектами. Также не было сообщений об этой инфекции, вызывающей выкидыш. Любая инфекция может облегчить вам заражение другими инфекциями, поэтому лечение стафилококковой инфекции поможет вам добиться более здоровой беременности.

    Я беременна, у меня стафилококк. Есть ли безопасное лечение?

    Да. Многие типы антибиотиков можно использовать для лечения симптомов во время беременности. При необходимости может быть назначен антибиотик из класса пенициллина. Исследования, посвященные применению пенициллина или производных пенициллина во время беременности, показывают, что эти антибиотики не вызывают врожденных дефектов или каких-либо других проблем во время беременности.

    У некоторых людей аллергия на пенициллин, и им не следует принимать пенициллин или антибиотики, полученные на основе пенициллина, такие как метициллин.У вас может быть аллергия, если вы начнете принимать антибиотик и у вас появится сыпь или диарея. Если эти или другие побочные эффекты возникают после приема антибиотика, как можно скорее обратитесь к врачу.

    Я кормлю грудью. Могу ли я принимать антибиотики при инфекции стафилококка или MRSA?

    Да. У большинства детей, находящихся на грудном вскармливании, нет проблем, когда их матери принимают антибиотики. Однако у некоторых малышей может быть аллергия на препарат. Если у вашего ребенка появилась сыпь или изменился стул, немедленно обратитесь к врачу.Если у вашего ребенка аллергия, вам может потребоваться другой антибиотик для лечения кожной инфекции.

    Может ли мой ребенок, находящийся на грудном вскармливании, заразиться от меня стафилококком или MRSA?

    Вполне возможно, что стафилококковая инфекция может передаваться от матери к ребенку или от ребенка к матери во время грудного вскармливания. Как уже упоминалось, люди могут переносить золотистый стафилококк в носовом проходе. Из-за этого, если у вашего новорожденного есть стафилококк в носовом проходе, у вас может быть повышенный риск развития мастита (инфекции груди), особенно если у вас есть повреждения сосков.

    Кроме того, есть сообщения о заражении младенцев стафилококком или инфекцией MRSA через сцеженное (сцеженное) грудное молоко, которое было заражено. Поэтому важно тщательно мыть и стерилизовать насосное оборудование и емкости для хранения, а также руки при сцеживании грудного молока.

    Что делать, если я беременна, кормящая мать и болею MRSA или контактировала с кем-то, у кого есть MRSA?

    Департамент здравоохранения рекомендует, чтобы у беременных, здоровых и здоровых людей не было дополнительных рисков, связанных с MRSA.

    Грудное вскармливание безопасно для вас и вашего ребенка. Однако, как и обычные советы кормящим матерям, если вы заметили определенные симптомы, вам следует обратиться за советом к своему терапевту, акушерке или патронажной сестре. Это включает:

    — болезненная грудь

    — красные пятна или ощущение комковатости вокруг груди

    — гриппоподобные симптомы, в т.ч. температура

    Эти симптомы указывают на то, что у вас может быть мастит, но это может быть или не быть MRSA. Важно, чтобы вы сообщили своему лечащему врачу о том, что у вас есть или были инфицированы MRSA, чтобы они могли лечить вас должным образом.Обычно вы можете продолжать кормить грудью здорового доношенного ребенка в сообществе, если вам не сказали не кормить грудью до завершения любой антибактериальной терапии. Если ребенок находится на неонатальном уходе и подвергается значительному риску развития инвазивной инфекции MRSA, рассмотрите возможность отказа от грудного молока до тех пор, пока мастит MRSA не пройдет. Факторы риска включают в себя внутривенные катетеры, вентиляцию легких, недавнюю операцию или низкий иммунитет.

    Должен ли я ограничить контакты с кем-либо, у кого есть MRSA, со мной или моим ребенком?

    MRSA существует во всем сообществе.Это чаще встречается в больницах и домах престарелых, где люди проходят медицинские процедуры и находятся под присмотром. В большинстве случаев микроб не причинит вреда вам или вашему ребенку, если он не попадет в организм через разрыв кожи. Обычный социальный контакт, такой как держание за руки или объятия, обычно не представляет риска.

    Людям с разрывами на коже, например, больным или хирургическим ранам, или тем, у кого есть медицинские трубки, следует накрывать их повязкой, чтобы снизить риск попадания микробов в организм.Им также следует обязательно мыть руки до и после смены повязок или прикосновения к ранам. Это потому, что микробы чаще всего передаются через руки. Вот почему ваш врач или акушерка попросят вымыть руки, когда они придут к вам домой, когда вы родили ребенка. Медицинский персонал должен всегда мыть руки перед тем, как позаботиться о вас или вашем ребенке, будь то дома или в больнице, независимо от того, есть ли у вас инфекция или нет.

    Любые риски при контакте с человеком, у которого есть стафилококк или MRSA, можно снизить с помощью основных мер предосторожности:

    — Не делитесь полотенцами, мылом, бритвами или другими личными вещами.
    — Если вам нужно постирать белье человека, следует использовать резиновые перчатки, чтобы обращаться с его или ее одеждой и постельным бельем. Стирайте любую одежду, которая была рядом с кожей, например нижнее белье, постельное белье и полотенца, отдельно от семейной стирки.

    — Не трогайте ранки, порезы или повязки человека.

    — Мойте руки водой с мылом после прямого контакта с кем-либо, у кого есть кожная инфекция.

    Если у вас есть сомнения, обратитесь к акушерке или врачу.

    Эта информация не заменяет собой квалифицированную медицинскую помощь. Если вы считаете, что у вас есть проблема с инфекцией, немедленно обратитесь за медицинской помощью к своему врачу или акушерке.

    Другие полезные источники информации:

    Информация о мастите и грудном вскармливании от NHS Choices последний раз проверялась 06.05.2014, следующая проверка — 05.06.2016.

    Информация NHS Choices о MRSA и беременности последний раз проверялась 07.04.2015, следующая проверка должна быть произведена на 06.04.2017

    Список литературы

    Консультации для пострадавших от MRSA вне больницы, Министерство здравоохранения 2008

    Бриггс Г. 2005. Лекарства при беременности и кормлении грудью, справочное руководство по риску для плода и новорожденного.7-е изд. Балтимор, Мэриленд: Уильямс и Уильямс

    Gastelum DT, et al. 2005. Передача внебольничного метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus с грудным молоком в отделении интенсивной терапии новорожденных. Pediatr Infect Dis J. 24 (12): 1122-1124

    Кавада М. и др. 2003. Передача Staphylococcus aureus между здоровыми кормящими матерями и их младенцами при грудном вскармливании. Дж. Хум Лакт 19 (4): 411-417

    Laibl V, et al. 2005. Клиническая презентация внебольничных устойчивых к метициллину Staphylococcus aureus при беременности.Акушер-гинекол 106 (3): 461-5

    Блумфилд С.Ф., Экснер М., Синьорелли С. и др. (2011). Риски заражения, связанные с одеждой и домашним постельным бельем в домашних условиях и в повседневной жизни, и роль прачечной

    Amir LH, et al. 2006. Исследование мастита методом случай-контроль: носительство Staphylococcus aureus в носу. Семейная практика BMC 7:57

    Бехари П. и др. 2004. Передача метициллин-устойчивого золотистого стафилококка недоношенным детям через грудное молоко. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 25 (9): 778-780

    Национальный институт здравоохранения и клинического совершенства: Руководство по повышению качества профилактики и контроля инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи [Ph46]: — Дата публикации: ноябрь 2011 г.

    Инфекция: профилактика инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, и борьба с ними в первичной и общественной помощи — Клинические рекомендации NICE, CG139 — Выпущено: март 2012 г.

    Национальный институт здравоохранения и повышения квалификации (NICE): Стандарт качества инфекционного контроля [QS61]: — Дата публикации: апрель 2014 г.

    Стандарт качества Национального института здравоохранения и медицинского обслуживания (NICE) [QS113]:
    Инфекции, связанные со здравоохранением — Дата публикации: февраль 2016 г.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    . Изоляты детских фекалий
    .
    . Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
    .
    Ящики
    .
    7 дней
    .
    14 дней
    .
    35 дней
    .
    Изоляты молока
    .
    Штаммы
    .
    тип спа
    .
    MLST
    .
    Шаблоны PFGE a
    .
    Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
    C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
    Корпус 4 C
    Корпус 5 C5513 C5514
    Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

    Корпус 8 C5511, C5512
    9023
    Корпус 10 C5530
    Корпус 11
    Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440
    Изоляты детских фекалий
    .
    . Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
    .
    Ящики
    .
    7 дней
    .
    14 дней
    .
    35 дней
    .
    Изоляты молока
    .
    Штаммы
    .
    тип спа
    .
    MLST
    .
    Шаблоны PFGE a
    .
    Корпус 1 C5515 C6429 до C6436 C5515, C6429, C6433, C6435 t322 ST5 ST5 ST5 C5524, C5525 C5526, C5527 C6438 C5522, C5524, C5526, C6438 t322 ST5 A
    C, C, C, 61 C, , C, 61 C, C5535, C5536, C5537 C6437 C5520, C5537, C6437 t136 ST34 B
    Корпус 4 C
    Корпус 5 C5513 C5514
    Корпус 6 C5516 C5517 9236 9236

    Корпус 8 C5511, C5512
    9023
    Корпус 10 C5530
    Корпус 11
    Корпус 12 C5533 C5532, C5534, C6439, C6440
    8

    46. Хант К.М., Фостер Д.А., Форни Л.Дж., Шу УМЭ, Бек Д.Л., Фокс Л.К. и др. Характеристика разнообразия

    и временной стабильности бактериальных сообществ в человеческом молоке.2011; 6 (6): 1–8.

    47. Cabrera-rubio R, Collado MC, Laitinen K, Salminen S, Isolauri E, Mira A. Микробиом грудного молока

    изменяется в период лактации и определяется весом матери и способом родоразрешения 1–4. 2012;

    (август): 544–51.

    48. Jost T, Lacroix C, Braegger C, Chassard C. Оценка бактериального разнообразия в грудном молоке с использованием культурально-зависимого и независимого от культуры подходов. Br J Nutr. 2013; 110: 1253–62. https://doi.org/10.

    1017 / S0007114513000597 PMID: 23507238

    49.Ba

    ckhed F, Fraser CM, Ringel Y, Sanders ME, Sartor RB, Sherman PM, et al. Определение здорового микробиома кишечника человека

    : текущие концепции, будущие направления и клиническое применение. Клеточный микроб-хозяин.

    2012; 12 (5): 611–22. https://doi.org/10.1016/j.chom.2012.10.012 PMID: 23159051

    50. Харрелл Э., Кучерова Э., Лафлин М., Каубилья-Баррон Дж., Хилтон А., Армстронг Р. и др. Неонатальные энтеральные

    питательные трубки как локусы для колонизации представителями Enterobacteriaceae.BMC Infect Dis. 2009;

    9: 146. https://doi.org/10.1186/1471-2334-9-146 PMID: 1

    18

    51. Moles L, Go

    ´mez M, Jime

    ´nez E, Bustos G, de Andre

    ´s Дж., Мельгар А. и др. Бактериальное разнообразие желудка

    Содержание недоношенных детей в течение первого месяца их жизни в больнице. Передний гайковерт. 2017; 4 (апрель).

    https://doi.org/10.3389/fnut.2017.00012/full

    52. Ogrodzki P, Cheung CS, Saad M, Dahmani K, Coxill R, Liang H, et al.Быстрая визуализация in situ и секвенирование всего

    генома биопленки в трубках для кормления новорожденных: клиническое подтверждение концепции. Научный представитель 2017;

    (июль): 1–8. https://doi.org/10.1038/s41598-017-15769-9 PMID: 273

    53. Lepainteur M, Royer G, Bourrel AS, Romain O, Duport C, Doucet-populaire F, et al. Распространенность устойчивости к антисептикам и мупироцину среди инвазивных коагулазонегативных стафилококков от очень недоношенных

    новорожденных в отделении интенсивной терапии: надвигающаяся угроза? J Hosp Infect.2013; 83 (4): 333–6. https://doi.org/10.1016/j.jhin.

    2012.11.025 PMID: 23414707

    54. Бегович Б., Дж. Б., П обрадович М., В. К., Л. Дж., К. М. и др. Генотипическое разнообразие и вирулентные факторы Staphylo-

    coccus epidermidis, выделенные из грудного молока человека Милан Коджи c. 2013; 168: 77–83.

    55. Виллари П., Сарнатаро С., Якуцио Л. Молекулярная эпидемиология эпидермального стафилококка у новорожденных

    Отделение интенсивной терапии за трехлетний период 2000; 38 (5): 1740–6.

    56. Кабрера-Контрерас Р., Морелос-Рамирес Р., Галисия-Камачо А.Н., Мелендес-Херрада Е. Устойчивость к антибиотикам

    Производство биопленок и штаммов Staphylococcus epidermidis, выделенных из больницы высокоспециализированной медицинской помощи

    в Мехико. ISRN Microbiol. 2013; 1. https://doi.org/10.1155/2013/1 PMID: 23724338

    57. Хан ММА, Фаиз А., Ашши А.М.. Клинически значимые коагулазонегативные стафилококки и их антибиотикорезистентность в больнице третичного уровня.J Pak Med Assoc. 2014; 64 (10): 1171–4. PMID:

    25823159

    58. Конлан С., Михарес Л.А., Беккер Дж., Блейксли Р.В., Буффард Г.Г., Брукс С. и др. Анализ последовательности диспансерного генома Staphylococcus epidermi-

    выявил разнообразие изолятов, ассоциированных с кожными комменсальными и госпитальными инфекциями. Genome Biol. 2012; 13 (7): R64. https://doi.org/10.1186/gb-2012-13-7-r64 PMID:

    22830599

    59. Soeorg H, Metsvaht T, Eelma

    ¨e I, Metsvaht HK, Treumuth S, Merila M, и другие.Коагулазонегативные стафилококки

    в грудном молоке от матерей недоношенных по сравнению с доношенными новорожденными. J Hum Lact. 2017;

    33 (2): 329–40. https://doi.org/10.1177/08